فحص الدم بطريقة إيف. إليسا: ما هو نوع البحث ، ومتى وكيف يتم ، وما الذي يُظهره؟ التحضير للتحليل

عندما يوصف التحليل ، خذ اختبار ELISA لمرض الزهري. طرق التشخيص المختبري. نتائج التحليل - كيفية تحديد المعدل والانحرافات. تكلفة انزيم المقايسة المناعية.

كقاعدة عامة ، يوصَى الأطباء باستمرار عند الاتصال بالعيادة بإجراء اختبارات مختلفة. هذا يسمح لهم بتحديد الالتهابات والأمراض التي يعاني منها الشخص. إن ELISA أو ما يسمى بفحص الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم طريقة ممتازة لتقييم جهاز المناعة في الجسم ، وتحديد العدوى ومرحلة المرض عن طريق وجود الأجسام المضادة.

لذا ، من هو المكلف بإجراء هذا الاختبار وما هو المقايسة المناعية الإنزيمية؟ يصف الأطباء هذا الاختبار إذا كان الشخص يعاني من الأمراض التالية:

• طفح جلدي على الجسم - الحساسية.
• الفيروسات - الهربس ، الفيروس المضخم للخلايا.
• الأمراض المنقولة جنسيا - مرض الزهري ، المشعرة.
• علم الأمراض المرتبط بالسرطان.
• الزهري العصبي.

بالإضافة إلى الأمراض المدرجة ، يتم وصف التحليل لتحديد مستوى الهرمون في الدم. بناءً على النتائج ، يتم تقييم جودة العلاج. ربما يعرف كل شخص ما هو مرض الزهري ، لكنه لا يمثل حجمه ، وكم عدد الأشخاص المصابين المصابون بجانبنا.

يعتبر مرض الزهري حاليًا أكثر الأمراض شيوعًا. هذا هو treponoma يؤثر على جسم الإنسان. ونتيجة لذلك ، تتأثر جميع الأعضاء الداخلية للمريض.

هذه عدوى خطيرة للغاية ، وغالبًا ما يحدث أنها قد لا تظهر نفسها لفترة طويلة. لذلك ، يمكن للشخص أن يكون ناقلًا وموزعًا لفترة طويلة ، دون معرفة أنه مريض.

طريقة التشخيص المختبري

الطب لا يقف ساكنا ، وقد بدأت التحليلات الحديثة تختلف اختلافا كبيرا عن الأساليب القديمة لدراسة الجسم. على الرغم من أنهم قاموا بدورهم بشكل مثالي ، إلا أنه كان عليك في بعض الأحيان انتظار النتائج لأسابيع أو أشهر. كان هذا بطبيعة الحال غير مفيد للشخص المصاب. ما هو توقع النتيجة ، مرت على المريض.

تحليلات كلاسيكية - الكشف عن مرض الزهري بطريقة واسرمان ، بدأت طريقة كان بالتخلي عن مواقفهم وجاءت اختبارات مثل ELISA لتحل محلها.

هذه هي أحدث طريقة للكشف عن العدوى في البشر. يتم فك تشفير النتيجة باستخدام جهاز كمبيوتر. هذا يسمح لك بتحديد اختبار إيجابي أو سلبي بشكل أكثر دقة.

اقرأ أيضا عن الموضوع

ما هي الأمراض المنقولة جنسيًا؟ الأعراض والعلاج

أثناء فك التشفير ، يتم البحث عن الأجسام المضادة لأمراض معينة. ونتيجة للتحليل ، كان من الممكن تحديد العدوى عندما كانت النتيجة إيجابية. ينطوي استخدام ELISA للكشف عن مرض الزهري على استخدام ثلاث درجات من الغلوبولين المناعي:

• G ، M ، A - هي الأكثر أهمية للتشخيص.
• يتم إنتاجها في شخص مصاب في تسلسل محدد بدقة.
• يتم تحديد مرحلة الإصابة بسرعة.

نتائج ELISA - طبيعية وإيجابية

إذا كان يتحدث عن اختبار ELISA لمرض الزهري ، فمن الصعب في هذه الحالة القول بأن هناك معيارًا أو انحرافًا. تكون النتيجة عادة سلبية أو إيجابية. بالإضافة إلى ذلك ، هناك عيار لتحديد كمية الأجسام المضادة في الدم.

هناك العديد من التفاصيل الدقيقة في فك تشفير التحليل ، إذا أظهر نتيجة إيجابية ، فلا يزال يتعين إعادة التحليل عدة مرات لاستبعاد طريقة التفاعل الإيجابي الكاذب.

كما هو مكتوب بالفعل ، هناك الكثير من التفاصيل الدقيقة عند فك تشفير التحليل ، ولا يمكن إلا للطبيب المعالج تحديد النتيجة. نعطي أمثلة في الجدول ، والتي يمكن أن تظهر النتائج للمقايسة المناعية الإنزيمية:

لا تيأس إذا أظهر الاختبار نتيجة إيجابية. كقاعدة ، يتم إجراء اختبارات واختبارات إضافية ، بطرق مختلفة ، لتشخيص أكثر دقة.

تكلفة انزيم المقايسة المناعية

كقاعدة ، تعتمد تكلفة هذا التحليل بشكل مباشر على التحليل نفسه وتحديد عدوى معينة. تكلفة تحديد علامات الإصابة بأنواع مختلفة تكلف من 200 إلى 350 روبل. ويتم إجراء هذا التحليل في غضون يومين.

ELISA هي الطريقة الأكثر شعبية وحداثة لتشخيص كائن حي. أظهرت الطريقة فعاليتها في الكشف عن العدوى وتحديد الوقت المحدد للعدوى.

بالنظر إلى سياسة التسعير ، يمكننا القول أن التحليل متاح للجميع مع أي ميزانية. يسمح للطبيب المعالج بالحصول على صورة كاملة عن عدوى الشخص. أظهر نفسه وهو يعمل ولا يخيب الأطباء. في الوقت نفسه ، بعد تلقي التحليل ، يمكن للطبيب المعالج أن يتفاعل بسرعة ، ويصف العلاج في الوقت المناسب.

إن تطوير الطب الحديث في عالم التشخيص لا يتوقف أبدًا عن مفاجأة إنجازاته ، والآن لا يحتاج الطبيب إلى افتراضات حول التشخيص المحتمل ، بالاعتماد فقط على العلامات غير المباشرة. يسمح لك إنشاء وإدخال الأبحاث المختبرية في عالم مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) بتحديد وجود الممرض بسرعة ودقة ، ولكن أيضًا العديد من الخصائص الأخرى للمرض.

تاريخ إنشاء وتطوير IFA

بدأ استخدام طريقة فحص الدم هذه في الطب العملي في منتصف القرن الماضي - في مكان ما في الستينيات. في البداية ، كان هدفه هو البحث العلمي في مجال علم الأنسجة ، والذي كان يقتصر على البحث ودراسة التركيب المستضد الخلوي للأنواع البيولوجية. يعتمد اختبار الدم بواسطة طريقة ELISA على تفاعل المستضدات ذات الصلة (AG) والأجسام المضادة المحددة (AT) ، مع تكوين مركب "مضاد للجسم المضاد" ، يحدده الإنزيم.

دفعت هذه الظاهرة العلماء إلى تقرير أنه يمكن استخدام الطريقة للتعرف على مركبات البروتين من فئات مختلفة تتشكل في مصل الدم عندما يدخل العامل الممرض الجسم. بسبب مشاركتها المباشرة في عمل الجهاز المناعي ، تسمى هذه المركبات الغلوبولين المناعي (Ig ، Ig) ، وكان الاكتشاف هو أكبر اختراق في التشخيص المختبري.

في الوقت نفسه ، بدأ استخدام هذه الطريقة شديدة الحساسية فقط في الثمانينيات ، وكانت متاحة فقط في المؤسسات الطبية المتخصصة للغاية. كانت المحطات ومراكز نقل الدم ومؤسسات العلاج التناسلي والمعدي أول من أتيحت له الفرصة لاستخدام محللات المقايسة المناعية الإنزيمية. كان هذا بسبب الانتشار السريع لـ "طاعون القرن العشرين" - الإيدز ، وكانت هناك حاجة إلى إجراءات تشخيصية وعلاجية عاجلة.

إمكانيات التقنية

مجال تطبيق اختبار الدم لـ ELISA واسع جدًا - في الوقت الحالي من المستحيل تخيل مدى تعقيد البحث عن سبب العديد من الأمراض. يستخدم هذا البحث الآن في جميع المجالات الطبية تقريبًا ، حتى في علم الأورام. على الرغم من صعوبة فهم غير المطلعين ، إلا أنه في بعض الحالات ، قاموا بتنفيذها ، كان من الممكن إنقاذ حياة المرضى ، بعد اكتشاف ورم في المراحل المبكرة.

مهم! ELISA هو اختبار دم يظهر علامات مميزة لبعض العمليات الخبيثة ، مما يجعل من الممكن اكتشاف المرض في تلك المرحلة الزمنية عندما يكون خارجًا عن سيطرة أي طريقة أخرى.

في مراكز التشخيص الحديثة ، لا يتم تقديم الفحوصات المخبرية من خلال علامات الورم فحسب - بل إنها مزودة بترسانة رائعة من الألواح لهذا التشخيص. بمساعدتهم ، من الممكن تحديد العديد من الحالات المرضية ، مثل التشوهات الهرمونية والعمليات المعدية من أصول مختلفة.

بالإضافة إلى ذلك ، فإن إجراء اختبار الدم ELISA وفك تشفيره سيجعل من الممكن تتبع تأثير الأدوية على جسم الشخص المريض وحتى الحيوان. يستخدم هذا الأخير على نطاق واسع في العيادات البيطرية ، مما يساعد على الحفاظ على صحة الحيوانات الأليفة أو المعيلين لدينا ، وتوفير إمدادات مستقرة من اللحوم ومنتجات الألبان والبيض ، والتي لا يمكن استبدالها في النظام الغذائي.

لذلك ، نتيجة لأخذ بضع ملليلتر فقط من الدم الوريدي وتشخيصه باستخدام طريقة ELISA ، سيتمكن الطبيب ، بعد وصف مواد البحث ، من تحديد:

• الحالة الهرمونية ، بما في ذلك المواد النشطة بيولوجيًا للغدد التناسلية والغدد الدرقية ، وكذلك الغدد الكظرية ؛
• وجود الالتهابات البكتيرية والفيروسية (التهاب الكبد B و C ، والزهري ، الهربس ، الكلاميديا \u200b\u200b، السل ، myco- و ureaplasmosis ، HIV ، TORCH) وأمراض أخرى من هذا النوع ؛
• علامات النشاط الحيوي لمسببات المرض في العملية المرضية ، والتي انتهت بالتعافي ومر إلى مرحلة تكوين الأجسام المضادة (الاستجابة المناعية).

يسهل التعرف على هذه المجمعات وإزالتها بواسطة الخلايا المناعية. يتم احتواء التأثيرات المتبقية في شكل أجسام مضادة في حالات متعددة في الدم مدى الحياة ، مما يقلل عمليًا من مخاطر إعادة العدوى إلى الصفر.

أنواع الغلوبولين المناعي

هناك عدة أنواع من الأجسام المضادة ، وكل منها يشارك في عملية الاستجابة المناعية في مرحلة معينة. على سبيل المثال ، تكون الغلوبولين المناعي من الفئة M (IgM) هي الأولى التي يتم تشكيلها استجابة لدخول ارتفاع ضغط الدم في الجسم. لوحظت أعلى معدلاتها في الأيام الأولى من المرض.

أنواع الغلوبولين المناعي المستخدم في ELISA

ثم يطلق جهاز المناعة فئة G Ig (IgG) في البلازما ، المسؤولة عن التدمير الكامل للمستضدات واستعادة المريض. في وقت لاحق ، يستمرون في الدم ، وبالتالي إعداد مناعة لضربة متكررة لممرض متطابق. هذه هي طريقة عمل التطعيم. مع إدخال مستضدات ضعيفة للكائنات الحية الدقيقة المرضية ، تظهر العديد من الغلوبولين المناعي وتبقى متداولة في البلازما.

الأهداف الرئيسية التي تهم التشخيص المختبري هي فئات Ig M و G و A. حسب مستوى تركيزها ، يمكنك تحديد مرحلة المرض ومعرفة الأمراض المعدية التي يعاني منها الشخص في حياته. على سبيل المثال ، يمكنك التحقق مما إذا كان هناك تاريخ من الجدري أو الحصبة الألمانية. الطبيب ، من أجل معرفة ما إذا كان هناك نوع معين من AT أو AH موجود في جسم المريض أو تركيز أي هرمون ، ليست هناك حاجة لوصف فحوصات مخبرية متعددة - يكفي وصف إحالة لـ ELISA.

جوهر التقنية

تعتمد منهجية البحث على عدة خيارات (مباشرة وغير مباشرة - تنافسية وغير تنافسية) لأداء المهام المسندة ، كل منها مصمم لأغراض محددة. يسمح هذا النهج بالبحث المستهدف ، وفي أقصر وقت ممكن لتحديد سبب مرض معين. للكشف عن Ig لفئات مختلفة من الفئات ، يتم استخدام لوحة 96 بئر (لوحة البوليسترين) ، وتوجد بروتينات مؤتلفة ماصة في آبارها. يلعبون دور المستضدات ، وفي المرحلة الأولية هم في المرحلة الصلبة.

عندما يدخل البئر مع بلازما الدم ، فإن المستضدات أو الأجسام المضادة تحدد الجسم فيما يتعلق بتوجهها ، وتشكل معقدًا (AG - AT). يتم إصلاح هذا التكوين بواسطة مركب إنزيم (مترافق) ، والذي سيظهر لاحقًا من خلال تلطيخ البئر المتغير. يتم إنتاج ELISA على أنظمة اختبار محددة يتم تصنيعها في مختبرات متخصصة ومجهزة بمجموعة كاملة من الكواشف.

يمكن إجراء هذا التحليل على الغسالات - الغسالات وقراءات مقياس الطيف الضوئي ، ولكنها تتطلب العمل اليدوي. بالطبع ، يكون مساعد المختبر أكثر ملاءمة وأسرع عدة مرات للقيام بجميع التلاعبات على الأجهزة المؤتمتة بالكامل. عند استخدامها ، يتم تحرير موظفي المختبر من كمية كبيرة من الأنشطة الرتيبة - الغسيل ، الغرس وبقية الروتين ، ولكن لا تستطيع جميع المؤسسات الطبية تحمل هذه المعدات باهظة الثمن

لذلك ، تواصل العديد من المستشفيات والمؤسسات التشخيصية تنفيذ ELISA بالطريقة القديمة - على الأجهزة شبه الأوتوماتيكية.

إن تفسير المواد البحثية هو حصريًا اختصاص اختصاصي التشخيص المختبري - فقط يمكن إخباره بالنتائج حول تفاصيل ودقة مسار المرض. في هذه الحالة ، يجب على الطبيب أن يأخذ في الاعتبار إمكانية الحصول على استجابات سلبية كاذبة أو إيجابية كاذبة.

فك تشفير المواد

نتيجة الفحص المناعي عالي الجودة للإنزيم يجب أن تكون نتيجة لا لبس فيها سواء تم العثور على الكائنات الحية الدقيقة المطلوبة أم لا في عينة الدم هذه. سيشير التحليل الكمي إلى مستوى التركيز ويمكن التعبير عنه بطريقتين - حسب القيمة بالأرقام أو بعدد علامات "+".

مؤشرات محللة

خلال البحث ، يتم إجراء دراسة متأنية للغلوبولين المناعي الرئيسي المتضمن في الاستجابة المناعية ، مثل:

• IgM - الكشف عن هذه الفئة يعني تطوير شكل حاد من الأمراض المعدية. يمكن أن تكون النتيجة السلبية في البحث عن IgM دليلًا على غياب العامل الممرض المطلوب ، وانتقال المرض إلى مسار مزمن.
• IgA - تعريف هذه الفئة في غياب IgM في معظم الحالات هو إشارة إلى شكل مزمن أو كامن لتطور مرض معد.
• IgM و IgA (التواجد المتزامن) - تشير النتائج الإيجابية لكلا النوعين إلى ذروة الشكل الحاد لعلم الأمراض.
• IgG - يشير وجوده إلى تحول المرض إلى شكل مزمن أو انتعاش وتكوين مناعة للعامل المحدد.

ظهور وتراكم فئة معينة من داعش يحدث في مراحل زمنية مختلفة. لذا ، على سبيل المثال ، يظهر IgM أولاً ، بعد حوالي 5 أيام من إصابة العامل الممرض. تبقى IGs في الدم لمدة 5-6 أسابيع ثم تختفي تدريجياً. في الوقت الحالي ، فهي متاحة لتحديد من قبل ELISA. بعد 3-4 أسابيع تقريبًا من بداية المرض ، يظهر IgG ، والذي قد يبقى بعد ذلك لعدة أشهر. لكن لا يتم العثور عليها دائمًا في التحليل.

تتشكل IgA في الدم في فترة 2-4 أسابيع ، بينما يتم احتواء 20٪ منها في المصل ، و 80٪ في إفراز الأغشية المخاطية. كقاعدة ، تختفي هذه الغلوبولين المناعي في غضون 2-9 أسابيع ، مما يشير إلى تدمير العامل الممرض وتعافي المريض. إذا أظهرت ELISA مع ذلك وجود IgA ، فهذا يشير إلى انتقال العملية إلى شكل مزمن.

خيارات نتائج التحليل

اعتمادًا على البيانات التي تم الحصول عليها ، يمكن إصدار إجابات ELISA على نموذج في شكل جدول مع قائمة كاملة بجميع AT و AG وإشارة إلى رد فعل إيجابي أو سلبي. في حالات معينة ، سيتم عرض القيمة الكمية - نتيجة إيجابية حادة أو إيجابية أو ضعيفة أو سلبية. يشير الخيار الثاني إلى كمية الأجسام المضادة الموجودة في عينة الدم المدروسة.

خيارات تفسير مواد ELISA

بالإضافة إلى القيم المذكورة أعلاه ، تم التحقق من معلمة كمية أخرى في عملية ELISA - مؤشر AT avidity ، محسوبًا كنسبة مئوية. وهو يوضح مدة استمرار المرض - أي أنه كلما زاد المؤشر ، كلما طالت مدة المرض.

طريقة ELISA البديلة

مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم هو تشخيص معروف ومعروف إلى حد ما. ربما لم يسمع البعض عنها من قبل ، ولكن هناك نسخة أخرى من هذه الدراسة أقل شهرة لمجموعة واسعة من الناس ، حيث يتم أخذ عينة من غير الدم. تسمى هذه التقنية بتحليل البراز للدم الغامض ، وفي كثير من الحالات تسمح لك بتجنب إجراءات استنفاد إضافية ، والتي يصاحبها أيضًا أحاسيس غير سارة.

يتيح اختبار ELISA للدم الغامض (جزيئات الهيموغلوبين) اكتشاف نزيف الجهاز الهضمي ، حتى وإن كان ضئيلًا ، ولا يمكن العثور على علاماته في براز المريض ، كما يقولون ، بالعين المجردة. إن الفحص الماص المناعي المرتبط بالإنزيم في البراز البشري في وقت قصير قادر على إظهار مرض القرحة الهضمية ، داء السلائل ، رتوج ، أورام لا تصاحبها أعراض معينة في المراحل المبكرة.

حتى الآن ، تم إنشاء الآلاف من أنواع أنظمة اختبار المقايسة المناعية الإنزيمية ، والتي توفر فرصة للعثور على AT و AG من قائمة ضخمة من الأمراض. لذلك ، يتم استخدام هذا التحليل في جميع فروع الطب تقريبًا ، لأي فئة عمرية. والضرر المطلق يسمح لك باللجوء إليها أثناء الحمل وتشخيص المرضى الضعفاء.

لقد توسعت قائمة تقنيات التشخيص المتاحة بسرعة في العقود الأخيرة ، ويحاول اختصاصيو التشخيص الجمع بين مزايا جميع التحليلات السابقة في الأساليب الجديدة ، والتخلص من جميع عيوبها السابقة.

في الآونة الأخيرة ، في كثير من الأحيان في قائمة الإجراءات التشخيصية ، يظهر المقايسة المناعية الإنزيمية - اختبار حديث وجديد إلى حد ما ، لا يعرف عنه سوى شخص عادي غير مرتبط بالطب. ومع ذلك ، فإن هذه التقنية تنضم بسرعة إلى صفوف أتباعها بين الموظفين الطبيين المؤهلين. ما هو وفي أي الحالات يجب استخدامه ، يمكنك محاولة اكتشافه من خلال التعرف على ميزاته وخصائصه الرئيسية.

البحث المناعي هو تقنية مفيدة ومختبرية تعتمد على التفاعل الجزيئي "الأجسام المضادة للمستضد" ، والتي تسمح بالكشف عن بروتينات معينة في المواد البيولوجية (عينات للبحث). يمكن أن تكون هذه البروتينات الإنزيمات ، والكائنات الحية الدقيقة المختلفة (الفيروسات والبكتيريا والفطريات) والبروتوزوا ، إلخ.

بعد اكتشاف الطريقة ، تم إعطاؤه اسم اختبار ELISA ، والذي لا علاقة له باسم المكتشفين ، ولكنه اختصار للاسم الكامل في النسخة الإنجليزية - مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم. يستخدم الأطباء في جميع أنحاء العالم هذا الاسم ، ويطلق بعض الأطباء في البلدان الناطقة باللغة الروسية أيضًا هذا النوع من الأبحاث على هذا النحو.

المبدأ الرئيسي للطريقة هو التفاعل الجزيئي "الأجسام المضادة للمستضد".

المستضد هو أي جزيء غريب يدخل جسم الإنسان كجزء من الميكروب الممرض. عادة ما تكون المستضدات جزيئات بروتينية. بالإضافة إلى الكائنات الحية الدقيقة ، يمكن أن يكون هذا "الغريب" خلايا دم لشخص آخر لا تتطابق مع عامل المجموعة أو عامل Rh.

استجابة لدخول مثل هذا المستضد في الجسم ، يتم تشغيل استجابة مناعية ، تهدف إلى الحماية ضد أي جزيئات غريبة. هذا يرجع إلى توليف العوامل الخاصة للجهاز المناعي - الأجسام المضادة (الغلوبولين المناعي). كل جسم مضاد مناسب فقط لمستضد معين ، ويحيد "الغريب" الممرض عن طريق ربطه به في مركب واحد. إنها عملية هذا الارتباط الذي يسمى تفاعل "الجسم المضاد-الأجسام المضادة".

أنواع الأجسام المضادة

تنقسم جميع الأجسام المضادة (الغلوبولين المناعي) إلى 5 أنواع اعتمادًا على مرحلة الاستجابة المناعية التي تظهر:

بالنسبة لتشخيص ELISA ، تكون مستويات الجلوبيولين المناعي IgG و IgM و IgA هي الأكثر أهمية في الغالب. من خلال ائتماناتهم ، يمكنك معرفة ما إذا كان الشخص قد أصيب بالمرض من قبل أو أصيب مؤخرًا بالعدوى ، سواء كان قد طور مناعة أو كان جسده أعزل من الأمراض.

مزايا وعيوب المقايسة المناعية الإنزيمية

في الوقت الحالي ، تعد ELISA واحدة من أكثر الطرق دقة وحساسية. وقد تم اعتماده من قبل متخصصين في مختلف مجالات الطب ويواصل توسيع تطبيقاته.

مزايا الطريقة

• دقة عالية للبيانات المستلمة.
• الحساسية (تسمح لك باكتشاف المادة المطلوبة حتى مع وجود الحد الأدنى من العامل الممرض في العينة).
• إمكانية التشخيص في الأيام الأولى للمرض أو خلال فترة الحضانة.
• سرعة الحصول على البيانات مقارنة بالتقنيات الأخرى ذات الدقة المماثلة.
• أتمتة عالية للعملية والحد الأدنى من المشاركة البشرية ، مما يقلل من خطأ المؤدي.
• الحصول على بيانات عن مرحلة العملية المرضية وفعالية العلاج المختار.
• الألم وعدم التدخل في اختيار المواد.

مساوئ الطريقة

• في معظم الحالات ، يسمح لك بتحديد استجابة الجسم للعامل الممرض ، وليس العامل الممرض نفسه.
• قبل الدراسة ، يجب أن يكون المرض المشتبه به معروفًا بدقة ، لأن الاختبار محدد للغاية.
• احتمالية وجود مؤشرات خاطئة ناتجة عن مشكلات فنية ، تناول الأدوية ، التواجد المتزامن للعديد من الأمراض المزمنة أو الاضطرابات الأيضية في جسم المريض.
• يجب أن يتم تفسير النتائج فقط من قبل أخصائي مؤهل تأهيلا عاليا ، لأنه لتفسير البيانات التي تم الحصول عليها ، من الضروري الحصول على تدريب خاص ومخزون كبير من المعرفة الطبية في منطقة معينة.
• ELISA هو تحليل نادر نوعًا ما ، لذلك لا يتم إجراؤه في جميع مختبرات التشخيص.
• هذه الطريقة مكلفة للغاية ، بالإضافة إلى الكواشف ، يجب أن يحتوي المختبر على العديد من المعدات باهظة الثمن وعينات من المستضدات المنتجة في معاهد خاصة.

في أي الحالات يتم استخدام المقايسة المناعية الإنزيمية؟

القائمة الكاملة للمؤشرات لتعيين المقايسة المناعية الإنزيمية واسعة جدًا ، فهي تشمل جميع فروع الطب تقريبًا.

في معظم الأحيان ، يتم استخدام ELISA للأغراض التالية:

• تحديد الأمراض المعدية ؛
• تشخيص الأمراض المنقولة جنسيا ؛
• تحديد الحالة المناعية أو أمراض المناعة الذاتية الفردية ؛
• تحديد علامات الورم.
• تحديد الهرمونات.

في حالة الأمراض المعدية والفيروسية ، تسمح لك التقنية بتحديد الأمراض التالية:

بالإضافة إلى ذلك ، تسمح لك ELISA بتحديد حالة الاحتشاء بسرعة وفعالية وتقييم الإمكانات التناسلية للجسم وتحديد الحساسية ومصدرها وما إلى ذلك.

يتم استخدام مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم للتجارب السريرية في تطوير عقاقير جديدة وتقييم تأثيرها على جسم الإنسان.

أنواع العينات وطرق اختيارها للبحث

في معظم الأحيان ، تكون مادة اختبار المقايسة المناعية للإنزيم هي الدم ، الذي يؤخذ من الوريد التكعيبي للمريض. يتم أخذ العينات على معدة فارغة ، خاصة في الصباح. بعد أخذ العينات من الدم ، يتم فصل وإزالة الخلايا المنتظمة التي تتداخل مع الدراسة وتترك المصل فقط.

عند تشخيص الالتهابات البولية التناسلية ، فإن اللطاخات من الأنسجة المخاطية للأعضاء التناسلية ، والمخاط من مجرى البول أو عنق الرحم ، وعينات من المستقيم ، وكشط من التآكل أو القرح في منطقة الفخذ ومن أجزاء أخرى من الجسم غالبًا ما تصبح مادة. يمكن أخذ المسحات من تجويف الفم وكذلك من البلعوم الأنفي.

في بعض الأحيان يتم استخدام المقايسة المناعية الإنزيمية في ممارسة التوليد وأمراض النساء أثناء الحمل لتحديد حالة السائل الأمنيوسي. في هذه الحالة ، يصبح السائل الأمنيوسي هو العينة. لهذا ، يتم أخذ كمية صغيرة من السائل عن طريق ثقب المثانة الجنينية بإبرة طويلة. يتم تنفيذ جميع عمليات التلاعب بأداة معقمة لتقليل المخاطر المحتملة.

غالبًا ما تصبح المادة سائلًا دماغيًا شوكيًا أو سائلًا مصليًا. يحدث هذا مع التخدير الموضعي الذي يتم إعطاؤه عن طريق الحقن.

لتوضيح نوع المواد اللازمة للمقايسة المناعية للإنزيم ، يجب على المتخصص الذي يرسل للدراسة. غالبًا ما يتم أخذ العينات من عدة أنواع في وقت واحد أو من مواقع مختلفة. يجب على الطبيب الذي يصدر إحالة لهذا النوع من الفحص أن يخبر المريض أيضًا عن التحضير لتسليم المادة الحيوية.

التحضير للمقايسة المناعية الإنزيمية

لزيادة دقة البيانات التي تم الحصول عليها بعد التحليل المناعي للإنزيم ، يجب أن يكون التحضير لاختيار المادة على النحو التالي:

• استبعاد المضادات الحيوية والأدوية المضادة للفيروسات ومضادات الفطريات قبل 10 أيام من الدراسة ؛
• في اليوم ، من الضروري استبعاد الكحول والتدخين وتعاطي المخدرات ؛
• خلال نفس الفترة ، يجب تجنب الإجهاد البدني ؛
• تحذير أخصائي الوصفة من جميع الأدوية التي يتناولها المريض ؛
• إبلاغ الطبيب في حالة الحمل أو الاشتباه في الحمل.

من الأفضل أن يتم جمع مواد الاختبار في الصباح على معدة فارغة.

إذا كان التشخيص يهدف إلى تحديد حالة الخلفية الهرمونية ، فمن المهم أن تضمن لنفسك حالة هادئة في اليوم السابق وتجنب التوتر العصبي. بالنسبة للنساء ، يتم تحديد التبرع بالدم من أجل الهرمونات بوضوح من خلال الدورة الشهرية ، والتي سيخبرها الطبيب في وقت التعيين.

قبل 2-3 أيام من اختيار المادة ، يجب استبعاد المقلية والدهنية من القائمة ، وقبل تحليل التهاب الكبد ، لا تأكل الحمضيات وأي فواكه وخضروات برتقالية وصفراء أخرى.

حل نتائج الفحص المناعي للإنزيم

عادة ما يشار إلى نتيجة الدراسة النوعية بـ "+" (موجود) أو "-" (غير موجود).

بناءً على وجود أو عدم وجود مجموعات معينة من الغلوبولين المناعي ، يمكن استخلاص الاستنتاجات التالية:

• JgM (-) ، JgG (-) ، JgA (-) - الحصانة من المرض غائبة تمامًا (لم يسبق للجسم مواجهة هذا النوع من المستضدات) ؛
• JgM (-) ، JgG (+) ، JgA (-) - سابقًا كان هناك تصادم مع هذا المستضد أو مع لقاح ؛
• JgM (+) ، JgG (- / +) ، JgA (- / +) - العملية المرضية الحادة (على الأرجح أولية) ؛
• JgM (-) ، JgG (+/-) ، JgA (+/-) - عملية الدورة المزمنة ؛
• JgM (+) ، JgG (+) ، JgA (+) - الانتكاس ؛
• JgM (-) - مرحلة الشفاء.

تحمل القيم الكمية عبئًا إعلاميًا كبيرًا ، ولكن يمكن للطبيب المعالج فقط تفسيرها ، بناءً على المؤشرات السابقة ، وعمر المريض ، والمعايير لكل مرض محدد. ولهذا السبب لا يمكنك تقييم النتائج بنفسك.

كم من الوقت يستغرق انتظار النتائج

تحتوي هذه التقنية على العديد من الأصناف ، اعتمادًا على وقت الحصول على البيانات في متناول اليد. متوسط \u200b\u200bمدة تشخيص ELISA هو 4-6 ساعات ، مما يسمح لك بإعطاء النتائج في اليوم التالي.

تستغرق أطول الطرق ما يصل إلى 10 أيام ، على سبيل المثال ، في حالة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

في حالة الحاجة الملحة ، من الممكن استخدام طرق صريحة ، حيث يتم تلقي الإجابة في غضون ساعة إلى ساعتين.

أين يمكنني الحصول على اختبار ELISA؟

نظرًا لأن معدات هذا النوع من التشخيص مكلفة للغاية ، لا يمكن لجميع المختبرات شراؤها. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الاختبارات التي تحتوي على مستضدات محددة لها صلاحية محدودة (عادة حوالي سنة واحدة) وبالتالي تحتاج إلى تحديث مستمر.

لهذه الأسباب ، لا تمتلك المؤسسات الطبية الحكومية دائمًا مختبرات ELISA. في معظم الأحيان ، تحتاج إلى الذهاب إلى المراكز الطبية الخاصة الكبيرة أو مراكز التشخيص الكبيرة.

لإجراء دراسة ELISA ، يجب أن يكون للمختبر ترخيص خاص ، ويجب أن يخضع الموظفون وفنيو المختبر لتدريب خاص.

في معظم الأحيان ، ينصح الطبيب الذي يرسل المريض للفحص بمركز تشخيص أو مختبر محدد.

تكلفة انزيم المقايسة المناعية

يعتمد سعر هذه الدراسة على منطقة البلد وعلى مستوى العيادة التي تقدم الخدمة. في موسكو ، يبدأ السعر الأدنى لتحديد مستضد واحد عند 700 روبل. إذا كان من الضروري تحديد العديد من الجلوبيولين المناعي دفعة واحدة ، فسيتم تلخيص السعر.

في حالة التحليل العاجل ، تزداد التكلفة بمقدار 150-200 روبل. لكل مستضد.

على الرغم من التكلفة المرتفعة إلى حد ما ، يسمح لك فحص الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم بإجراء فحص المريض بالمعلومات والسرعة قدر الإمكان ، مما يقلل من الوقت قبل بدء العلاج ويسمح لك باستقرار حالة الشخص بسرعة.

يعرض هذا الفيديو فيلم "أساسيات المقايسة المناعية الإنزيمية".

الآن ، كقاعدة عامة ، يُطلب من المرضى الخضوع لاختبار واحد فقط - المقايسة المناعية الإنزيمية.

تطبيق اختبار الدم ELISA

مقايسة الممتص المناعي المرتبط - نوع تحليل متخصص للغاية يتم إجراؤه في المختبر. يعتمد التحليل على استجابة الجسم ، والتي يشار إليها عادةً باسم "الجسم المضاد-المستضد".

تعطي طريقة التحليل القائمة على هذا المؤشر دقة 99٪. هذه هي الطريقة الأكثر دقة المعروفة اليوم. من الناحية العملية ، لم تكن هناك حالات تقريبًا عندما أعطى هذا التحليل نتائج خاطئة.

يستخدم المناعي الإنزيمي على نطاق واسع في تشخيص مجموعة متنوعة من الأمراض. قيمتها الرئيسية هي أنه يسمح بالكشف عن الأمراض بدون أعراض بدقة عالية.

كما تعلم ، غالبًا ما تكون هذه الأمراض مشكلة للكشف عنها في مرحلة مبكرة ، وبالتالي ، تبدأ في التعافي في الوقت المناسب.

ما هي الأمراض التي يتم تشخيصها باستخدام المقايسة المناعية الإنزيمية:

• أمراض الأورام.
• الأمراض المنقولة جنسيا (فيروس نقص المناعة البشرية ، الكلاميديا \u200b\u200b، الزهري ، ureaplasmosis ، الهربس وغيرها من الأمراض) ؛
• السل ، الحصبة ، داء المقوسات ، التهاب الكبد ، وما إلى ذلك ؛
• هرمونات الغدة الدرقية؛
• الهرمونات الجنسية
• مختلف اضطرابات المناعة الذاتية.
• ردود الفعل التحسسية وعدم تحمل بعض الأطعمة.

يساعد هذا الإجراء في تحديد:

• إصابة الجسم بالبكتيريا والفيروسات ؛
• قاعدة البروتين
• غزوات الديدان الطفيلية
• الهيئات الأجنبية.

في الواقع ، يتكون إجراء ELISA من جزأين:

1. استجابة مناعية؛
2. تفاعل إنزيمي.

إن جوهر مبدأ "الجسم المضاد - الأجسام المضادة" هو أن العامل المسبب للمرض أو الجسم الغريب ، أي المستضد ، يدخل الجسم تدريجياً مع مصدر العدوى. تؤدي هذه العملية إلى ما يسمى الاستجابة المناعية ، المصممة لحماية الجسم من العناصر الأجنبية.

يعتمد مظهر هذه الحماية على المستضد نفسه وعلى أعراض المرض الذي يسببه. يسمى هذا المخطط "الأجسام المضادة للمستضد".

لمزيد من الموثوقية التشخيصية ، يتم إجراء إجراء الفحص المناعي الإنزيمي بالكامل فقط في المختبرات والمراكز الطبية. تتفاعل المستضدات والأجسام المضادة المختلفة مع عينة الدم.

يجب أن يكشف هذا التحليل:

ما هي الاستجابة المناعية وكيف يتم تحديد التعرف على المستضد؟

تُظهر الاستجابة المناعية الروابط البيولوجية في جزيئات الخلايا الميكروبية ، التي يتم إجراء التحليل فيها. الاستجابة المناعية على هذا النحو ليست سوى أحد مكونات برنامج ELISA الشامل ، في حين أن المكون الثاني هو تفاعل إنزيمي.

يحدث التعرف على المستضد أثناء اتصال خلية الجهاز المناعي (الخلايا المناعية) مع خلية غريبة. تعمل الخصائص الفردية للمستضدات كوسيلة للتعرف على "الصديق أو العدو" لجهاز المناعة.

عندما يتم التعرف على المستضد على أنه ضار ، سيستجيب الجسم باستجابة مناعية للقضاء على الآفة.

ما هي الأجسام المضادة؟

في الواقع ، فإن الجسم المضاد:

• إنه ببساطة جزيء يقع على سطح الخلية المناعية.
• يستخدم هذا الجزيء للتعرف على الخلايا الغريبة.

يحدث نقل المعلومات المستلمة حول المستضد على المستوى الخلوي. يتم تدمير الاتصال إذا كانت الخلية محصنة ، ولكن إذا لم يكن كذلك ، فإن الجسم يطلق رد فعل دفاعيًا طبيعيًا.

يعرف العلم الحديث 5 فئات من الأجسام المضادة ، وتسمى بخلايا الغلوبولين المناعي أو البروتينات.

بالنسبة للأجسام المضادة ، يتم استخدام الحروف اللاتينية: A و D و E و G و M.

في نتائج التحليل ، تبدو هذه التعيينات كما يلي:

إجراء ELISA

بادئ ذي بدء ، من الضروري إعداد ألواح البوليسترين الخاصة التي تحتوي على 96 بئراً. قبل التحليل ، يتم معالجة جدران كل بئر باستخدام مستضد ممتز.

يقطر مصل الدم في الخلايا المعالجة. تتفاعل الأجسام المضادة والمستضدات المتماثلة مع بعضها البعض لتكوين روابط قوية. يتم غسل الجثث غير المرتبطة. ثم تضاف الأجسام المضادة للغلوبولين المناعي إلى الآبار إلى جانب عناصر إنزيمية خاصة.

تتم تسمية الكواشف لتسهيل تحديد الأجسام المضادة في المصل الذي يتم تحليله. يضاف عنصر كروموجيني يسرع التفاعل ويصبغ الآبار بعد الشطف. كثافة اللون بالمقارنة مع الإنزيم المدروس تظهر النسبة التقريبية للمستضد في عينة الدم.

ثم يستخدم الفني السائل البصري من أجل:

• قياس تركيز الأجسام المضادة في الآبار ؛
• مقارنة النتيجة التي تم الحصول عليها بعينة تحكم ، أي معيار ؛
• حساب تركيز الأجسام المضادة باستخدام مقياس خاص.

لتحليل غزوات الديدان الطفيلية ، يتم استخدام نسخة خاصة من نظام الاختبار ، مع مجموعة من المؤشرات الخاصة بالمعيار والانحرافات عنه.

التحضير للتحليل

يتم أخذ عينات من مصل الدم من أجل التحليل المناعي الإنزيمي فقط في المختبر. يأخذون الدم من الوريد ، ويزيلون العناصر من هناك التي يمكن أن تؤثر على عملية التحليل ودقة نتائجها. قم بالتحليل في الصباح على معدة فارغة.

حل نتائج الفحص المناعي للإنزيم

تشير جودة وكمية الأجسام المضادة إلى وجود عناصر غريبة في جسم المريض ، بما في ذلك مسببات الأمراض. تشير نفس العلامات إلى أن العملية الالتهابية قد بدأت في الجسم.

مثال على فك ترميز نتائج ELISA:

مرحلة المرض	ايغا	IgM	IgG
ابتدائي (أسبوعان من لحظة الإصابة)	+	—	—
ابتدائي (2.5-3 أسابيع من لحظة الإصابة)	+	+	—
ابتدائي (3-4 أسابيع من لحظة الإصابة)	+	+	+
تفاقم المرحلة المزمنة (أسبوعان من بداية التفاقم)	+	—	+
مزمن	+/-	—	+
الماضي (شفاء العدوى)	—	—	+
التعافي	انخفض عيار 2-4 مرات بعد العلاج الناجح	—	انخفض عيار 4-8 مرات بعد 1-1.5 أشهر بعد العلاج الناجح
والنتيجة سلبية	—	—	—

في حد ذاته ، فإن التحليل الكمي الذي أجرته هذه الطريقة لا يجعل حتى الآن من الممكن تشخيص المرض بدقة ، ووصف مسار العلاج وتحديد جرعة الأدوية.

إيجابيات وسلبيات ELISA

جميع طرق الاختبار ، حتى الأكثر تقدمًا ودقة عالية ، للأسف ، بصرف النظر عن مزاياها ، لها عيوبها.

فوائد انزيم المقايسة المناعية:

• تخصص طريقة التشخيص ؛
• زيادة حساسية هذه الطريقة ؛
• تطبيق احدث التقنيات.

حساسية طريقة التشخيص هي احتمال كبير للعثور على الطريقة المطلوبة ، حتى لو كان تركيزها في مادة الاختبار منخفضًا للغاية.

العيوب المحتملة لطريقة التحليل هذه:

1. يفترض تعريف طبيعة المرض ، أي أنه من المستحيل "تخمين" بديهية التشخيص الصحيح في هذه الحالة ؛
2. تكلفة عالية للتحليل.

مقارنة المقايسة المناعية الإثنى عشر والإنزيم المباشر

يستخدم إجراء ELISA مباشرة قدرة الأجسام المضادة على العثور على مولد الضد من خلال تكوين روابط ذات ملصقات. تعتبر طريقة التحليل هذه صناعية ؛ وقت الانتظار للنتيجة لا يزيد عن ساعة.

يظهر ملصق الركيزة الخاصة بعد التخمير. يتوافق مستوى الأجسام المضادة مع نسبة المستضدات في المادة الحيوية المدروسة.

يتم إجراء المقايسة المناعية للإنزيم الإثني عشر (غير المباشر) على مرحلتين:

1. أولاً ، تتم مقارنة الأجسام المضادة المسماة بالمستضدات المطلوبة ؛
2. تطبيق الأجسام المضادة المسماة على الأجسام المضادة غير المسماة وجدت في المرحلة السابقة.

وبالتالي ، يتم تحقيق تحكم مزدوج في المستضدات والأجسام المضادة ، مما يزيد من موثوقية التحليل.

مع وجود ELISA غير المباشر في المختبر ، يتم تثبيت المستضد على سطح البئر ، ويشكل روابط مع الجزء غير المصنف من الأجسام المضادة.

مزايا طريقة الاثني عشر:

• تحكم مزدوج في المادة الحيوية المدروسة ، مما يزيد بشكل كبير من الدقة ؛
• زيادة دقة وخصوصية طريقة التحليل نفسها.

ومع ذلك ، تستغرق هذه الطريقة الكثير من الوقت وتتضمن عددًا من الخطوات الإضافية. ومع ذلك ، فإن دقة الدراسة عالية جدًا لدرجة أنها تبرر هذا العيب. لهذا السبب ، يوصي معظم الأطباء بطريقة تحليل الاثني عشر.

إلى أين أذهب ، وكم الانتظار وكم يجب أن أدفع؟

إذا كان لديك جميع الأدوات والمواد الاستهلاكية اللازمة ، فستتمكن من الحصول على النتيجة في غضون يومين بعد التسليم. إذا كان المختبر لديه خدمة تحليل صريح ، فيمكن معالجة العينة في 3-5 ساعات فقط.

أين يمكنني أخذ ELISA:

• في عيادة الدولة ؛
• في العيادات الخاصة.

تعتمد أسعار المقايسة المناعية الإنزيمية بشكل مباشر على مستوى السعر في عيادة معينة ، في المتوسط \u200b\u200b، يبلغ سعرها 4000 روبل على الأقل.

يمكن أن تكون المعلومات التي تم الحصول عليها من هذه الدراسة مساهمة مفيدة في العلوم الطبية ، ومع ذلك ، يجب على المريض أن يتذكر أنه نظرًا لأن تكلفة الفحص المناعي للإنزيم مرتفع جدًا ، سيكون من الحكمة أن نعهد بهذا الإجراء إلى عيادة موثوقة ومختبرة بالوقت.

لسوء الحظ ، ليست المؤسسات الطبية الحكومية مجهزة دائمًا بأحدث العلوم. قد لا تتوفر الأجهزة اللازمة لأخذ عينات من المواد الحيوية عالية الجودة ومعالجتها في عيادة المنطقة.

عند اختيار عيادة ELISA ، يجب عليك التحقق من أن هذه المؤسسة لديها شهادات دولية معترف بها عالميًا.

لذا ، كيف يكون الفحص المناعي للإنزيم مفيدًا للمريض:

• يسمح لك باكتشاف الغزو الديدان الطفيلية في مرحلة مبكرة ؛
• ونتيجة لذلك ، فإنه يسمح ببدء العلاج في الوقت المناسب
• إن استقرار الأساليب يجعل من الممكن إجراء التحليل بدقة متساوية لدى الأطفال والبالغين.

لا توضح مقايسة الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم عاملاً نوعيًا فحسب ، بل أيضًا عاملًا كميًا ، وهذا لا يشير فقط إلى حقيقة وجود الديدان الطفيلية في جسم المريض ، ولكنه يجعل أيضًا من الممكن تقدير عددها.