تم الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بطريقة ifa. في أي حالات ومتى يتم إجراء ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية؟ ما هي الأجسام المضادة

عدوى فيروس العوز المناعي البشري مرض فيروسي حاد يمتد لفترة طويلة بدون أعراض ، ويتميز بتلف الجهاز المناعي للإنسان وخطير بسبب التشخيص المتأخر. غالبًا ما يتم استخدام المصطلحين "HIV" و "AIDS" بالتبادل ، ولكن في الواقع يعتبر الإيدز المرحلة النهائية (الأخيرة) من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، والتي تبلغ مدتها من عام إلى عامين. وفقًا لبيانات البحث ، من لحظة الإصابة إلى دخول المرض إلى المرحلة النهائية في حالة عدم وجود علاج ، يستغرق الأمر في المتوسط \u200b\u200b9-11 عامًا. يسمح لك التشخيص المبكر للمرض عن طريق ELISA أو تحليل PCR لفيروس نقص المناعة البشرية ببدء العلاج المضاد للفيروسات القهقرية في الوقت المناسب ، ووقف تطور المرض والعيش حياة كاملة لسنوات عديدة ، على الرغم من وجود فيروس نقص المناعة البشرية في الجسم.

طرق انتقال فيروس نقص المناعة البشرية:

الجنس غير المحمي
نقل الدم ومشتقاته.
استخدام أدوات غير معقمة أثناء التدخلات الطبية ؛
إصابات العاملين في المجال الطبي بأدوات غير معقمة ؛
عدوى الفترة المحيطة بالولادة: انتقال الفيروس أثناء الحمل والولادة.

يتم وصف اختبارات الإيدز (HIV):

مع الاتصال الجنسي العرضي ؛
عند التخطيط للحمل وأثناء الحمل ؛
استعدادا لدخول المستشفى.
مع انخفاض حاد في الوزن.
مع زيادة مطولة في درجة حرارة الجسم مجهولة المصدر.

فحص الدم السريع لفيروس نقص المناعة البشرية

ينتمي فيروس نقص المناعة البشرية إلى عائلة الفيروسات القهقرية (Retroviridae) ، وهي فصيلة فرعية من الفيروسات البطيئة (Lentivirus). بمجرد دخوله إلى جسم الإنسان ، فإنه يؤثر على خلايا جهاز المناعة ، ومساعدات T ، والبلاعم ، والخلايا التغصنية. يحول الفيروس القهقري RNA الخاص به إلى قطعة من الحمض النووي يتم إدخالها في جينوم الخلية المضيفة. عندما تنقسم الخلية المصابة ، تتلقى الابنة جينوم فيروسي. بالنسبة إلى مستضدات الفيروس على سطح الخلايا المصابة في الجسم ، يتم إنتاج الأجسام المضادة ، بناءً على اكتشافها يعتمد تشخيص عدوى فيروس نقص المناعة البشرية على طريقة مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA). يوصى بإجراء التحليل بعد 1.5 - 3 أشهر من لحظة الإصابة المزعومة ، في السابق لم يكن اختبار ELISA مفيدًا. يستخدم مختبر Hemotest طريقة بديلة ، Real-Time PCR (في الوقت الحقيقي PCR) ، والتي لا تكتشف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ، ولكن الفيروس نفسه في الجسم. بفضل حساسيتها العالية وموثوقيتها ، تسمح الطريقة باكتشاف حتى الجزيئات المفردة من الفيروس بعد 10 أيام (متوسط) من لحظة الإصابة المحتملة ، عندما لا توجد أجسام مضادة في الدم.

لاكتشاف الفيروس خلال "نافذة سلبيّة" ؛
مع نتيجة مشكوك فيها لطخة مناعية ؛
لتحديد النمط الجيني للفيروس - HIV-1 أو HIV-2 ؛
للتحكم في الحمل الفيروسي على الجسم ؛
لتحديد حالة فيروس نقص المناعة البشرية لحديثي الولادة إذا كانت الأم مصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ؛
بعد نقل الدم.

اختبار فيروس نقص المناعة البشرية مجهول الهوية

وفقًا للبند 2 ، المادة 8 من القانون الفيدرالي للاتحاد الروسي رقم 38-FZ ، يمكن للمريض إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية دون الكشف عن هويته والحصول على نتيجة باستخدام رقم طلب فردي لا يخضع للإفصاح. بالنسبة لأولئك الذين ، لأي سبب من الأسباب ، غير قادرين على الحضور للفحص في أحد أقسام مختبر Hemotest ، نوصي باستخدام خدمة الزيارة التي تقوم بها ممرضة لسحب الدم مع التسجيل اللاحق للعينة المأخوذة بأمر مجهول.

ألفت انتباهكم إلى:لا يمكن استخدام نتائج الاختبارات المجهولة للإيدز (HIV) في الفحوصات المهنية أو الاستشفاء أو التقديم إلى الطبيب المعالج في العيادة الشاملة.

يتم إصدار نتائج اختبار فيروس نقص المناعة البشرية ، بغض النظر عن نتيجتها ، فقط مع زيارة المريض الشخصية لقسم المختبر. عند فحص القاصرين (أقل من 14 عامًا) الأطفال - الممثل القانوني المحدد في الأمر.

تصدر النتائج عند تقديم العقد والتقدير ووثيقة هوية المريض نفسه أو ممثل المريض المحدد في الأمر.

لا يتم الإبلاغ عن نتائج البحث عن طريق الهاتف أو البريد الإلكتروني.

إذا تم تحديد تحليل لفيروس نقص المناعة البشرية لغرض التحضير للمستشفى أو للتقديم في مركز رعاية صحية ، فإن تسجيل التطبيقات الخاصة بنقلها يكون مكتملًا بالتزويد الإلزامي للبيانات التالية من قبل المريض:

1) لسكان موسكو ومنطقة موسكو

الاسم الكامل
يوم وشهر وسنة الميلاد
معلومات التسجيل
جواز السفر
وثيقة التأمين (سلسلة ورقم وثيقة التأمين ، اسم شركة التأمين).

2) للمقيمين في مناطق أخرى من الاتحاد الروسي والمواطنين الأجانب ، بالإضافة إلى ذلك - نسخة (ضوئية) من جواز السفر.

الاسم الكامل
يوم وشهر وسنة الميلاد
معلومات التسجيل
بوليصة التأمين (سلسلة ورقم وثيقة التأمين ، اسم شركة التأمين)
نسخة (ضوئية) من جواز السفر

كم عدد اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية التي تتم؟

يمكن الحصول على نتائج اختبار ELISA بعد يوم عمل واحد ، ولكن ليس قبل 1.5-3 أشهر من تاريخ الإصابة المزعومة ، ويمكن العثور على نتيجة تشخيص PCR في غضون 10 أيام من لحظة الإصابة المزعومة. مدة تنفيذ الاختبار بطريقة Real-Time PCR هي 3 أيام عمل.

يتم حاليًا إيلاء اهتمام خاص لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية (فيروس نقص المناعة) في البشر. سيساعد اكتشاف المرض في مرحلة مبكرة على بدء دورة العلاج مبكرًا وسيؤثر ذلك بشكل كبير على زيادة حياة المريض.

بعد اجتياز اختبار فيروس نقص المناعة البشرية ، يكون فك تشفير النتائج ، كقاعدة عامة ، إيجابيًا أو سلبيًا. في الوقت نفسه ، هناك تشخيص أولي وآخر ثانوي. مع الأساسي - يتم فحص الشخص باستخدام ELISA. إذا لزم الأمر ، يتم إجراء فحص دم ثانٍ لفيروس نقص المناعة البشرية. ماذا تعني النتيجة الإيجابية والسلبية؟ كيف يتم إجراء نسخة من اختبار فيروس نقص المناعة البشرية؟ لماذا الشخص الذي ليس مدمنًا على المخدرات ومدمن على الكحول لديه شريك جنسي دائم ، فإن فك شفرة تحليل فيروس نقص المناعة يعطي نتيجة إيجابية ولكنها مشكوك فيها؟

حول فيروس نقص المناعة البشرية

العوامل المسببة للمرض من النوع الأول والثاني. لفترة طويلة من الزمن ، لا يلاحظ وجودها في البشر ، ثم تتأثر المناعة أولاً وقبل كل شيء ، ثم الأنظمة البشرية الأخرى.

مع الطريقة الرئيسية للتشخيص المختبري لفيروس نقص المناعة ، يتم الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية. إن مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) هي أساس الطريقة ، فهي حساسة (99.5٪ وما فوق) ومحددة (99.8٪ وما فوق). بالإضافة إلى ذلك ، عند تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام ELISA ، يتم تحديد مستضد p24.

يحتوي كل نظام اختبار على مؤشرات مختلفة ، فيما يتعلق بهذا ، فهي تحدد هياكل البروتين المختلفة للمغلفات الفيروسية. العوامل المسببة لفيروس نقص المناعة البشرية من نوعين فرعيين: الأول والثاني أو HIV-1 و HIV-2. تبدو الجسيمات الفيروسية كشكل كروي مع غشاء فوسفوليبيد خارجي. بالنسبة للنوع الفرعي الأول ، يكون له الوزن الجزيئي التالي: gp120 ، gp41 ، gp160. النوع الثاني يحتوي على gp105 ، gp36 ، gp140. بالنسبة للغلاف الداخلي للفيروس ، يُعرف الوزن الجزيئي أيضًا. بالنسبة للنوع الفرعي الأول ، هذه هي p55 ، p17 ، p24. للثاني - ص 16 ، ص 25 ، ص 55.

هناك ثلاث مجموعات رئيسية من البروتينات لكل نظام اختبار لتحديد الفيروس.

بشكل عام ، يمكن أن تكون نتيجة ELISA:

سلبي؛
إيجابية كاذبة؛
سلبي خطأ؛
مشكوك فيها أو غامضة.

يتم الكشف عن المستضدات والأجسام المضادة عن طريق طرق التشخيص.

حول نتيجة طبيعية

نورم - ماذا يعني ذلك؟ عندما يكون اختبار فيروس نقص المناعة البشرية سلبيًا ، يعتبر هذا أمرًا طبيعيًا.

1. يمكن لأحدث جيل من أنظمة اختبار ELISA تحديد وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية وجزيئات البروتين. إذا كان التحليل طبيعيًا ، فلا توجد أجسام مضادة وجزيئات بروتينية للعامل الممرض في الدم. لكن من الممكن أن نقول على وجه اليقين أن الشخص يتمتع بصحة جيدة على أساس ذلك ، إذا لم يكن هناك خطر الإصابة لمدة 3 أشهر قبل الولادة. خلاف ذلك ، مرة أخرى ، بعد فترة ، من الضروري تكرار الاختبارات.

كانت هناك حالات تم اكتشاف فيروس نقص المناعة البشرية فيها فقط بعد 6 أشهر. لذلك ، إذا كانت النتيجة سلبية ، وكان هناك اتصال مع مريض مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية ، من أجل الموثوقية ، من الضروري تكرار الاختبارات بعد ثلاثة وأربعة وستة أشهر. يحدث أن أعطت ELISA نتيجة سلبية ، ومن الواضح أن لدى الشخص اشتباه في وجود علامات لفيروس نقص المناعة البشرية ، فمن المستحسن إجراء الاختبار مرة أخرى. نتيجة خاطئة ممكنة بسبب التوقيت المبكر للتحليل أو بسبب العوامل البشرية.

2. إذا تم الحصول على نتيجة سلبية عن طريق اللطخة المناعية ، فهذا هو التحليل الأكثر موثوقية في الوقت الحالي.

إذا كان الشخص مصابًا بفيروس نقص المناعة وكانت النتيجة سلبية ، فمن المرجح أن يكون هذا خطأ طبيًا يمكن أن يحدث في أي مرحلة من مراحل الاختبار. إذا كانت النتيجة سلبية عند تكرار الطعم المناعي بعد ثلاثة وستة أشهر ، فلا داعي للقلق ، فهذا يشير إلى القاعدة. وفقط بعد استجابة مناعية سلبية ، سيتم إصدار شهادة تفيد بأن اختبار فيروس نقص المناعة البشرية سلبي.

3. نادرًا ما تستخدم أبحاث تفاعل البوليميراز المتسلسل لدى البالغين عند تشخيص فيروس نقص المناعة ، وتستخدم هذه الطريقة للأطفال حديثي الولادة.

تعتبر النتيجة السلبية أيضًا القاعدة هنا.

4. وفقًا لبحث اجتماعي ، يستخدم العديد من الأشخاص اختبار فيروس نقص المناعة البشرية السريع. عند رؤية الشريط السلبي ، يهدأ الناس ويرفضون الذهاب إلى منشأة طبية ، حتى لو كانت لديهم جميع علامات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. لكن عليك أن تعرف أن دقة الاختبار السريع تبلغ خمسة وثمانين بالمائة. بالإضافة إلى ذلك ، في المنزل ، يمكنك إجراء ذلك بشكل غير صحيح ، أو سيتم انتهاك شروط تخزينه. من المرجح أن تكون النتيجة غير صحيحة. حتى الابتلاع قبل 8 ساعات من اختبار المياه المعدنية القلوية سيؤثر على نتيجة الاختبار. لذلك ، فإن حقيقة أن فيروس نقص المناعة غائب عند البشر على أساس اختبار صريح ، حتى لو كان سالبًا ، ليس دائمًا بيانًا صحيحًا.

فك التحليل

بعد إجراء الاختبار على الأشخاص ، غالبًا ما يُطرح السؤال حول كيفية فك شفرة نتيجة البحث ، وماذا تفعل إذا تم الحصول على نتيجة إيجابية لفيروس نقص المناعة البشرية.

1. إذا أظهرت ELISA وجود كل أو تقريبًا جميع الأجسام المضادة للمستضدات وفقًا لنظام الاختبار هذا ، فهذا يعني اختبارًا إيجابيًا لفيروس نقص المناعة البشرية. إذا كانت الاستجابة بعد المقايسة المناعية الثانية للإنزيم المصلي إيجابية ، فيجب إجراء لطخة مناعية. سيكون فك رموز نتائجه أكثر صحة. إذا أعطى الإنزيم المناعي نتيجة إيجابية ، فقد أظهر تحليل اللطخة المناعية التالية أيضًا وجود فيروس نقص المناعة البشرية ، ثم يتم وضع النتيجة النهائية. عندما يتم فك رموز الاختبارات ، فأنت بحاجة إلى معرفة أنه تم تحديد اختبار فيروس نقص المناعة البشرية الإيجابي:

60٪ إلى 65٪ 28 يومًا بعد الإصابة ؛
80٪ - بعد 42 يومًا ؛
في 90٪ - بعد 56 يومًا ؛
95٪ - بعد 84 يوم.

إذا كانت الاستجابة لفيروس نقص المناعة البشرية إيجابية ، فهذا يعني أنه تم اكتشاف الأجسام المضادة للفيروس. لتجنب الإجابة الإيجابية الخاطئة ، من الضروري اجتياز الاختبارات مرة أخرى ، ويفضل مرتين. إذا تم الكشف عن الأجسام المضادة لنقص المناعة عند اجتياز اختبارين من اثنين ، أو عند اجتياز 3 اختبارات في 2 منهم ، فإن النتيجة تعتبر إيجابية.

يمكن اكتشاف مستضد p24 في الدم منذ 14 يومًا من يوم الإصابة. باستخدام طريقة المقايسة المناعية للإنزيم ، يتم اكتشاف هذا المستضد من 14 إلى 56 يومًا. بعد 60 يومًا ، لم يعد موجودًا في الدم. فقط عندما يتشكل الإيدز في الجسم ينمو هذا البروتين p24 مرة أخرى في الدم. لذلك ، يتم استخدام أنظمة اختبار المقايسة المناعية للإنزيم للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية في الأيام الأولى من الإصابة ، أو لتحديد كيفية تقدم المرض ومراقبة عملية العلاج. تكتشف الحساسية التحليلية العالية لمقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم مستضد p24 في المادة البيولوجية في فيروس نقص المناعة البشرية من النوع الفرعي الأول بتركيز من 5 إلى 10 بيكوغرام / مل ، في فيروس نقص المناعة البشرية من النوع الفرعي الثاني من 0.5 نانوغرام / مل أو أقل.

2. تعني النتيجة المشكوك فيها لفحص الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم أن التشخيص قد تم في مكان ما ، كقاعدة عامة ، هناك شيء مرتبك من قبل العاملين في المجال الطبي ، أو أن الشخص لديه علامات العدوى ، والنتيجة سلبية ، مما يثير الشك ، يتم إرسال الشخص لإجراء اختبار ثانٍ.

3. تُفهم النتيجة الإيجابية الخاطئة كنتيجة عندما يتم إجراء اختبارات الدم في ظل الظروف التالية للمريض:

حمل؛
إذا كان الشخص يعاني من اضطراب هرموني.
مع كبت المناعة لفترات طويلة.

كيف تفك شيفرة التحليل في هذه الحالة؟ يتم إعطاء نتيجة إيجابية خاطئة إذا تم اكتشاف بروتين واحد على الأقل.

نظرًا لحقيقة أن مستضد p24 يعتمد بشكل كبير على الاختلافات الفردية ، باستخدام هذه الطريقة ، في الفترة الأولى من الإصابة ، يتم اكتشاف 20 ٪ إلى 30 ٪ من المرضى.

حول المؤشرات بعد البحث بطريقة تفاعل البلمرة المتسلسل

باستخدام هذه الطريقة ، يتم اكتشاف HIV RNA و DNA على الفور تقريبًا بعد الإصابة. لكن لم يتم إجراء التشخيص النهائي ، فهو يتطلب تأكيدًا إلزاميًا بطرق أخرى. "ساعد في فك نتيجة PCR." - في كثير من الأحيان يمكنك سماع مثل هذا الطلب. ما هو مكتوب في هذه الحالة إذا تم الكشف عن فيروس نقص المناعة؟ عند الاستجابة لنتيجة تحليل تم إجراؤه باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل ، يشار إلى عدد نسخ الحمض النووي الريبي في مليلتر من الدم. يوضح الجدول أدناه النتيجة اعتمادًا على الخصائص الكمية في الدم.

من الجيد استخدام الجدول أعلاه عند اختبار الإيدز ، حيث يمكن بسهولة تحديد مرحلة المرض.

هذه الجداول ، مع مراعاة أنظمة الاختبار المختلفة ، موجودة في غرف المختبر لكل طريقة من طرق المقايسة المناعية الإنزيمية والتخثر المناعي.

كثيرا ما يُسأل: "فك الجواب بعد الدراسة بطريقة تفاعل البلمرة المتسلسل من حيث CD4". يتراوح العدد الطبيعي لخلايا CD4 من 600 إلى 1900 خلية لكل مليلتر من المادة البيولوجية. هذا يتوافق مع حالة فيروس نقص المناعة البشرية السلبية. لكن عليك أن تعرف أن هذه المؤشرات ، حتى في الأشخاص الأصحاء ، ليست في هذا النطاق.

في العالم الحديث ، تمتلك العديد من المختبرات بالفعل معدات جيدة يمكن من خلالها فحص الجسم بالكامل لمعرفة محتوى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية فيه.

في تواصل مع

بفضل تطور الطب الحديث ، لم يعد الطبيب ، عند إجراء التشخيص ، بحاجة إلى التركيز على المظاهر غير المباشرة للأمراض أو إجراء دراسات معملية متعددة المراحل. يكفي إجراء تحليل واحد يؤكد أو يدحض التشخيص الأولي المزعوم.

هذه الطريقة عبارة عن مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) - تسمح لك هذه الدراسة باكتشاف أجسام مضادة ومستضدات معينة متأصلة في مجموعة متنوعة من الأمراض ، مما يسرع التشخيص بشكل كبير.

تحليل ELISA عبارة عن دراسة معملية (طريقة) تساعد على تحديد وجود أو عدم وجود أجسام مضادة معينة في الجسم لمحاربة الفيروس ومقدارها.

أساس الدراسة هو مستضد التفاعل الطبيعي (جسم ضار بالجسم) - جسم مضاد (بروتين يدمر الأشياء الضارة) ، مما يجعل من الممكن اكتشاف وجود العديد من الفيروسات والبكتيريا.

ELISA هي استجابة مناعية طبيعية للجسم - تفاعل جسم مضاد مع مستضد مطابق. لذلك ، خلال ELISA ، تضاف المستضدات أو الأجسام المضادة إلى أنبوب الاختبار مع المادة ، وبعد ذلك يتم الكشف عن تركيز معقدات الجسم المضاد المستضد الناتجة.

إذا تم تشكيل الصدف ، ثم تنشأ المجمعات المناعية ، ثم يحدث تفاعل إنزيمي للصبغة مع الجزيء المدمج. ويرجع ذلك إلى تغير اللون أثناء الإشارة الأنزيمية إلى أن المرض يتم التعرف عليه بعد دراسة مستوى المركب المحدد.

أنواع الغلوبولين المناعي

يتم تمييز الجلوبولينات المناعية البشرية إلى عدة فئات تختلف عن بعضها البعض في الخصائص والبنية والخصائص المستضدية للسلاسل الثقيلة (سلاسل H). في جميع الثدييات ، بما في ذلك البشر ، يتم عزل خمس سلاسل H ، والتي تحدد انتماء الغلوبولين المناعي إلى الفئة المقابلة: G ، M ، A ، D ، E.

تختلف كل فئة عن بعضها البعض في الخصائص البيولوجية ، والقدرة على ربط المستضدات ، وسرعة وقوة الرابطة مع الجزيء.

تختلف وظائف كل غلوبولين مناعي (lg):

الكمية في الجسم

المهام

نصف العمر (أيام)

القيمة

70%

تكوين مناعة سلبية عند الوليد ؛

ضروري للاستجابة المناعية

تحسين البلعمة ،

21-24

توفير مناعة خلطية طويلة الأمد في الأمراض المعدية

5-10%

اللازمة لتنشيط البلعمة ،

قادرة على ربط 5 جزيئات مستضد ،

يوفر استجابة مناعية أولية

10-15

يحيد السموم والفيروسات

اللازمة لتشكيل مناعة مبكرة

يحدث ظهور الغلوبولين المناعي على طول نوع من "السلسلة" - lgM lgG ، وهذه هي الطريقة التي يتفاعل بها الجسم مع ظهور مستضد في الجسم. أثناء التشخيص المختبري ، يتم تقييم تركيز ثلاثة جلوبولين مناعي رئيسي - G ، M ، A.

مؤشرات لأخذ تحليل الغلوبولين المناعي

أصبح تحليل ELISA أكثر شيوعًا كل عام.

مثل هذه الدراسة تُسرع من عملية التشخيص ، وهذا مهم جدًا لعلاج أمراض مثل:

التهاب الكبد الفيروسي؛
عدوى فيروس نقص المناعة البشرية؛
فيروس مضخم للخلايا،
فيروس ابشتاين بار،
فيروس الهربس
الحصبة الألمانية
مرض السل،
داء السالمونيلات ،
الزحار ،
إلتهاب الدماغ المعدي،
بكتيريا هيليكوباكتر ،
داء البورليات ،
كزاز،
مرض الزهري،
الخناق،
داء البريميات ،
الكلاميديا \u200b\u200b،
ureaplasmosis ،
الميكوبلازما ،
السعال الديكي.

الديدان المفلطحة
اسكاريس
الأميبات النسيجية
tremads الكبد ،
لامبليا
التوكسوبلازما ،
تريكينيلا ،
حظ Lucky Strike،
جرعات.

ELISA هو نوع من علامات أمراض المناعة الذاتية والأورام الخبيثة.

التحضير للاختبار

عند التحضير للدراسة ، يجب الالتزام بالقواعد التالية:

يوصي الأطباء أيضًا بالالتزام بنظام غذائي خاص - لاستبعاد الأطعمة الدهنية والمقلية ، وإذا أجريت الدراسة لالتهاب الكبد ، فمن الضروري عدم تناول أي خضروات برتقالية وخاصة الفواكه الحمضية. يجب التبرع بالدم في الصباح على معدة فارغة.

يرجع التحليل الإيجابي الكاذب إلى التوصيات التي لم يتم الوفاء بها ، وخاصة استهلاك الأطعمة الدهنية ، مما يؤدي إلى ارتفاع تركيز الدهون الثلاثية في البلازما ، مما يؤدي إلى انخفاض موصلية ELISA.

عملية أخذ العينات

يمكن استخدام الدم الكامل أو المصل أو بلازما الدم الوريدي كمواد اختبار. يتم جمع المادة ، عادة من الوريد المرفقي ، باستخدام إبرة يمكن التخلص منها وأنبوب مفرغ ، يلزم 5-10 مل من الدم.

من أجل دقة النتيجة ، من المهم الالتزام بتقنية أخذ العينات الصحيحة - يجب إجراء ثقب في الوعاء نفسه والأنسجة المحيطة به في معالجة واحدة ، لذلك ، يتم استخدام إبرة قصيرة بقطر كبير ، بحيث لا يصاب جدار الوريد المقابل ولا تتلف كريات الدم الحمراء.

أيضًا ، للحفاظ على سلامة خلايا الدم الحمراء ، من الضروري أن يتدفق الدم إلى أسفل جدران أنبوب الاختبار.

أثناء تخزين المادة ، يجب تجنب تأينها المحتمل ، بالإضافة إلى ذلك ، يجب ألا تتلامس المادة مع بقايا المطهرات ، لذلك ، يتم استخدام أنبوب بلاستيكي يمكن التخلص منه فقط ، مع وضع علامة باسم المريض وتاريخ ووقت تسليم المواد.

إذا كان التخزين قصير المدى لمواد الاختبار مطلوبًا ، فسيتم استخدام غرفة تبريد بدرجة حرارة 2-4 درجة مئوية ، وإذا تطلب الأمر تخزينًا أطول ، يتم تجميد المادة عند درجة حرارة -20 درجة مئوية.

كيف يتم التحليل

بعد إعداد مادة الاختبار ، ينتقل مساعد المختبر إلى التلاعبات اللازمة. لهذا الغرض ، يتم استخدام عدد من مجموعات خاصة من المستضدات ، والتي لديها القدرة على إثارة استجابة الجسم لمهيج ، وهي عدوى مختلفة ، هرمونات ، مسببات الحساسية.

مخطط التفاعل المتوقع "الجسم المضاد للمستضد" يبدو كما يلي:

التفاعل الأولي هو Ig (Ab) القابل للاكتشاف ومستضد الممرض المنقى (Ag).
للكشف عن المجمعات المناعية الناتجة ، يتبع ذلك تفاعل مناعي جديد ، حيث يعمل Ig المرتبط كمستضد ، ويعمل اتحاد Ig (Ab) كجسم مضاد له.
المرحلة الأخيرة هي تفاعل إنزيمي مع محفز جزيء متقارن. الركيزة عبارة عن كروموجين (غير ملون) ، يتم تلوينه أثناء التفاعل ، ويتم تحديد شدة اللون من خلال المؤشر الكمي للغلوبولين المناعي في العينة.

في الوقت الحالي ، تم تطوير مجموعة متنوعة من متغيرات ELISA ؛ لا يوجد تصنيف واضح لها. عادة ، يتم النظر في الطرق على أساس تقسيمها إلى غير متجانسة ومتجانسة - تحدث جميع مراحل التحليل باستخدام مرحلة صلبة أو باستخدام حل فقط.

تستخدم مختبرات التشخيص السريري الحديثة عادةً ELISA غير المتجانسة (المرحلة الصلبة) ، حيث تعني المرحلة الصلبة امتصاص المستضدات أو الأجسام المضادة على السطح الصلب لآبار خاصة موجودة على صفيحة ميكروية من البوليسترين ، وتنقسم الطريقة إلى ELISA المباشر وغير المباشر.

باستخدام ELISA المباشر ، يتم تثبيت المستضد الذي تم إدخاله أثناء عملية الحضانة على سطح الآبار الفارغة ؛ لهذا ، يتم وضع عينات الاختبار في آبار نظيفة لمدة 20-25 دقيقة ، وهذا ضروري لمولد الضد للالتصاق بسطحها. بعد ذلك ، يتم إضافة الجسم المضاد المطلوب. علاوة على ذلك ، تبقى المادة لفترة معينة لتشكيل روابط.

يتم دائمًا إضافة الأجسام المضادة بشكل زائد ، لذلك ، حتى لو كانت موجودة ، تظل المستضدات غير المرتبطة في العينة ، وإذا لم يكن هناك مستضدات على الإطلاق ، فلن تكون هناك روابط. لإزالة الأجسام المضادة "الإضافية" ، يتم إجراء عملية الصب ، وبعد ذلك تبقى فقط تلك الأجسام المضادة التي خلقت رابطة مع المستضد.

ويتبع ذلك تفاعل إنزيمي - إضافة محلول مع إنزيم إلى الآبار ، وبعد ذلك يتم تلوين الروابط الناتجة.

في طريقة ELISA غير المباشرة ، يتم استخدام الأجسام المضادة التي تم دمجها مسبقًا مع ركيزة التفاعل الإنزيمي ؛ في هذه الحالة ، يحدث ارتباط الأجسام المضادة بالمولد الضد أثناء عملية الحضانة ، وبعد ذلك يتم تعبئة الروابط الموجودة على سطح الآبار ، ويتم إدخال الكاشف المترافق والركيزة الكروموجينية بعد ذلك في تلوين التفاعل.

وبالتالي ، فإن الاختلاف الرئيسي بين الطريقة غير المباشرة والطريقة المباشرة ليس التصاق المادة بسطح الآبار النظيفة ، ولكن الارتباط بالمستضد المعطل على اللوحة.

يتم إيقاف مسار التفاعل باستخدام أجهزة متخصصة ، ثم يخضع كل بئر لعملية قياس ضوئي ، تليها خاصية مقارنة للنتيجة التي تم الحصول عليها مع عينات التحكم التي تم إجراؤها مسبقًا.

إذا تم الكشف عن زيادة في الكثافة الضوئية في العينة ، فإن تركيز الأجسام المضادة المحددة في نتيجة الاختبار يكون أيضًا مبالغًا فيه.

عندما يكون التحليل جاهزًا

لا تستغرق الدراسة الكثير من الوقت ، من أخذ عينات الدم إلى الحصول على نتيجة ، فهي تستغرق من 1 إلى 10 أيام ، حسب إجراءات التشخيص.

نتائج الاختبار وتفسيرها

في نموذج التشخيص الذي يتلقاه المريض ، تتم الإشارة إلى نتيجة سلبية أو إيجابية لفئات معينة من الغلوبولين المناعي ، كما يشار إلى المؤشر الكمي لفئات مختلفة من الأجسام المضادة.

تفسيرات مختلفة للنتائج ممكنة:

IgM (+) (لم يتم اكتشاف IgA ، IgG) - عملية الاسترداد ؛
IgM (-) ؛ IgG (+) ، IgA (+) - علم الأمراض المعدية المزمنة ؛
IgM و IgG و IgA (جميعها ذات قيمة) - نقص آليات الدفاع عن العدوى ؛
IgG (+/-) و IgA (+/-) ، IgM (+) - عملية حادة ؛
IgM (-) ، IgA (-) ، IgG (+) - مناعة ما بعد العدوى ؛
IgM ، IgG ، IgA (+) - علم الأمراض المزمنة في المرحلة الحادة.

لذا ، على سبيل المثال ، إذا تم الكشف عن IgG و IgM ، فقد يكون لدى المريض أحد الأمراض التالية:

التهاب الكبد الفيروسي؛
فيروس مضخم للخلايا؛
الهربس.
الجدري؛
الكلاميديا.
المكورات العنقودية أو العدوى بالمكورات العقدية.

غالبًا ما يوصف المقايسة المناعية الإنزيمية للدراسات الهرمونية ، وتظهر المعايير في الجدول:

	اسم هرمون	أرضية	معيار
1	الغلوبولين	م / و	حتى 70 وحدة دولية / مل
2	هرمون الغدة الدرقية	م / و	64-146 نانومول / لتر
3	ثلاثي يودوثيرونين	م / و	1.8-2.8 نانومول / لتر
4	هرمون الغدة الدرقية الحر	م / و	11-25 مليمول / لتر
5	ثلاثي يودريتونين الحرة	م / و	4.49-9.3 مليمول / لتر
6	التستوستيرون ، ديهدروتستوسترون	F	0.5-10 ميليلتر / لتر

تحليل ELISA هو دراسة تشخيصية تسمح لك بتقييم احتمالية تكوين أمراض الأورام. ومع ذلك ، يتم تفسير النتائج فقط من قبل الطبيب المعالج.

معنى نتائج الاختبار

ELISA مناسبة للكشف عن أشكال مختلفة من الالتهابات التناسلية ، بما في ذلك مرض الزهري ، وغالبًا ما تستخدم لفحص النساء الحوامل.

بفضل هذه الدراسة ، يمكنك معرفة متى حدثت العدوى ومرحلة المرض في وقت الدراسة:

تشير الغلوبولين المناعي M إلى مدة المرض ؛
IgA - أصيب المريض بالعدوى قبل أكثر من 30 يومًا ؛
تم العثور على IgG في "ذروة" المرض ، أو في اللحظة التي انتهى فيها العلاج مؤخرًا.

في عملية البحث ، تظل الآبار على اللوحة ذات المؤشر السلبي عديمة اللون ، وتتحول الآبار الإيجابية إلى اللون الأصفر الساطع. إذا لم يتطابق لون الآبار الإيجابية مع لون عنصر التحكم ، فإن النتيجة تعتبر مشكوكًا فيها وإعادة الاختبار ضرورية.

إن المقايسة المناعية للإنزيم هي الخطوة الأولى في تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية. لا يمكن إجراء التحليل مباشرة بعد الإصابة المزعومة ؛ من الضروري الانتظار حتى نهاية فترة الحضانة (من 14 يومًا إلى 6 أشهر).

أثناء التحليل ، يتم تحديد الأجسام المضادة لـ HIV-1 و HIV-2 ، والبحث عن الأجسام المضادة من الفئة G ، والتي تظهر عادةً في وقت لاحق ، والأجسام المضادة من الفئة A و M ، يمكن اكتشافها في المراحل المبكرة (خلال فترة الحضانة).

إذا كان الاختبار الأول إيجابيًا ، فسيتم فحص الدم مرة أخرى بواسطة مساعد مختبر آخر ؛
تشير النتيجة الإيجابية المتكررة إلى استعادة المادة ،
عندما تتكرر النتيجة ، يتم تعيين immunoblotting المريض.

لا يتم إصدار الاستنتاج النهائي حول وجود عدوى فيروس نقص المناعة البشرية إلا بعد نتيجة التكتل المناعي.

تُستخدم ELISA أيضًا كدراسة تشخيصية لمرض السل ، ولكن حتى لو كان لدى المريض حتى أجسام مضادة لهذا المرض ، فإن هذا لا يؤكد دائمًا وجود مرض السل ، لذلك غالبًا ما يتم استخدام ELISA كتقنية توضيحية ، أو لتشخيص شكل خارجي كامن.

IgG - المرحلة المزمنة من الغزو

IgA - حدثت العدوى قبل أكثر من 30 يومًا

IgG - الغزو في المرحلة الحادة

IgG - يؤكد التشخيص ويظهر فعالية العلاج

إيجابيات وسلبيات التحليل

تتمتع ELISA بالعديد من المزايا ، مما يفسر شعبيتها بين الأطباء والمرضى ، وهي:

دقة عالية للنتيجة ،
سعر معقول،
نتيجة سريعة ،
تحديد مرحلة المرض ،
مكافحة المرض بمرور الوقت.

ومع ذلك ، إلى جانب المزايا ، هناك أيضًا عيب - في حالات نادرة ، يكون التحليل إيجابيًا كاذبًا أو سلبيًا كاذبًا.

لماذا قد تكون النتيجة غير موثوق بها

قد تنشأ أخطاء نتيجة للانتهاكات التقنية ، حيث أن التحليل غير موثوق به في الأشخاص الذين يعانون من أمراض مزمنة معينة (عامل الروماتويد) ، والتي تتميز بإنتاج أجسام مضادة محددة.

أيضا ، تتأثر النتيجة النهائية باستخدام الأدوية من قبل المرضى واضطرابات التمثيل الغذائي. لهذه الأسباب ، تتطلب النتيجة الإيجابية لفيروس نقص المناعة البشرية وأمراض الأورام أخذ عينات متكررة.

تكلفة البحث

يختلف سعر ELISA اعتمادًا على اتجاه التشخيص (روبل):

التهاب الكبد 250 -900 ؛
الفيروسات - 250-1000 ؛
فيروس نقص المناعة البشرية - 250-350 ؛
غزوات الديدان الطفيلية - 280-900 ؛
مرض الزهري -150-250 ؛
الالتهابات الفطرية 400-500.

تصميم المادة: لوزينسكي أوليغ

فيديو إليسا

كيف يتم إجراء تحليل ELISA:

عدوى فيروس نقص المناعة البشرية هي تشخيص خطير. يمكن أن تؤدي الأخطاء التشخيصية إلى عواقب وخيمة. اختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو أكثر طرق البحث التي يمكن الوصول إليها ، ولكن ليس في جميع الحالات أنها مفيدة.

ELISA - مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم. الغرض من طريقة ELISA هو الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة في المواد البيولوجية. باستخدام الطريقة ، من الممكن تتبع التواجد في السائل ليس من الفيروسات نفسها ، ولكن فقط من الأجسام المضادة المنتجة استجابةً لوجودها. يستخدم المناعي الإنزيمي على نطاق واسع في تشخيص الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي. يساعد على تحديد الالتهابات التي تنتقل عن طريق الاتصال الجنسي.

هناك عدة أنواع من ELISA: إصدار مباشر ، إصدار غير مباشر ، طريقة "ساندويتش". في أي حال ، تعتمد التقنية على تحديد وجود الأجسام المضادة التي تعمل كمؤشر لاختراق العامل الأجنبي. لتحديد هذه "العلامات" ، يتم معالجة المكون البيولوجي بالإنزيمات.

تحدد مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم الأجسام المضادة بدقة 96-98 ٪ ، الخطأ غير مهم. 2 - 4٪.

ELISA - طريقة لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية

اختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو المرحلة الأولى من التشخيص. المستضدات من فيروس نقص المناعة هي البروتينات p24 ، p15 ، p17 ، p31 والبروتينات السكرية gp 41 ، gp55 ، gp66 ، gp120 ، gp160.

للكشف عن البروتين الفيروسي ، يتم أخذ عينة الدم من الوريد. يتم التعامل مع عينة موجهة لفحص الدم بواسطة ELISA بكواشف المقايسة المناعية الإنزيمية. يتم عزل المصل من الدم. إذا تم العثور عليهم أثناء الدراسة ، فإن الفيروس موجود بالفعل في الدم.

يتم إعطاء الدم بدقة على معدة فارغة. لا يوصى بتناول الأطعمة الدهنية واستهلاك الكحول قبل يومين من التحليل. يجب التوقف عن تناول الأدوية المضادة للفيروسات في 14 يومًا.

مزايا الطريقة:

تكلفة منخفضة نسبيًا ؛
استقرار عالي الكواشف.
حساسية عالية
مدة قصيرة
الحد الأدنى من تأثير العامل البشري.

يتم تصنيع أنظمة اختبار ELISA الحديثة وفقًا للمعايير العالمية. هذا يحسن دقة الطريقة.

لا يعطي التحليل المناعي للإنزيم دائمًا نتائج موثوقة. بعد دخول الفيروس إلى مجرى الدم ، تبدأ مرحلة كامنة (كامنة) من التطور. الفترة حتى تبدأ الفيروسات في التكاثر والأجسام المضادة لم تتشكل بعد تسمى "وقت النافذة السلبي". من غير المجدي أن تفعل ELISA في هذه المرحلة. إذا حدثت عدوى ، ستكون النتيجة. تعتمد سرعة اكتشاف الفيروس على عدد الخلايا الخطرة التي دخلت الجسم. مع الجماع غير المحمي أو نقل الدم الملوث ، ستكون هذه الفترة ضئيلة.

من أجل موثوقية عالية من ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية ، يتم إجراء الدراسة ثلاث مرات. شروط ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية:

6 أسابيع بعد الاتصال المحتمل ،
في 3 أشهر ،
بعد ستة شهور.

4 جيل ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية هو الطريقة الأكثر إفادة في المراحل المبكرة من العدوى. يمكن إجراؤه في وقت مبكر بعد شهر واحد من الإصابة المزعومة. الاختبار مكلف مقارنة بالجيل الثالث التناظري. لذلك ، في المؤسسات الطبية الحكومية ، يتم استخدامه كوسيلة تشخيص إضافية. يتم إجراء الاختبار 3. مجانًا. إذا كان من المستحيل إعطاء إجابة لا لبس فيها بناءً على نتائجها ، تتم إحالة المريض إلى الجيل الرابع من ELISA.

مهم!بمجرد الإصابة ، يصبح الشخص معديًا. إنه خطر على الآخرين ، حتى عندما لا يعرف حتى الآن عن تشخيصه!

إذا اكتشفت ELISA الأجسام المضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية ، فمن الضروري إجراء دراسات إضافية. وتشمل هذه. موثوقية هذه الطريقة هي 80٪. بمساعدة PCR ، يتم فحص الدم والمني والإفرازات المهبلية. يتحلل السائل البيولوجي في مفاعل طبي ، ثم يخضع للعلاج بالإنزيمات. ونتيجة لذلك ، يتم الحصول على بيانات حول ما هو تركيز خلايا فيروس نقص المناعة البشرية في وسط سائل. بسبب الخطأ الكبير (20 ٪) مع نتيجة إيجابية ، يتم إجراء مسح مناعي إضافي.

المرحلة التالية من التشخيص هي اختبار الكومبو (أو النشاف المناعي). هذه دراسة حساسة للغاية (يقين 98٪) ، يتم إجراؤها إذا كانت نتائج ELISA غامضة بعد 6 أشهر.

تفسير نتائج ELISA

يتراوح وقت فك التشفير من 24 إلى 48 ساعة. إذا كان من الضروري الحصول على المعلومات بشكل عاجل (مطلوب التدخل الجراحي) ، يتم فك التشفير في ساعتين. لا تحتوي المراكز الطبية الإقليمية دائمًا على الكواشف اللازمة. تؤخذ العينة في مكان العلاج ، ثم يتم نقلها إلى المركز الإقليمي. في ظل هذه الظروف ، يمكن العثور على النتيجة في غضون أسبوع إلى أسبوعين.

يمكن أن تكون نتيجة التحليل المناعي للإنزيم إما إيجابية أو سلبية ؛ ليس هناك من خيارات اخرى.

حتى لو كانت النتيجة إيجابية مع ELISA الأساسي والمتكرر ، لا يمكن التعرف على المريض على أنه مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. عدم الدقة ممكن. أسباب نتيجة إيجابية خاطئة:

الأمراض المزمنة؛
الأمراض المعدية طويلة الأجل ؛
حمل.

لذلك ، ينبغي توضيح نتيجة التحليل من خلال بحث إضافي.

إذا ، عند إجراء المناعية لفيروس نقص المناعة البشرية (التفاعلي) ، يعتبر الشخص مصابًا بفيروس نقص المناعة البشرية ، مما يعني أنه بصحة جيدة.

تتكيف خلايا الفيروس بمرور الوقت مع الأدوية الموصوفة. للتحكم ، يتم تكرار اختبار ELISA بشكل دوري.

في بعض الأحيان ستظهر اللطخة الغربية نتيجة سلبية خاطئة. من النادر جدًا الإصابة بفيروس نقص المناعة لمدة 6 أشهر (أو أكثر). هذا ممكن إذا دخل عدد صغير من الخلايا الفيروسية في مجرى الدم. في 0.5 ٪ من العدد الإجمالي للحالات ، من الممكن تشخيص العدوى فقط بعد عام. في 99.5 ٪ ، في غضون ستة أشهر بعد الإصابة ، سيتم الحصول على نتيجة موثوقة خلال ELISA.

حتى مع الدراسات الدقيقة للغاية ، لا يزال معدل الخطأ 2٪. يجب ألا ننسى العامل البشري. للقضاء على إمكانية الخطأ ، يمكن إجراء الاختبار في مؤسستين مختلفتين.