Principios de diagnóstico de la infección por VIH. Métodos modernos de diagnóstico de la infección por VIH. Métodos de diagnóstico de laboratorio: qué pruebas detectan el VIH

El diagnóstico de la infección por VIH es esencial para un tratamiento eficaz. Para diagnosticar el SIDA, se realiza un procedimiento estándar de examen del paciente. Consta de 2 etapas:

• poner en pantalla;
• inmunotransferencia.

Para hacer un diagnóstico, también se prescribe PCR, prueba rápida.

ELISA

El diagnóstico inicial de SIDA se basa en el uso de proteínas del VIH de laboratorio que atrapan anticuerpos específicos. Después de su contacto con las enzimas del sistema de prueba, el color del indicador cambia. Luego, el esquema de color modificado se procesa con un equipo especial, que determina el resultado de la prueba.

Un diagnóstico de laboratorio similar de infección por VIH muestra un resultado 21 días después de la infección. Con la ayuda de ELISA es imposible determinar la presencia del virus. Este método de diagnóstico ayuda a detectar la producción de anticuerpos contra el virus. Se puede observar un proceso similar de 2 a 6 semanas después de la infección.

Los especialistas distinguen 4 generaciones de sistemas ELISA con diferentes sensibilidades. Los médicos suelen utilizar pruebas de tercera y cuarta generación. Estos sistemas se basan en proteínas recombinantes o péptidos de origen sintético, que tienen una precisión y especificidad significativas. ELISA se utiliza para detectar, monitorear la propagación del virus, lo que garantiza la seguridad al verificar la sangre donada. La precisión de dichos sistemas oscila entre el 93 y el 99 %. Las pruebas emitidas en Europa occidental son más sensibles. Para realizar el diagnóstico, el asistente de laboratorio toma sangre venosa (5 ml). Durante 8 horas antes del estudio, se recomienda negarse a comer. El estudio se lleva a cabo más a menudo por la mañana.

Descifrado de datos

Tomará 10 días para recibir los resultados de la prueba. Si el resultado es negativo, entonces el paciente no está infectado. En este caso, el tratamiento no está prescrito. Se detecta un resultado falso negativo:

• hasta 3 semanas después de la infección;
• en la última etapa del SIDA con un sistema inmunológico bajo;
• con una preparación de sangre inadecuada.

Si el resultado es positivo, entonces el paciente está infectado. En este caso, se lleva a cabo IB. Un resultado falso positivo indica la presencia de enfermedades concomitantes y una preparación de sangre realizada incorrectamente. Si la prueba está indicada para mujeres embarazadas, entonces, en el material recolectado, el médico puede detectar anticuerpos no específicos, cuya producción no está asociada con el virus. El material recolectado se examina en un laboratorio de referencia o de arbitraje. Si el resultado de la nueva prueba es negativo, entonces el primer resultado es falso. En este caso, IB no se lleva a cabo.

Realización de un inmunoblot

El tratamiento para el SIDA se administra cuando se obtiene un resultado positivo en la inmunotransferencia. Este método de diagnóstico se realiza mediante una tira de nitrocelulosa sobre la que se aplican proteínas virales. Para IB, se usa sangre venosa, que luego se procesa. Las proteínas que se encuentran en el suero se dividen en grupos según su carga y peso molecular. Para llevar a cabo este proceso, se utilizan equipos especiales.

Si hay anticuerpos contra el virus en el material de prueba, aparecen las líneas correspondientes en la tira. Un IB positivo indica que el paciente es VIH positivo. Se detecta un resultado dudoso en las etapas iniciales de infección, con tuberculosis y oncología, en mujeres embarazadas. En tales casos, se recomienda repetir el IB.

Un resultado de IB indeterminado indica la presencia de una o más proteínas del virus en la inmunotransferencia. Un cuadro similar se observa con una infección reciente, cuando hay una pequeña cantidad de anticuerpos contra la infección en la sangre. En este caso, el IB será positivo después de un tiempo. El resultado incierto de este estudio puede deberse a la ausencia de infección por VIH en la hepatitis, enfermedades metabólicas crónicas, durante el embarazo. En este caso, el IB se volverá negativo o los especialistas identificarán la causa del resultado incierto en el paciente.

estudio PCR

El sistema de protección se ve afectado en el contexto de la introducción del virus en el cuerpo humano. El período de incubación suele ser de 3 meses. Por lo tanto, después del contacto sexual con una pareja infectada por el VIH, se recomienda someterse a un diagnóstico de PCR. Le permitirá determinar el ARN del virus. El período durante el cual se recomienda someterse a dicho estudio es de 8 a 24 meses.

Para el diagnóstico final está indicada la donación periódica de sangre para el VIH (1 vez en 3 meses). Debido a su alta sensibilidad, este examen permite detectar el virus 10 días después de la infección. También se puede obtener un resultado de PCR falso positivo si hay otra infección presente en el cuerpo del paciente. La investigación por PCR se considera un procedimiento costoso, ya que requiere un equipo especial.

La PCR se prescribe para detectar el virus en las siguientes personas:

• un recién nacido nacido de una madre infectada por el VIH;
• pacientes con IB cuestionable.

Asimismo, esta técnica está demostrada para el control de la concentración del virus en sangre y el estudio de sangre de donantes.

Métodos rápidos de investigación

Los expertos incluyen pruebas rápidas a los métodos modernos de diagnóstico del SIDA. Tomará de 10 a 15 minutos descifrarlos. Las pruebas inmunocromatográficas basadas en el flujo capilar proporcionan resultados precisos. Dichos sistemas de prueba se presentan en forma de tiras especiales en las que se aplica sangre o saliva. En presencia de un virus, aparecen 2 tiras en la prueba después de 10 minutos:

• control;
• color.

En este caso, el resultado de la prueba es positivo. Un resultado negativo se indica por la aparición de una tira de control. Para confirmar el resultado obtenido, se realiza una IB. Sobre la base de los datos generales, el médico realiza un diagnóstico y prescribe un tratamiento.

Puedes detectar el virus en casa. Para esto, se utilizan kits express especiales. OraSure Technologies1 es un sistema desarrollado en EE.UU. Si se encuentra un resultado positivo después de la prueba, se recomienda que el paciente se someta a un examen completo en el centro médico.

Examen del niño

Los bebés recién nacidos que nacieron de madres infectadas se examinan con urgencia. Con la ayuda de métodos serológicos, es imposible detectar con precisión el virus en niños de 5 a 18 meses. Pero el resultado de una encuesta de este tipo es importante al realizar IB.

Puede detectar la infección en niños usando PCR. El ADN del virus es detectado por un especialista en niños del primer mes de vida. Para determinar la concentración de ARN del patógeno, los expertos determinan el provirus de la inmunodeficiencia. Para la investigación, el médico usa sangre entera o su punto seco. El material se coloca en un tubo de ensayo con conservante EDTA (proporción 1:20). La muestra debe almacenarse a una temperatura que no supere los 8°C (durante 2 días). No se permite la congelación de materiales.

Para obtener una muestra de sangre seca, todo el líquido se aplica a un papel especial. La muestra se puede almacenar por debajo de 8°C. Las tarjetas se utilizan durante 8 meses. Un niño recién nacido debe ser examinado, tomando material para investigación, dentro de los siguientes períodos:

• 48 horas después del nacimiento;
• a la edad de 2 meses después del nacimiento;
• 3-6 meses después del nacimiento.

Si el médico detectó el gen del provirus del VIH unas horas después del nacimiento del bebé, entonces el bebé se infectó intrauterinamente. También puede contraer el virus durante el parto o durante la lactancia. Los resultados, que indican la presencia de ADN del virus en 2 muestras, indican el desarrollo de SIDA en el niño. No se requiere observación en el dispensario si los resultados de la PCR son negativos 4 meses después del nacimiento del bebé.

Si el resultado de la prueba es negativo, pero los síntomas del SIDA están presentes, se recomienda consultar a un médico. Tal clínica puede ser desencadenada por otras enfermedades. La prueba se considera el único y 100% método para diagnosticar un virus. Incluso los profesionales calificados y experimentados no pueden identificar el virus por los síntomas que presenta.

Si después de un tiempo los resultados del paciente son negativos, entonces no hay VIH en el cuerpo.

No tiene en cuenta los síntomas. Pero tal cuadro clínico puede estar asociado con la fobia al SIDA. En este caso, se requiere la ayuda de un psicólogo. Si es necesario, al niño o adulto se le prescribe el tratamiento adecuado.

Y

Si la enfermedad se detecta en una etapa temprana y se trata de inmediato, es posible detener la transmisión del virus de los portadores a las personas sanas. Asimismo, la detección precoz es relevante para la prestación de asistencia social, psicológica y la posibilidad de dispensar tratamiento. Hasta la fecha, es posible una cura para esta enfermedad, pero a condición de que el diagnóstico de infección por VIH haya revelado una etapa temprana de la infección. Esto prolonga significativamente la vida de los pacientes, lo cual es importante para ellos.

Hay una serie de síntomas que deberían alertarlo y hacer que se haga un examen:

• Fatiga frecuente e inexplicable;
• Sudoración por la noche;
• Dolor frecuente en el área de la cabeza;
• Estado febril, hasta cerca de diez días, con temperatura de hasta 38,5 C;
• manifestaciones diarreicas;
• Pérdida de peso irrazonable en un corto período de tiempo.

Si durante el período de diagnóstico habrá manifestaciones de erupción cutánea, furunculosis y otras manifestaciones, esto facilitará la identificación de la enfermedad. La linfadenopatía o los ganglios linfáticos agrandados pueden indicar una posible infección, con mayor frecuencia estos son los ganglios del cuello, la mandíbula, la subclavia, la axila y el codo. Su tamaño es de unos 2,5 centímetros de diámetro. A la palpación no se siente dolor, son de contenido elástico denso, rara vez aparecen como fusionándose en un conglomerado. Con el VIH, los ganglios aumentan con mayor frecuencia en grupos, durante un período de más de tres meses.

A menudo, en las primeras fases de la enfermedad, se presentan síntomas neuropsiquiátricos:

• Comportamiento y sentimiento de ansiedad;
• estado depresivo;
• Marcha incierta, tambaleante;
• Deterioro de la claridad de la visión, su disminución;
• convulsiones;
• deterioro de la memoria;
• Acciones inadecuadas y acciones que son inusuales para una persona;
• Debilitamiento de los sentimientos;

Signos de la fase inicial del VIH, a los que debes prestar atención:

• Pérdida de peso hasta un 10%;
• Detección de cambios en la membrana mucosa (dermatitis, furúnculos, psoriasis, hongos en las uñas, úlceras y gingivitis);
• Herpes en personas menores de 50 años;
• Infecciones recurrentes del tracto respiratorio.

La segunda fase de la enfermedad se despliega por una lista de superinfecciones en inmunodeficiencia:

• Pérdida de peso en más del 10%;
• Diarrea que dura más de un mes;
• Candidiasis que afecta la cavidad oral;
• lesiones tuberculosas de órganos, leucoplasia;
• Neuropatía, sarcoma de Kaposi, procesos herpéticos;
• Infecciones bacterianas, manifestadas en forma severa;

La última fase del diagnóstico de la enfermedad puede incluir:

• neumonía;
• toxoplasmosis;
• infección por CMV;
• criptococosis;
• Manifestaciones de herpes;
• Leucoencefalopatía con focos múltiples;
• Histoplasmosis, esofagitis;
• infección por MAC;
• Tuberculosis y muchas otras enfermedades en un grado más complicado.

Métodos de laboratorio- esta es la identificación de anomalías asociadas al SIDA en un paciente infectado con una inmunodeficiencia secundaria. La enfermedad por VIH contiene 23 tipos nosológicos; es apropiado un enfoque sindrómico para determinar un diagnóstico más preciso.

La detección del VIH se basa en la detección de anticuerpos y antígenos virales del VIH, y en algunos casos se detecta el ADN proviral del VIH y el ARN viral del VIH (en bebés menores de 1 año). la base actúa en tres direcciones: la definición del VIH y sus componentes, la detección de anti-VIH, el establecimiento de cambios en la funcionalidad del sistema inmunológico. Componente del VIH- estos son los genes estructurales gag, pol y también env, codifican la traducción de proteínas en función de la estructura directa del virus.

Genes reguladores es la unión de tat, rev, vif, nyf, vpx y vpr. El gen gag codifica proteínas centrales con productos de traducción iniciales, pp53 es una proteína precursora que tiende a escindirse en p15, p17 y p24 o p39, seguido de escisión en p17 y p24. El paciente desarrolla anticuerpos contra este antígeno, acre 24 puede detectarse en las fases iniciales de la infección, ya que p24 es más inmunogénico que p17.

1. Métodos serológicos la detección de anticuerpos (AT) contra el VIH es el estándar para diagnosticar la infección por VIH (los sistemas de prueba ELISA basados ​​en péptidos sintéticos tienen una sensibilidad y especificidad de casi el 100 %). ELISA le permite detectar HIV AG, que pueden ser indicadores de infección temprana o viceversa tardía: desarrollo avanzado de infección por HIV (p24 AG)

2. Pruebas confirmatorias— inmunotransferencia (IB), inmunofluorescencia indirecta (NIF) y radioinmunoprecipitación (RIP).

a) La OMS recomienda que los sueros se consideren positivos si hay anticuerpos en IB contra dos proteínas de la envoltura y contra una de las proteínas internas del VIH. Los pacientes que son positivos para ELISA pero tienen resultados de IB indeterminados deben ser examinados clínicamente y evaluados por otros medios, examen médico, inmunológicamente y después de 3 a 6 meses se debe analizar su suero sanguíneo para detectar anticuerpos contra el VIH.

b) método de inmunofluorescencia indirecta (NIF): se utiliza como prueba de confirmación en muchos laboratorios o como prueba de detección.

c) la radioinmunoprecipitación es un método altamente sensible y específico basado en el uso de aminoácidos marcados con isótopos radiactivos. El método es muy sensible para la detección de anticuerpos contra proteínas de superficie y, por tanto, muy específico, ya que estos componentes del virus están presentes en casi todas las personas infectadas por el VIH después de la seroconversión.

3. Métodos de biología molecular: método de hibridación molecular de ácidos nucleicos, PCR

1) como método de confirmación alternativo y adicional para detectar la presencia de un virus en el cuerpo en relación con los métodos de diagnóstico serológico de laboratorio;

2) como primer método de análisis específico en el diagnóstico de infección temprana por VIH, cuando aún no se dispone de anticuerpos antivirales específicos;

3) para el diagnóstico de infección por VIH en recién nacidos de madres infectadas por VIH;

4) determinar la carga viral y prescribir terapia antirretroviral específica y monitorear su implementación;

5) como método de aclaración en caso de resultados serológicos poco claros y en caso de discrepancia entre los análisis serológicos y culturales;

6) en el estudio de parejas sexuales de personas infectadas por el VIH;

7) como método de diagnóstico diferencial de VIH-1 y VIH-2;

4. Método virológico.

1. Principios de la terapia antirretroviral: el tratamiento debe comenzar antes del desarrollo de una inmunodeficiencia significativa; la terapia inicial debe incluir combinaciones de al menos tres medicamentos; la modificación de la terapia debe consistir en el reemplazo o la conexión de al menos dos nuevos medicamentos; es fundamental medir el nivel de células CD4+ y la carga viral; una reducción de la carga viral por debajo del límite de detección de ensayos sensibles refleja el efecto óptimo del tratamiento.

2. Hay tres grupos de medicamentos antirretrovirales modernos:

a) inhibidores de la transcriptasa inversa nucleósidos (INTI): zidovudina (azidotimidina, retrovir); didanosina (ddI, videx); zalcitabina (ddC, chivid); estavudina (Zerit, d4T); lamivudina (3TC, epivir); abacavir; adefovir; combivir (zidovudina + abacavir); trizivir (zidovudina + lamivudina + abacavir); adefovir (inhibidores de la transcriptasa inversa de nucleótidos).

b) inhibidores de la transcriptasa inversa no nucleósidos (NNRTI): delaverdin (rescriptor); nevirapina (viramune); ifavirenz.

c) inhibidores de la proteasa (PI): saquinavir; ritonavir (norvir); indinavir (crixivan); nelfinavir (viracept); amprenavir (agenasa); lopinavir (aluviran); kaletra (lopinavir + ritonavir).

3. La monoterapia con cualquier fármaco no puede proporcionar una supresión suficientemente pronunciada y prolongada de la replicación del VIH. Además, con la monoterapia aumenta el riesgo de aparición de cepas resistentes y el desarrollo de resistencias cruzadas a fármacos del mismo grupo. La única excepción es el uso de zidovudina como monoterapia para reducir el riesgo de transmisión perinatal del VIH.

4. El criterio más importante para la efectividad de la terapia es la dinámica de la carga viral, que debe determinarse: sin tratamiento, cada 6 a 12 meses, durante el tratamiento, cada 3 a 6 meses, y también 4 a 8 semanas después del inicio de la terapia antiviral.

Además de la terapia antirretroviral, es necesaria la terapia para enfermedades secundarias que se han unido.

34.3 SIDA (variantes clínicas, enfermedades oportunistas).

enfermedades oportunistas- enfermedades graves y progresivas que se desarrollan en el contexto de una creciente inmunosupresión y no ocurren en una persona con un sistema inmunológico que funciona normalmente (enfermedades indicadoras de SIDA).

a) el primer grupo- estas son enfermedades que son inherentes solo a la inmunodeficiencia severa (nivel de CD4 +< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

b) segundo grupo- enfermedades que pueden desarrollarse en el contexto de una inmunodeficiencia grave y, en algunos casos, sin ella: 1. Infecciones bacterianas, combinadas o recurrentes en niños menores de 13 años (más de dos casos en 2 años de observación): huesos o articulaciones , abscesos causados ​​por Haemophilus influenzae, estreptococos. 2. Coccidioidomicosis diseminada (localización extrapulmonar). 3. Encefalopatía por VIH 4. Histoplasmosis diseminada con localización extrapulmonar. 5. Isosporiasis con diarrea persistente por más de 1 mes. 6. Sarcoma de Kaposi en personas de cualquier edad. 7. Linfomas de células B (a excepción de la enfermedad de Hodgkin) o linfomas de inmunofenotipo desconocido. 8. Tuberculosis extrapulmonar. 9. Septicemia recurrente por Salmonella. 10. Distrofia por VIH.

Las más frecuentes son neumonía por pneumocystis, meningoencefalitis criptocócica, infección generalizada por citomegalovirus (encefalitis, retinitis, esofagitis, hepatitis, colitis), sepsis de etiología mixta, forma generalizada de sarcoma de Kaposi, tuberculosis pulmonar.

Todas estas enfermedades ocurren con daño a uno o más órganos y sistemas: el cerebro, los pulmones, el hígado, el tracto gastrointestinal y son de naturaleza progresiva severa. Las enfermedades indicadoras del SIDA aparecen en varias combinaciones, e incluso la terapia adecuada no produce el efecto esperado.

Variantes clínicas del SIDA: infeccioso-, neuro-, onco-SIDA, dependiendo de la prevalencia de las diferentes clínicas.

VIH: diagnóstico y tratamiento, prevención

El síndrome de inmunodeficiencia adquirida ha sido uno de los problemas clave de la sociedad moderna durante más de cuarenta años. Por lo tanto, el diagnóstico del VIH ahora está atrayendo mucha atención y recursos. Después de todo, cuanto antes se detecte un virus que destruye el sistema inmunológico del cuerpo, mayores serán las posibilidades de evitar un desenlace fatal.

Bajo la abreviatura VIH se encuentra la definición del virus de la inmunodeficiencia humana, uno de los más peligrosos entre los existentes. Bajo su influencia, hay una profunda inhibición de todas las propiedades protectoras del cuerpo. Esto, a su vez, conduce a la aparición de varios tumores malignos e infecciones secundarias.

La infección por el VIH puede progresar de diferentes maneras. A veces, la enfermedad destruye a una persona en 3-4 años, en algunos casos puede durar más de 20 años. Vale la pena saber que este virus es inestable y muere rápidamente si está fuera del cuerpo del huésped.

El VIH puede transmitirse artificialmente, por contacto sanguíneo y mediante el mecanismo de biocontacto.

Si hubo un solo contacto con un portador del virus, entonces el riesgo de infección será bajo, pero con una interacción constante aumenta significativamente. El diagnóstico de la infección por el VIH es algo que no se puede descuidar, especialmente cuando se cambia de pareja sexual

Preste atención a la vía parenteral de infección. Puede ocurrir durante transfusiones de sangre contaminada, inyecciones con agujas contaminadas con sangre de personas infectadas por el VIH, así como durante manipulaciones médicas no estériles (tatuajes, perforaciones, procedimientos dentales con instrumentos que no han sido procesados ​​adecuadamente). .

Al mismo tiempo, vale la pena saber que no hay necesidad de temer la transmisión del virus por contacto en el hogar. Pero el hecho permanece: una persona tiene una alta susceptibilidad a la infección por VIH. Y si un sujeto mayor de 35 años se infecta, entonces el desarrollo del SIDA ocurre significativamente más rápido que en aquellos que aún no han superado el hito de los treinta años.

Por supuesto, la mejor manera de identificar un problema, o la falta de él, es diagnosticar la infección por VIH. Pero, ¿qué razones puede tener una persona que lleva un estilo de vida saludable para ir y comprobar si tiene una infección? Naturalmente, tal iniciativa debería estar justificada por algo. Por ello, es importante saber qué síntomas pueden indicar procesos destructivos que deprimen el sistema inmunológico.

Es poco probable que se detecte la etapa de incubación del virus sin un análisis de sangre, ya que el cuerpo en este momento todavía no reacciona de ninguna manera a los elementos hostiles.

La segunda etapa (manifestaciones primarias) sin la ayuda de un médico también puede pasar desapercibida. Pero a veces hay una replicación activa del virus, y el cuerpo comienza a reaccionar ante esto: se observan fiebre, varias erupciones polimórficas, síndrome de gravamen y faringitis. En la segunda etapa, es posible adjuntar enfermedades secundarias como herpes, infecciones por hongos, neumonía, etc.

La tercera etapa latente se caracteriza por un aumento gradual de la inmunodeficiencia. Debido al hecho de que las células del sistema de defensa mueren, la dinámica de su producción aumenta y esto permite compensar pérdidas tangibles. En esta etapa, varios ganglios linfáticos pertenecientes a diferentes sistemas pueden inflamarse. Pero no se observan fuertes sensaciones dolorosas. En promedio, el período de latencia dura de 6 a 7 años, pero puede retrasarse hasta 20.

Durante la etapa de enfermedades secundarias, que es la cuarta, se presentan infecciones concomitantes de origen fúngico, bacteriano protozoario, viral, así como tumores malignos. Todo esto ocurre en el contexto de una inmunodeficiencia severa.

Métodos para diagnosticar la infección por VIH

Hablando de la profunda inhibición de los mecanismos de defensa del cuerpo debido a la exposición al virus, vale la pena señalar que el futuro del paciente en este caso depende directamente del diagnóstico oportuno y preciso.

Para hacer esto, en la medicina moderna, se utilizan varios sistemas de prueba, que se basan en inmunoquimioluminiscencia, así como en inmunoensayo enzimático. Estas técnicas permiten determinar la presencia de anticuerpos pertenecientes a diferentes clases. Este resultado ayuda a aumentar significativamente el contenido de información de los métodos de especificidad y sensibilidad analíticas y clínicas cuando se trabaja con enfermedades infecciosas.

También es interesante que fue el método de reacción en cadena de la polimerasa lo que hizo posible llevar el diagnóstico del VIH a un nivel fundamentalmente nuevo. Una variedad de materiales biológicos son adecuados como material para la investigación: plasma sanguíneo, biopsia, raspado, suero, líquido cefalorraquídeo o pleural.

Si hablamos de métodos de investigación de laboratorio, estos se centran principalmente en identificar varias enfermedades clave. Estamos hablando de la infección por VIH, la tuberculosis, todas las infecciones de transmisión sexual y la hepatitis viral.

También se utilizan pruebas genéticas moleculares y serológicas para identificar el virus de la inmunodeficiencia. En el primer caso se determina el ARN del virus y el ADN del provirus, en el segundo caso se analizan los anticuerpos contra el VIH y se detecta el antígeno P24.

En las clínicas que utilizan, por así decirlo, métodos de diagnóstico clásicos, se utiliza predominantemente un protocolo estándar para pruebas serológicas.

Diagnóstico temprano del VIH

Este tipo de determinación del hecho de la infección es necesario para identificar la amenaza de daño al sistema inmunológico lo antes posible. Esto, en primer lugar, evita la propagación de la infección y, en segundo lugar, influir en la enfermedad en la etapa inicial.

Si consideramos el ejemplo de Rusia, la clasificación clínica de la infección por VIH se introdujo en el ejército y la marina de la Federación Rusa. Esto ha dado resultados positivos: el proceso de diagnóstico clínico temprano se ha vuelto mucho más fácil.

El dolor de cabeza, los sudores nocturnos y la fatiga inmotivada pueden identificarse como síntomas comunes que indican un posible daño al sistema inmunológico. También es posible el desarrollo de fiebre, acompañada de signos de amigdalitis. Esto significa que la temperatura sube a 38 grados o más, y al mismo tiempo aumentan las amígdalas palatinas y también aparece dolor al tragar. Todo esto se complementa con una rápida pérdida de peso. Sin embargo, estos síntomas suelen ser complejos.

En algunos casos, la infección por VIH en las primeras etapas puede manifestarse en forma de diversos cambios en la condición de la piel. Hablamos de manchas, roséola, pústulas, forunculosis, etc. El diagnóstico precoz del VIH también incluye trabajar con síntomas como el agrandamiento generalizado o limitado de los ganglios linfáticos periféricos.

Si hay un crecimiento simultáneo de varios ganglios linfáticos, con una duración de tres meses o más, y en diferentes grupos, con la excepción de la región inguinal, entonces hay muchas razones para sospechar un virus del sistema inmunológico humano.

Hablando sobre el diagnóstico en un período posterior, debe prestar atención a la manifestación de inmunodeficiencia secundaria, que a menudo ocurre bajo la apariencia de varios síntomas clínicos. Estas son las siguientes manifestaciones:

• linfadenopatía periférica generalizada no motivada;
• artralgia de etiología desconocida, que tiene un curso ondulante;
• SARS (ARVI), lesiones inflamatorias de los pulmones y las vías respiratorias, que se hacen sentir con bastante frecuencia;
• fiebre de origen desconocido y estado subfebril prolongado;
• embriaguez general, que se manifiesta a través de debilidad inmotivada, fatiga, letargo, etc.

El diagnóstico de VIH en etapa tardía incluye la detección de una enfermedad como el sarcoma de Kaposi, que se manifiesta por la aparición de múltiples neoplasias, a menudo en la parte superior del cuerpo en personas jóvenes, seguidas de un desarrollo dinámico y metástasis.

reacción en cadena de la polimerasa

Teniendo en cuenta los diversos métodos para diagnosticar la infección por el VIH, se debe prestar especial atención a esto. Cabe señalar de inmediato que este análisis de sangre puede estar dirigido a características cuantitativas y cualitativas.

Las siguientes tareas se pueden definir como el objetivo de este método de detección de virus:

• diagnóstico precoz de la infección por el VIH;
• aclaración en presencia de resultados cuestionables como resultado de estudios de inmunotransferencia;
• identificación de una etapa específica de la enfermedad;
• monitorear la efectividad del tratamiento destinado a suprimir el virus.

Si hablamos de infección primaria, cabe señalar que esta técnica permite determinar el ARN del VIH en la sangre del paciente transcurridos 14 días desde el momento de la infección. Este es un muy buen resultado. En este caso, el resultado del estudio en sí tendrá una expresión cualitativa: ya sea positivo (el virus está presente) o negativo.

Cuantificación por PCR

Este tipo de reacción en cadena de la polimerasa se usa para determinar la tasa probable de desarrollo del SIDA y predecir la expectativa de vida del paciente.

La cuantificación de las células de ARN del VIH en la sangre permite comprender cuándo la enfermedad entra en la etapa clínica.

Vale la pena prestar atención al hecho de que los métodos de diagnóstico de laboratorio del VIH dan un resultado más preciso si el biomaterial requerido para el análisis se determina correctamente y su muestreo se lleva a cabo correctamente.

Para llevar a cabo un seguimiento cualitativo de los infectados, es necesario (si es posible) utilizar un enfoque integrado para el estudio del estado inmunológico del paciente. Estamos hablando de la determinación cuantitativa y funcional de todas las partes del sistema de defensa: inmunidad celular, humoral y resistencia inespecífica como tal.

Diagnóstico de laboratorio

Cada vez más, en las condiciones de laboratorio modernas, se utiliza un método de múltiples etapas para evaluar el estado del sistema inmunológico. Esta técnica a menudo implica la determinación de una subpoblación de inmunoglobulinas, linfocitos en la sangre. Esto significa que se tiene en cuenta la proporción de células CD4/CD8. Si el resultado muestra menos de 1,0, entonces hay motivos para sospechar inmunodeficiencia.

El diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH debe incluir esta prueba sin falta, ya que este virus se caracteriza por un daño selectivo a los linfocitos CD4, lo que conduce a una violación notable de la proporción mencionada anteriormente (menos de 1.0).

Para evaluar el estado inmunológico, los médicos pueden realizar una prueba para detectar la presencia de defectos "magros" o generales en el sistema de inmunidad humoral y celular. Estamos hablando de hipogammaglobulinemia o hipergammaglobulinemia en etapa terminal, así como de una disminución en la producción de citocinas, un aumento en la concentración de inmunocomplejos circulantes, un debilitamiento de la respuesta de los linfocitos a los mitógenos y antígenos.

Vale la pena prestar atención al hecho de que el diagnóstico de laboratorio del VIH tiene dos etapas clave:

1. Laboratorio de tamizaje. Si se obtuvo un resultado positivo en el ELISA (inmunoensayo enzimático), entonces se repite dos veces más en el mismo sistema y sin cambiar el suero. En el caso de que dos de los tres exámenes conduzcan a la detección de la influencia del virus, el suero se envía para su posterior análisis al laboratorio de referencia.
2. La segunda etapa, que incluye los métodos de diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH, es la determinación del estado del sistema inmunológico. Se lleva a cabo en el laboratorio de referencia mencionado anteriormente. Aquí, el suero positivo se examina nuevamente en ELISA, pero utilizando un sistema de prueba diferente, que difiere de la composición anterior de antígenos, anticuerpos o el formato de las pruebas mismas. Al determinar un resultado negativo, se lleva a cabo un segundo estudio en el tercer sistema de prueba. Si al final no se detectó el impacto del virus, se registra la ausencia de infección por VIH. Pero con un resultado positivo, el suero se examina en una transferencia lineal o inmune.

En última instancia, dicho algoritmo conduce a resultados positivos, neutrales o negativos.

Todo ciudadano debe saber que el diagnóstico del VIH está disponible para él. El SIDA se puede identificar en entornos de salud privados, municipales o públicos.

Naturalmente, la identificación del virus sería de poca utilidad en ausencia de varios métodos para influir en la infección. Y aunque en este momento todavía no existe una vacuna que pueda neutralizar completamente el virus, el diagnóstico competente, el tratamiento del VIH y la prevención posterior pueden mejorar significativamente la condición del paciente, alargando así su vida. Esta tesis confirma el hecho de que la esperanza de vida promedio de los hombres que iniciaron un tratamiento oportuno contra el VIH es de 38 años. Las mujeres que inician la lucha contra el virus de la inmunodeficiencia viven en promedio 41 años.

Una vez realizado el diagnóstico, el tratamiento del VIH se reduce al uso de varias técnicas. La terapia antirretroviral activa, también conocida como HAART, puede identificarse como una de las más comunes. Si este tipo de tratamiento se aplica a tiempo y correctamente, entonces es posible ralentizar significativamente el desarrollo del SIDA o detenerlo por completo.

La esencia de HAART es que varias preparaciones farmacéuticas se usan simultáneamente, cuyo propósito es influir en varios mecanismos del desarrollo del virus de la inmunodeficiencia.

Después de que varios métodos de diagnóstico del VIH hayan determinado el hecho de la infección, se pueden usar medicamentos que tienen los siguientes tipos de efectos:

inmunológico. El sistema inmunológico se estabiliza, el nivel de linfocitos T aumenta y se restaura la protección contra diversas infecciones.

Clínico. Se previene el desarrollo del SIDA y cualquiera de sus manifestaciones, se prolonga la vida de los pacientes con la preservación de todas las funciones corporales.

virológico. Hay un bloqueo de la reproducción del virus, como resultado de lo cual la carga viral disminuye y posteriormente se fija en un nivel bajo.

Es difícil sobrestimar la importancia de tales medidas para influir en la enfermedad como el diagnóstico, tratamiento y prevención de la infección por VIH. Por lo tanto, lo mejor que se puede hacer después de un resultado positivo del estudio para la infección es comenzar de inmediato a combatir la enfermedad. Como otro método que ayudará a hacer esto, se puede identificar el tratamiento virológico.

En este caso, estamos hablando del uso de medicamentos que no permiten que el virus se adhiera al linfocito T y entre al cuerpo. Estos medicamentos se llaman inhibidores de la penetración. Un ejemplo específico es Cellzentry.

Los inhibidores de la proteasa viral se pueden usar para suprimir el VIH. El propósito de este grupo de medicamentos es prevenir la infección de nuevos linfocitos. Estos son medicamentos como Viracept, Reyataz, Kaletra, etc.

El tercer grupo de fármacos tópicos son los inhibidores de la transcriptasa inversa. Son necesarios para bloquear la enzima que permite que el ARN del virus se multiplique en el núcleo del linfocito. Dichos métodos pueden afectar significativamente un problema como la infección por VIH. El diagnóstico, el tratamiento y la prevención del SIDA es asunto de médicos calificados, por lo que el algoritmo para el uso de medicamentos debe ser elaborado por ellos.

Si es necesario, también se pueden utilizar los efectos inmunológicos y clínicos.

La Organización Mundial de la Salud sugiere los siguientes métodos para combatir la infección por el VIH:

Prevención de la transmisión sexual. Estos son sexo protegido, distribución de condones, tratamiento de ETS y programas educativos.

Para mujeres embarazadas que han sido diagnosticadas con VIH, diagnóstico, profilaxis con productos químicos apropiados y asesoramiento y tratamiento profesional.

Organización de la prevención a través de hemoderivados. En este caso, estamos hablando de procesamiento antiviral y verificación de donantes.

Asistencia social y médica a los pacientes y sus familias.

Para que los diagnósticos de VIH no revelen la presencia del virus, debe seguir reglas de seguridad simples:

si la sangre de una persona infectada entra en contacto con la piel, debe lavarse inmediatamente con agua y jabón y luego tratarse con alcohol;

si un objeto con elementos del virus recibió daño, entonces la herida debe comprimirse, exprimirse la sangre, este lugar debe tratarse con peróxido de hidrógeno y los bordes deben quemarse con yodo;

nunca use jeringas cuya esterilidad haya sido violada;

use un condón durante las relaciones sexuales, pero es mejor revisar inicialmente a la pareja para detectar infecciones.

Gracias a que el diagnóstico del VIH no se detiene, miles de personas tienen la oportunidad de iniciar el tratamiento a tiempo y aumentar significativamente la esperanza de vida. Lo principal es no ignorar los síntomas evidentes y no tener miedo de ir al médico.

Diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH

Los siguientes están sujetos a pruebas de infección por VIH:

2. Personas con sospecha o diagnóstico confirmado: infección bacteriana en menores de 13 años, múltiple y recurrente; candidiasis del esófago, tráquea, bronquios o pulmones; cáncer invasivo de cuello uterino; coccidioidomicosis diseminada o extrapulmonar; criptococosis extrapulmonar; criptosporidiosis con diarrea durante 1 mes o más; lesiones por citomegalovirus de otros órganos, excepto hígado, bazo, ganglios linfáticos en pacientes mayores de 1 mes; retinitis por citomegalovirus con pérdida de la visión; infección herpética que causa úlceras multifocales que no cicatrizan en 1 mes, o bronquitis, neumonía, esofagitis; histoplasmosis diseminada o extrapulmonar; isosporiasis con diarrea durante más de 1 mes; tuberculosis generalizada o extrapulmonar; tuberculosis pulmonar en adultos o adolescentes mayores de 13 años; tuberculosis extrapulmonar; otra enfermedad causada por micobacterias, excepto M. tuberculosis diseminada o extrapulmonar; neumonía causada por pneumocystis; leucoencefalopatía multifocal progresiva; salmonella (excepto Salmonella typhi) septicemia, recurrente; toxoilasa cerebral en niños mayores de 1 mes; sarcomas de Kaposi; neumonía intersticial linfoide en niños menores de 13 años; linfoma de Burkitt; linfoma inmunoblástico; linfoma cerebral primario; síndrome de emaciación, hepatitis B, portador de HBsAg; mononucleosis infecciosa; herpes zoster recurrente en personas mayores de 60 años; enfermedades de transmisión sexual.

En un laboratorio altamente especializado se llevan a cabo:

a) determinación de anticuerpos, antígenos y complejos inmunes circulantes en la sangre; cultivo del virus, detección de su material genómico y enzimas;

b) valoración de las funciones del enlace celular del sistema inmunitario. El papel principal pertenece a los métodos de diagnóstico serológico destinados a la determinación de anticuerpos, así como antígenos patógenos en la sangre y otros fluidos biológicos del cuerpo.

La prueba de anticuerpos contra el VIH se lleva a cabo para:

a) seguridad de las transfusiones y trasplantes de sangre;

b) vigilancia, pruebas para monitorear la prevalencia de la infección por el VIH y estudiar la dinámica de su prevalencia en una población particular;

c) diagnóstico de infección por VIH, es decir, análisis voluntario de suero sanguíneo de personas prácticamente sanas o pacientes con diversos signos y síntomas clínicos similares a la infección por VIH o SIDA.

El sistema para el diagnóstico de laboratorio de la infección por el VIH se basa en un principio de tres etapas. La primera etapa es la detección, diseñada para realizar análisis de sangre primarios para detectar la presencia de anticuerpos contra las proteínas del VIH. La segunda etapa es referencial: permite utilizar técnicas metodológicas especiales para aclarar (confirmar) el resultado positivo primario obtenido en la etapa de detección. La tercera etapa, experta, está destinada a la verificación final de la presencia y especificidad de los marcadores de infección por VIH identificados en las etapas anteriores de diagnóstico de laboratorio. La necesidad de varias etapas de diagnóstico de laboratorio se debe principalmente a consideraciones económicas.

En la práctica, se utilizan varias pruebas para identificar a las personas infectadas por el VIH con suficiente grado de certeza:

La prueba ELISA (ELISA) (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) para detectar el primer nivel se caracteriza por una alta sensibilidad, aunque menos especificidad que las siguientes;

Immune blot (Western-blot), una prueba muy específica y más utilizada para diferenciar entre el VIH-1 y el VIH-2;

Prueba de antigenemia p25, eficaz en las etapas iniciales de la infección;

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

En los casos de cribado masivo de muestras de sangre, se recomienda ensayar mezclas de sueros de un grupo de sujetos, recopilados de forma que la dilución final de cada muestra no supere 1:100. Si la mezcla actual de suero es positiva, se analiza cada suero de la mezcla positiva. Este método no conduce a la pérdida de sensibilidad tanto en ELISA como en el inmunoblot, pero reduce los costos de mano de obra y el costo del examen inicial en un 60-80%.

En el serodiagnóstico primario de la infección por VIH, los anticuerpos totales se determinan mediante pruebas de detección selectiva: ELISA y reacciones de aglutinación. En la segunda etapa (arbitraje), se usa una prueba más compleja: una inmunotransferencia, que permite no solo confirmar o rechazar la conclusión inicial, sino también hacerlo a nivel de determinación de anticuerpos contra proteínas individuales del virus.

Ensayo inmunoabsorbente ligado(ELISA) es el método principal y más utilizado para la determinación de anticuerpos contra el VIH. Pero las desventajas de usar ELISA en el serodiagnóstico de la infección por VIH incluyen resultados falsos positivos frecuentes. En este sentido, el resultado del ELISA no es una base para concluir que el sujeto es seropositivo al VIH. Esto se debe a una purificación insuficiente del inmunoabsorbente a partir de proteínas de lastre; unión espontánea de anticuerpos séricos al plástico, si sus áreas no ocupadas por el inmunoabsorbente están insuficientemente bloqueadas o no bloqueadas por una proteína neutra completamente especial; interacción cruzada con proteínas del VIH del inmunoabsorbente de varias proteínas presentes en la sangre de individuos con ciertos procesos patológicos, más a menudo autoinmunes, como esclerosis múltiple, LES, tuberculosis; con donación frecuente, enfermedades infecciosas y oncológicas, quemaduras, embarazo, transfusiones de sangre repetidas, trasplante de órganos, tejidos, así como personas en hemodiálisis; con la presencia de factor reumatoideo en la sangre, que a menudo provoca reacciones positivas falsas del VIH; la presencia en la sangre de las personas examinadas de anticuerpos contra las proteínas gag del VIH y, sobre todo, contra la proteína p24 (obviamente, se forman anticuerpos contra retrovirus exógenos o endógenos que aún no han sido identificados). Dado que anti-p24 se sintetiza sin falta en las primeras etapas de la seroconversión del VIH, se lleva a cabo un seguimiento inmunológico adicional de las personas con anticuerpos contra las proteínas gag del VIH, así como su eliminación de la donación.

La sensibilidad y especificidad del inmunoensayo enzimático está en constante aumento. Como resultado, el ELISA de cuarta generación no es inferior en sus capacidades de diagnóstico a la inmunotransferencia y puede usarse no solo en la detección, sino también en la etapa de confirmación del diagnóstico de infección por VIH [Smolskaya T. T., 1997].

inmunotransferencia es el último método de diagnóstico serológico, que permite llegar a una conclusión final sobre la positividad o negatividad del VIH del sujeto.

Existe una clara correlación entre los resultados del estudio de sueros en inmunotransferencia y ELISA: dos veces positivo en ELISA con diferentes sistemas de prueba, el suero en el 97-98% de los casos luego resulta ser VIH positivo en inmunotransferencia. Si los sueros fueron positivos en ELISA solo en uno de los dos sistemas de prueba utilizados, son positivos en el inmunoblot solo en el 4% de los casos. En el 5% de los casos, al realizar estudios confirmatorios en personas con datos positivos, el ELISA immunoblot puede dar resultados “indeterminados”, y entre ellos, en cerca del 20% de los casos, anticuerpos contra proteínas gag del VIH-1 (p55, p25, p18 ). La presencia de anticuerpos solo contra las proteínas gag del VIH-1 es una razón para un examen adicional del suero sanguíneo para detectar la infección por el VIH-2.

La evaluación de los resultados de la inmunotransferencia se lleva a cabo estrictamente de acuerdo con las instrucciones adjuntas al sistema de prueba. En ausencia de orientación sobre la interpretación de los resultados, se deben utilizar los criterios de la OMS.

Tras la recepción de resultados positivos de la prueba en la etapa de referencia del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH y un resultado negativo del estudio por el método de inmunotransferencia, se realiza un diagnóstico experto obligatorio repetido 6 meses después del primer examen.

Si los resultados de la inmunotransferencia 12 meses después del estudio de la primera muestra siguen siendo negativos o indeterminados, en ausencia de factores de riesgo, síntomas clínicos u otros factores asociados con la infección por VIH, el sujeto se retira de la observación del dispensario.

Entre los métodos serológicos, en caso de resultados indeterminados, se utiliza el inmunoblot como diagnóstico experto. radioinmunoprecipitación(ROTURA). Se basa en el uso de proteínas virales marcadas con yodo radiactivo y los precipitados se detectan mediante contadores beta. Las desventajas del método incluyen el alto costo del equipo, la necesidad de equipar salas especiales para estos fines.

Las personas diagnosticadas con infección por el VIH están sujetas a un seguimiento dinámico constante con exámenes de laboratorio obligatorios cada 6 meses.

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) revela secuencias de nucleótidos premultiplicadas específicas para el genoma de un patógeno dado. La multiplicación aislada de un gen o de su fragmento, denominada amplificación, permite realizar la PCR in vitro utilizando la enzima ADN polimerasa termoestable. Durante 2-3 horas, PCR le permite obtener millones de copias de una sección específica del virus. Durante la infección por el VIH, a partir del ARN celular, incluido el ARN del virus, si se reprodujo en la célula o se integró en su genoma, mediante transcripción inversa e hibridación con "sondas" de oligonucleótidos marcados, se obtiene una cantidad suficiente de ADN proviral para análisis, que se detecta y caracteriza cuantitativamente, así como en relación con la pertenencia al genoma del VIH, estableciendo la homología del ADN y las secuencias de aminoácidos específicas del virus mediante un marcador radiactivo u otro de la sonda. La sensibilidad de la PCR es la detección de genes virales en una de cinco mil células.

La PCR, incluida la cuantitativa, solo se puede usar para determinar la carga viral en plasma para resolver el problema de iniciar el tratamiento farmacológico de un paciente o cambiar los medicamentos antirretrovirales. La PCR no se puede recomendar para diagnosticar la infección por VIH, ya que incluso los métodos más avanzados de su formulación y reactivos permiten determinar la carga viral no inferior a un cierto nivel: 50 copias / ml. Y la complejidad de configurar PCR y su alto costo (alrededor de $ 200) niegan su uso a gran escala como método de diagnóstico de laboratorio diario de la infección por VIH. Por lo tanto, la PCR sigue siendo indispensable solo para evaluar la carga viral en plasma en pacientes con un diagnóstico ya establecido de infección por VIH para resolver el problema de la terapia del paciente.

Esquemáticamente, las etapas del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH se muestran en la Fig. una.

Arroz. 1. Etapas del diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH

Durante la infección por VIH, existe un período de "ventana oscura de laboratorio" en el que la cantidad de anticuerpos anti-VIH es insuficiente para la sensibilidad de los sistemas de prueba. Este período varía de una semana a tres meses desde el momento de la infección por el VIH, dependiendo del nivel de sensibilidad del sistema de prueba. Ante este fenómeno, surgen dificultades a la hora de examinar la sangre donada de personas que se encuentran en el mencionado período de infección por el VIH. Por lo tanto, en la mayoría de los países del mundo, se ha introducido un sistema para usar sangre solo después de que haya sido almacenada durante 3 a 6 meses para llevar a cabo un nuevo examen obligatorio para la infección por VIH de los donantes de estas dosis de sangre y su componentes

La etapa de manifestaciones primarias se caracteriza por la actividad del proceso replicativo. La viremia y la antigenemia resultantes provocan la formación de anticuerpos específicos de la clase IgM: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. El antígeno p24 en algunos de los infectados puede detectarse en la sangre mediante ELISA tan pronto como 2 semanas después de la infección y puede determinarse hasta la octava semana. Además, en el curso clínico de la infección por VIH, se observa un segundo aumento en el contenido de la proteína p24 en la sangre, cae en el período de formación de la etapa del SIDA.

La aparición de una seroconversión completa, cuando se registra en la sangre periférica un alto nivel de anticuerpos específicos de la clase IgG contra las proteínas estructurales del VIH gp41, p24, gpl20, facilita enormemente el diagnóstico de la infección por VIH. La mayoría de los kits comerciales están diseñados para indicar precisamente estos anticuerpos.

Las dificultades para detectar anticuerpos en pacientes infectados por el VIH pueden surgir durante períodos de viremia y antigenemia masivas, cuando los anticuerpos específicos disponibles en la sangre se agotan para unir partículas virales y el proceso de replicación se adelanta a la producción de nuevos anticuerpos antivirales.

En individuos con un sistema inmunitario inicialmente debilitado, la viremia y la antigenemia aparecen antes y se mantienen en un nivel elevado hasta el desenlace de la enfermedad. Al mismo tiempo, dichos pacientes tienen un bajo contenido de anticuerpos libres contra el VIH, debido a dos razones: producción insuficiente de anticuerpos por parte de los linfocitos B y unión de anticuerpos de viriones y proteínas solubles del VIH, por lo tanto, para determinar la infección, sistemas de prueba con mayor Se requiere sensibilidad o modificaciones de los métodos de análisis, proporcionando la etapa de liberación de anticuerpos de los complejos inmunes.

A pesar de la abundancia de marcadores específicos de infección por VIH, el más frecuentemente determinado es la presencia de anticuerpos totales contra las proteínas del VIH. El término "total" implica la presencia de dos clases de anticuerpos (IgG e IgM) y una amplia gama de anticuerpos contra diversas proteínas del VIH, principalmente estructurales.

Determinación de células CD4. El principal indicador clínico y de laboratorio para diagnosticar el estadio de la infección por el VIH, el grado de destrucción del sistema inmunitario en pacientes en la vida cotidiana, fue la determinación del contenido de linfocitos CD4+: una disminución del nivel por debajo de 200 células/mm3 es el criterio principal para el diagnóstico del SIDA. Se cree que todos los individuos infectados por el VIH con un recuento de linfocitos CD4+ de 200 células/mm3 o menos requieren terapia antiviral y profilaxis de la neumonía por Pneumocystis. Y aunque 1/3 de las personas infectadas por el VIH con un recuento de linfocitos CO4+ inferior a 200 células/mm3 no presentan manifestaciones clínicas, la experiencia ha demostrado que desarrollan síntomas en los próximos 2 meses, por lo que todos son considerados pacientes en el SIDA. escenario.

Diagnóstico de la infección por VIH

¿Cómo saber si una persona tiene VIH? El método más común para diagnosticar la infección por VIH es el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Los sistemas de prueba ELISA se utilizan para detectar anticuerpos contra el VIH en el suero sanguíneo.

La infección por VIH se confirma mediante dos pruebas diferentes, una prueba de detección y una prueba de confirmación. Debido a su alta sensibilidad, las pruebas de detección pueden dar resultados falsos positivos. Por lo tanto, generalmente cuando se obtiene un resultado positivo inicial, se toma la misma muestra de sangre y se duplica la prueba de detección por segunda vez, y si nuevamente es positiva, solo entonces se realiza otro tipo de prueba confirmatoria. Las pruebas de confirmación solo se realizan en muestras de sangre que dan positivo repetidamente (son "reactivas").

La prueba de detección más común es el inmunoensayo enzimático (ELISA). Por lo general, la inmunotransferencia se utiliza como prueba de confirmación. La combinación de dos tipos diferentes de pruebas asegura que los resultados obtenidos sean de "alta precisión".

Los sistemas de pruebas de detección utilizan proteínas del VIH creadas artificialmente que "atrapan" anticuerpos específicos producidos por el cuerpo en respuesta a las proteínas del virus. Una vez que se capturan los anticuerpos, "pueden detectarse mediante reactivos que se aplican junto con un indicador, como una enzima que provoca un cambio de color". La máquina lee los cambios de color y determina el resultado. La inmunotransferencia funciona de manera similar, pero utiliza un campo eléctrico que discrimina entre diferentes componentes en función de su peso molecular. Esto hace posible identificar anticuerpos contra antígenos virales específicos, que luego se representan en papel como "rayas" distinguibles. Los sistemas de prueba modernos pueden detectar la infección por VIH en 3 a 5 semanas en la mayoría de las personas.

Si hubiera riesgo de contraer el VIH, ¿cuándo puedo hacerme la prueba?

El inmunoensayo enzimático (ELISA), que se usa para diagnosticar el VIH, puede no mostrar resultados hasta varias semanas después de la infección. Este tipo de análisis no determina el virus en sí, sino los anticuerpos contra él. En algunas personas, los anticuerpos están presentes en la sangre en cantidades suficientes después de 2 semanas. Sin embargo, a la mayoría de las personas les lleva más tiempo formar anticuerpos (seroconversión). Para que el resultado de la prueba sea suficientemente fiable, es necesario que hayan transcurrido unos 3 meses desde la situación de riesgo. A veces, la formación de anticuerpos lleva más tiempo, de 3 a 6 meses.

Si el resultado de la prueba es negativo después de 3 meses, ¿es necesario hacer una segunda prueba después de 6 meses?

En la gran mayoría de las personas, la prueba es bastante confiable después de 3 meses (para la mayoría, los anticuerpos aparecen incluso antes). Puede eliminar por completo la posibilidad de infección al pasar la prueba después de 6 meses.

¿Cuánto tiempo tengo que esperar para obtener los resultados de la prueba?

Depende de las características del laboratorio en el que se realice el ensayo. La prueba ELISA se puede realizar en el mismo día, pero en la mayoría de los laboratorios este período puede ser de 1-2 días a 2 semanas. Teniendo en cuenta que la espera de resultados puede ser un período muy frustrante, es mejor aclarar este tema con anticipación, antes de realizar el análisis. También puede averiguar si los fines de semana y los días festivos afectarán el horario de la prueba.

¿Qué tan confiable es un resultado positivo de la prueba?

A veces, ELISA tiene resultados falsos positivos (en aproximadamente el 1% de los casos), la razón de este resultado puede ser el embarazo, varias infecciones virales y un simple accidente. Después de recibir un resultado positivo, se necesita una prueba más precisa: una inmunotransferencia, según los resultados de los cuales se realiza un diagnóstico. Un resultado positivo de inmunotransferencia después de un ELISA positivo tiene una fiabilidad del 99,9%: esta es la precisión máxima para cualquier prueba médica. Si la inmunotransferencia es negativa, entonces la primera prueba fue un falso positivo y, de hecho, la persona no tiene el VIH.

¿Qué es un resultado indeterminado (dudoso)?

Si el ELISA es positivo o negativo, la inmunotransferencia puede ser positiva, negativa o indeterminada. Resultado de inmunotransferencia indeterminado, es decir se puede observar la presencia en el inmunoblot de al menos una proteína del virus si la infección ha ocurrido recientemente y todavía hay pocos anticuerpos contra el VIH en la sangre, en cuyo caso el inmunoblot se volverá positivo después de un tiempo. Además, puede aparecer un resultado indeterminado en ausencia de infección por VIH con hepatitis, algunas enfermedades metabólicas crónicas o durante el embarazo. En este caso, la inmunotransferencia se volverá negativa o se encontrará la causa del resultado indeterminado.

¿Necesito hacerme una prueba de VIH al solicitar un trabajo?

De acuerdo con la legislación de la Federación Rusa, la prueba obligatoria del VIH solo puede ser para donantes de sangre, ciudadanos extranjeros y apátridas que deseen ingresar al territorio de la Federación Rusa por un período de más de tres meses, así como personal médico que trabaja directamente. con sangre; personas en lugares de detención. Todos los demás ciudadanos se someten voluntariamente a la prueba del VIH.

infección por VIH Una enfermedad resultante de la infección con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

El VIH es un virus ARN perteneciente a la familia de los retrovirus.

Una propiedad común de los retrovirus es la presencia de una enzima, la transcriptasa inversa (revertasa), que "elimina" una copia genéticamente exacta en forma de ADN del ARN. Según la morfología, la estructura del genoma y otras características, el VIH pertenece a la familia de los lentivirus, es decir, virus de infecciones lentas. Las características comunes de las enfermedades causadas por virus de esta familia incluyen: un largo período de incubación que no tiene fechas exactas (de 1 mes a 10 años o más); aparición imperceptible y asintomática de la enfermedad; cuadro clínico de crecimiento lento; la mediación de la patogenia a través del sistema inmunitario y la alta tasa de variabilidad genética del virus. Todo esto complica enormemente el diagnóstico, tratamiento y prevención de la infección por VIH.

Actualmente se conocen dos tipos de VIH: VIH-1 y VIH-2. La enfermedad causada por el VIH-2 se caracteriza por una dinámica lenta y un curso más prolongado.

Epidemiología y modos de transmisión:

La infección por VIH es antroponosis, la única fuente del patógeno para una persona es un portador del virus y un paciente con SIDA.

Las partículas virales (viriones) están presentes en todos los fluidos biológicos del cuerpo, pero en diferentes concentraciones. El contenido más alto del virus está en la sangre y el líquido seminal.

El virus se transmite de tres formas:

de la madre al feto/recién nacido.

El VIH no se transmite a través del contacto doméstico normal ni de gotitas en el aire. No hay casos de transmisión del VIH a través de la picadura de insectos chupadores de sangre.

Sin embargo, la contagiosidad del VIH no es tan alta como la de otras ITS. Así, de más de 1600 parejas sexuales encuestadas de personas infectadas por el VIH, solo el 15% se infectaron con este virus.

El desarrollo de la infección por VIH está determinado por dos factores que interactúan: la principal propiedad patógena del VIH, que debilita el sistema inmunitario de una persona infectada, y la respuesta inmunitaria específica del organismo que se desarrolla durante el curso de la enfermedad.

El VIH es pantropeno, pero las principales células diana son los T-helper, que transportan cientos de moléculas receptoras CD4+ en la membrana. En el organismo, el virus pasa de un estado menos agresivo a uno más agresivo, lo que se expresa en una disminución progresiva del número de linfocitos CD4+ en sangre hasta su completa desaparición y conduce a un empeoramiento del cuadro clínico.

Desde el momento de la infección hasta la aparición de anticuerpos antivirales específicos se produce, por regla general, 6-8 semanas. El período entre la infección y la aparición de anticuerpos detectables contra el VIH en el suero sanguíneo se denomina período de "ventana".

Por un lado, el sistema inmunológico es un objetivo para el virus, por otro lado, él mismo produce anticuerpos específicos contra él. Al mismo tiempo, se desarrollan procesos autoinmunes en el sistema inmunológico, que agravan el proceso de destrucción de células y tejidos del cuerpo.

La infección por VIH se caracteriza por la ausencia de un cuadro clínico específico, y su diagnóstico, por regla general, se realiza sobre la base de una anamnesis cuidadosamente recopilada, en combinación con una serie de signos confirmados por diagnósticos de laboratorio. En 1983, la OMS desarrolló ciertos criterios para establecer la presencia de infección por VIH en ausencia de diagnósticos serológicos (criterios "Bangi"). Éstos incluyen:

- pérdida de peso corporal en más del 10% del original;

- diarrea crónica durante más de un mes;

- fiebre prolongada durante un mes (constante o intermitente).

- tos persistente durante más de un mes;

- dermatitis pruriginosa generalizada;

- antecedentes de herpes zoster;

- infección por herpes crónica progresiva o diseminada (herpes simplex);

El diagnóstico de infección por VIH según estos criterios se puede hacer al paciente si tiene simultaneamente al menos dos elementos "grandes" y uno "pequeño". Un motivo suficiente para el diagnóstico de SIDA puede ser la detección de sarcoma de Kaposi generalizado o meningitis criptocócica en un paciente. Debido a la baja sensibilidad y especificidad de estos criterios, la OMS posteriormente requirió la confirmación serológica del diagnóstico.

Clasificación clínica de la infección por VIH:

Etapa de manifestaciones primarias:

A. fase febril aguda;

B. fase asintomática;

B. linfadenopatía generalizada persistente.

Etapa de enfermedades secundarias:

A. Pérdida de peso inferior a 10 kg, lesiones superficiales bacterianas, virales, fúngicas de la piel y mucosas, herpes zoster, faringitis de repetición, sinusitis.

B. Pérdida de peso progresiva de más de 10 kg, diarrea inexplicada, fiebre durante más de 1 mes, leucoplasia vellosa, tuberculosis pulmonar, lesiones repetidas o persistentes de órganos internos por bacterias, hongos, virus o protozoos (sin diseminación) o lesiones profundas de los piel y mucosas, herpes zoster repetido y diseminado, sarcoma de Kaposi localizado.

La presencia de anticuerpos contra el VIH dependiendo de la etapa de la enfermedad.

Anticuerpos contra el VIH en la sangre

resultado de la prueba del VIH

II. Manifestaciones primarias

B. Fase asintomática

tercero Enfermedades secundarias

Después de que el virus ingresa al cuerpo, se multiplica en la sangre. En el 50% de las personas infectadas durante este período, puede desarrollarse un estado prodrómico, acompañado de un aumento de la temperatura corporal a 38,5-39,5 °C y otros síntomas similares a la mononucleosis y que dura de tres a 10 días. Esta condición pasa, asemejándose al período de recuperación después de una infección de influenza.

A partir de la semana 6-8 de la enfermedad, hay un aumento en el nivel de anticuerpos en la sangre, es decir, seroconversión. Durante este período, pueden desarrollarse linfadenopatías generalizadas e inmunodeficiencia leve, pero en algunos pacientes las manifestaciones clínicas de la infección por VIH son mínimas. Con un síndrome pronunciado de inmunodeficiencia humana adquirida (SIDA), hay un rápido desarrollo de infecciones oportunistas de los órganos internos, el sistema nervioso se ve afectado. En piel y mucosas se observa activación de la flora saprofita. Se desarrollan el sarcoma de Kaposi y otros tumores. Pueden volverse más activas infecciones como tuberculosis, sífilis, micosis profundas, etc.. La neumonía por Pneumocystis es una enfermedad típica de las personas infectadas por el VIH. En algunos pacientes, el hígado y el bazo están agrandados, lo que es un signo desfavorable que indica una rápida progresión del proceso. Hay formas cerebrales de infección por VIH, como la meningitis causada por hongos de levadura, abscesos cerebrales toxoplásmicos, encefalitis aguda y subaguda, tumores cerebrales aislados (linfomas). Los pacientes pueden presentar diversas lesiones vasculares.

Los métodos de diagnóstico inespecífico incluyen lo siguiente: determinación del contenido de subpoblaciones de linfocitos T en la sangre, evaluación de la actividad de la reactividad de los linfocitos T en sangre periférica o material de biopsia.

Los métodos de diagnóstico específicos incluyen:

— detección de ADN del provirus o ARN del virus del VIH en células humanas mediante PCR;

- detección de viriones infecciosos maduros en fluidos biológicos y células;

- determinación de proteínas solubles del virus (antígenos);

- determinación de anticuerpos frente al VIH (ELISA, inmunoblot, reacción de aglutinación, radioinmunoprecipitación).

El método de diagnóstico de detección más común es ELISA. Un resultado negativo puede indicar:

- sobre la ausencia de infección;

- sobre la realización de un estudio antes del inicio de la seroconversión (durante el período de "ventana" o durante otros períodos de desaparición del título de anticuerpos).

Los resultados positivos son verdaderos o falsos. Se pueden obtener falsos positivos al examinar pacientes con enfermedades crónicas infecciosas, autoinmunes u oncológicas, mujeres embarazadas no infectadas, pacientes después de transfusiones de sangre y pacientes con alcoholismo crónico. El tiempo más temprano para la detección de anticuerpos contra el VIH es de 3 a 4 semanas a partir de la fecha de la infección.

Análisis confirmatorio. inmunotransferencia

Después de la prueba de detección, todos los resultados positivos se verifican en otro sistema ELISA y luego, en una prueba más sensible, inmunotransferencia. Los sueros confirmados por esta prueba pueden considerarse verdaderos positivos.

Antes de realizar una prueba de VIH, el paciente debe necesariamente ser consultado (consejería previa a la prueba) sobre las razones por las cuales es necesario realizar un análisis, y después de recibir el resultado, en consecuencia, es necesario realizar una prueba posterior. asesoramiento para explicar el resultado del estudio. La confidencialidad debe observarse en todas las etapas del diagnóstico y el tratamiento posterior.

Existen cuatro enfoques principales para el tratamiento de la infección por VIH: etiológico, inmunoestimulante, inmunosustitutivo y patogénico (contra infecciones secundarias).

Los análogos de nucleótidos o los inhibidores de otras clases tienen la capacidad de suprimir la transcriptasa inversa del virus. El primer fármaco para el tratamiento de pacientes con SIDA fue un análogo de nucleótido: la azidotimidina. El medicamento causa efectos secundarios, que afectan principalmente a la hematopoyesis, y en la mayoría de los pacientes con uso a largo plazo (más de 6 meses), se forma resistencia. Actualmente, se usan más de 10 nuevos medicamentos: inhibidores de proteasas y transcriptasa inversa. La rápida tasa de mutación del VIH en el cuerpo, acompañada por la aparición de cepas resistentes al tratamiento, complica enormemente el proceso de creación de medicamentos efectivos.

Solo un enfoque combinado puede limitar la replicación del virus y prevenir el desarrollo de resistencia a los medicamentos. La terapia antirretroviral triple (una combinación de tres fármacos basados ​​en dos análogos de nucleósidos e inhibidores de la proteasa) se ha convertido en el estándar.

El diagnóstico de la infección por VIH incluye dos etapas: establecer el hecho real de la infección por VIH y determinar la etapa de la enfermedad. La determinación de la etapa es seguida inextricablemente por la aclaración de la naturaleza del curso de la enfermedad y luego la formación del pronóstico en este paciente, así como la elección de las tácticas de tratamiento.

Como saben, el diagnóstico de cualquier enfermedad infecciosa se basa en la comparación de datos epidemiológicos, clínicos y de laboratorio, y la exageración del valor de uno de los grupos de estos datos puede conducir a errores de diagnóstico.

Criterios epidemiológicos para la infección por el VIH .

El primer paso para diagnosticar la infección por VIH es recopilar un historial epidemiológico y otros datos epidemiológicos sobre el paciente examinado. La falta de datos epidemiológicos puede complicar significativamente el diagnóstico de la infección por el VIH e impedir la implementación de medidas antiepidémicas.

En ocasiones, los criterios epidemiológicos pueden ser decisivos para realizar un diagnóstico de infección por el VIH, pero también pueden tener una importancia secundaria. El criterio para una alta probabilidad de infección es la detección en la persona examinada de factores de riesgo de infección tales como la transfusión de sangre de donante recibida de una persona infectada por el VIH, el nacimiento de un niño infectado por el VIH por parte de la mujer examinada. Existe una alta probabilidad de infección en el caso del nacimiento del sujeto de una madre infectada por el VIH, contacto sexual con una persona infectada por el VIH, uso conjunto de drogas por vía parenteral con una persona infectada por el VIH. Se encuentra cierto riesgo de infección con intervenciones parenterales confiables que se llevan a cabo con instrumentos que probablemente estén contaminados con el VIH (es decir, en focos nosocomiales y similares de infección por el VIH con transmisión parenteral del VIH).

Se puede hablar de un riesgo notable de infección en los casos en que el sujeto informe de relaciones sexuales o uso de drogas por vía parenteral en áreas donde el VIH es significativamente prevalente entre el grupo de población al que pertenece el sujeto.

Al mismo tiempo, las relaciones sexuales y el uso de drogas en áreas con baja prevalencia de infección por VIH no excluyen la posibilidad de infección por VIH.

La ausencia de factores de riesgo fiables para la infección por el VIH puede poner en duda los datos de laboratorio. En tales casos, se recomienda repetir las pruebas de laboratorio.

Criterios clínicos para la infección por VIH.

El diagnóstico precoz de la infección por VIH asegura el tratamiento oportuno del paciente y el despliegue de medidas preventivas en el brote, evitando la transmisión no intencionada del virus de una persona infectada a una sana. Finalmente, el diagnóstico temprano permite un examen clínico oportuno, asistencia psicológica y rehabilitación social. Los primeros éxitos en el tratamiento de pacientes permiten, con un diagnóstico precoz, prolongar significativamente la vida de los pacientes e incluso esperar una cura.

La complejidad del diagnóstico precoz basado en el cuadro clínico radica en la inespecificidad, polimorfismo de los síntomas en el estadio II, sin mencionar la ausencia de clínica en el estadio I. Sin embargo, en todos los casos de fatiga inmotivada, la presencia de sudores nocturnos , dolor de cabeza, especialmente en el contexto de fiebre a corto plazo ( 3-10 días) con una temperatura de 38-38.50 C, acompañada de amigdalitis, síndrome diarreico prolongado, pérdida de peso en poco tiempo, en primer lugar es necesario excluir infección por VIH El diagnóstico durante este período se ve favorecido por la identificación de una variedad de erupciones cutáneas (manchas, pápulas, roséola, pústulas) o forunculosis durante un examen objetivo. La presencia de adenopatías, incluso en casos de aumento de un grupo de ganglios linfáticos, y más aún con uno generalizado, es más probable que sospeche clínicamente de infección por VIH. La enfermedad se caracteriza especialmente por un aumento de los ganglios linfáticos cervicales posteriores, submandibulares, supra y subclavios, axilares y cubitales. Como regla general, aumentan de tamaño hasta 2-5 cm de diámetro, son indoloros, de consistencia densamente elástica, ocasionalmente se fusionan en un conglomerado. Es muy típico que la infección por VIH aumente más de un ganglio, más de un grupo (a excepción del inguinal), con una duración superior a los 3 meses.

A menudo, en la fase temprana de la enfermedad, la presencia de síntomas psiconeurológicos: ansiedad, depresión, marcha inestable, disminución de la agudeza visual, ataques convulsivos con signos de daño a la esfera psicoemocional (deterioro de la memoria, olvido, comportamiento inadecuado, embotamiento de emociones). A los rasgos más característicos Las primeras etapas de la infección por el VIH incluyen:

1. Menos del 10% de pérdida de peso;

2. Cambios en la piel y las membranas mucosas (dermatitis seborreica, foliculitis, prurigo, psoriasis, infecciones fúngicas de las uñas, úlceras orales recurrentes, gingivitis necrotizante);

3 . Herpes zoster en personas menores de 50 años;

4. Infecciones recurrentes del tracto respiratorio superior;

EN etapa intermedia las enfermedades caracterizadas por una clínica de superinfección extendida, formada como resultado de la inmunodeficiencia, son las más características:

1 . Pérdida de peso progresiva superior al 10%;

2 . Diarrea de origen desconocido, que dura más de 1 mes;

3 . candidiasis oral;

4 . leucoplasia;

5. Tuberculosis pulmonar;

6. Neuropatía periférica;

7. Formas localizadas del sarcoma de Kaposi;

8. Diseminación del herpes zoster;

9. Infección bacteriana grave y recurrente (neumonía, sinusitis, piomiositis).

Para etapa tardía, que permitan diagnosticar la infección por el VIH, o, en todo caso, realizar el diagnóstico diferencial, incluyen:

1. neumonía por Pneumocistis;

2 . toxoplasmosis;

3. criptococosis;

4. infección por CMV;

5. Herpes Simple;

6. leucoencefalopatía multifocal progresiva;

7. Histoplasmosis;

8. esofagitis por cándida;

9. infección por MAC;

10. Septicemia por Salmonella;

11. tuberculosis extrapulmonar;

12. Linfoma, sarcoma de Kaposi;

13. caquexia;

14. Encefalopatía por VIH.

En 1988, la OMS propuso con fines de diagnóstico clínico realizar puntuación de síntomas disponible en un paciente con sospecha de infección por VIH:

Adenopatías generalizadas persistentes 0

Cambios en la piel y mucosas 1

pérdida de peso 1

Fatiga severa 1

Herpes simple 2

Diarrea que dura más de 1 mes. 4

Fiebre que dura más de 1 mes. 4

Pérdida de peso superior al 10% 4

Tuberculosis pulmonar 5

Infección bacteriana recurrente 5

Leucoplasia bucal 5

Estomatitis, candidiasis bucal 5

Sarcoma de Kaposi localizado 8

Caquexia 12

Al mismo tiempo, la suma de puntos de 0 a 3 se estima que la probabilidad de infección por VIH es muy pequeña, 4-11 puntos - la enfermedad es probable y 12 o más - muy probable.

En general, el diagnóstico clínico de la infección por VIH es, en primer lugar, el diagnóstico del espectro de la patología asociada al sida en un paciente con inmunodeficiencia secundaria. Dado que las enfermedades indicadoras del VIH incluyen 23 formas nosológicas, lo más apropiado es un enfoque sindrómico para el diagnóstico. Casi siempre, el paciente tiene un síndrome de intoxicación general (debilidad inmotivada, letargo, fatiga) que se desarrolla en el contexto de fiebre baja prolongada o fiebre de origen desconocido, más a menudo por la noche y por la mañana, acompañada de sudor abundante. El síndrome de adenopatías periféricas generalizadas inmotivadas es permanente, en un 20% se acompaña de hepatoesplenomegalia de gravedad variable. Uno de los principales síndromes de la enfermedad es el síndrome de la patología broncopulmonar, aunque en los casos avanzados de la enfermedad se desarrollan lesiones profundas del tejido pulmonar en forma de neumonía por neumocistis, porque la neumocistosis se desarrolla en el contexto de una inmunodeficiencia profunda. Pero con una duración de más de 1 mes, el síndrome de diarrea inmotivada se refiere a la aparición temprana, se caracteriza por la resistencia a la terapia con medicamentos. Uno de los síndromes de la infección por VIH es la artralgia ondulante de etiología desconocida. Las manifestaciones más características de la enfermedad incluyen el síndrome de lesiones de piel y mucosas, manifestado por una erupción maculopapular inespecífica, eccema resistente a la terapia con esteroides e impétigo estafilocócico. Las manifestaciones dermatológicas también incluyen lesiones fúngicas recurrentes (micosis, candidiasis, bacterianas (foliculitis, forunculosis, hidroadenitis), virales (herpes) de la piel y las membranas mucosas. Finalmente, la infección por VIH también se caracteriza por neoplasias, principalmente en forma de sarcoma de Kaposi y linfoma, así como algunos otros tipos de tumores.

La presencia en un paciente de al menos dos síntomas clínicos y dos de laboratorio (leuco-lifononeutropenia, hipogammaglobulinemia) de los síntomas anteriores permite diagnosticar la infección por VIH con un alto grado de confianza. Pero al mismo tiempo, en caso de detección de dos de esos síndromes que son muy comunes en los pacientes, como fiebre y linfadenopatía, que persisten durante un mes o más, diarrea inmotivada persistente, pérdida de peso en más del 10% o profusa. sudores nocturnos, dan lugar a un diagnóstico de estadificación y un examen de laboratorio completo.

EN etapa 2a la enfermedad sólo puede sospecharse por el síntoma de adenopatías generalizadas persistentes en un paciente de riesgo o en presencia de antecedentes epidemiológicos.

EN etapa 2b(precoz o leve), bienestar somático, aún se conserva la actividad normal. Las lesiones de piel y mucosas no son graves, las infecciones recurrentes de las vías respiratorias no son generalizadas, la pérdida de peso no supera el 10%.

De acuerdo con las recomendaciones de la OMS, es posible un diagnóstico clínico confiable de la infección por VIH en adultos y niños en presencia de una de las 12 enfermedades indicadoras de SIDA: 1) candidiasis del esófago, tráquea, bronquios, pulmones; 2) criptococosis extrapulmonar; 3) criptosporidiosis con diarrea por más de un mes; 4) daño por citomegalovirus a cualquier órgano (con la excepción y además del hígado, el bazo y los ganglios linfáticos en un paciente mayor de 1 mes); 5) infección causada por el virus del herpes simple, persistente por más de 1 mes en un paciente mayor de 1 mes; 6) Sarcoma de Kaposi en paciente menor de 60 años; 7) linfoma cerebral en paciente menor de 60 años; 8) neumonía intersticial linfocítica en menor de 13 años, 9) infección diseminada causada por bacterias del grupo Mycobacterium avium intracellulare o M. Kansassii; 10) neumonía por pneumocistis; 11) leucoencefalopatía multifocal progresiva; 12) toxoplasmosis del sistema nervioso central en pacientes mayores de 1 mes. La presencia de una de estas enfermedades permite diagnosticar la infección por VIH en ausencia de un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas serológico, o incluso cuando se obtiene un resultado seronegativo.

No menos compleja es la diferenciación de las fases de la enfermedad, es decir. Estadificación según criterios clínicos. Según los expertos de los CDC (EE. UU.), el criterio más objetivo es el número de células T auxiliares y no las manifestaciones clínicas, ya que muchas de estas condiciones suelen encontrarse en personas que no están infectadas por el VIH. En 1991, el Centro determinó que se puede hacer un diagnóstico de SIDA si: a) la persona infectada tiene una de las 23 condiciones relacionadas con el SIDA ob) está infectada por el VIH y tiene menos de 200 células CD4+/mm.

Criterios de laboratorio para la infección por VIH.

La prueba de infección por VIH está sujeta principalmente a:

2 . Personas con una clínica de esofagitis por Candida, candidiasis de los bronquios y pulmones, coccidiomicosis diseminada o extrapulmonar, neumonía por pneumocystis, criptococosis extrapulmonar, criptosporidiosis con diarrea durante más de 1 mes, lesiones por citomegalovirus de órganos internos excepto hígado, bazo, ganglios linfáticos en pacientes mayores de 6 meses, retinitis por citomegalovirus con pérdida de visión, infección herpética con úlceras multifocales de más de 1 mes, bronquitis, neumonía o esofagitis, herpes zoster recurrente, histoplasmosis diseminada o extrapulmonar, tuberculosis pulmonar o extrapulmonar, isosporiosis con diarrea de más de 1 mes, infecciones MAC generalizadas o extrapulmonares, leucoencefalopatía multifocal progresiva, toxoplasmosis cerebral, septicemia por salmonella, sarcoma de Kaposi, linfoma, neumonía intersticial linfoide (en niños)

Actualmente, para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH se utilizan varios métodos para detectar VIH, antígenos de VIH y material genético de VIH, así como métodos para detectar anticuerpos contra VIH. Todos estos métodos tienen diferente eficiencia, requieren diferentes equipos y diferentes niveles de capacitación del personal. Los resultados de estos estudios requieren una interpretación competente.

El diagnóstico de la infección por VIH incluye 2 etapas: establecer el hecho real de la infección por VIH y determinar la etapa de la enfermedad. La determinación de la etapa es inextricablemente seguida de la determinación de la naturaleza del curso de la enfermedad y luego la formación de un pronóstico para este paciente, así como la elección de las tácticas de tratamiento.

Como saben, el diagnóstico de cualquier enfermedad infecciosa se basa en la comparación de datos epidemiológicos, clínicos y de laboratorio, y la exageración del valor de uno de los grupos de estos datos puede conducir a errores de diagnóstico.

El lector debe ser advertido desde el principio que un error común en el diagnóstico de la infección por VIH es hacer un diagnóstico basado en una sola prueba de laboratorio en la que el médico, por una u otra razón, tiene demasiada confianza. Algunos trabajadores de laboratorio incluso se toman la libertad de diagnosticar la infección por VIH sin siquiera ver al paciente. A veces, los médicos también confían implícitamente en los resultados de laboratorio, que solo pueden ser útiles como "testigos individuales en el veredicto final" del paciente. Durante los 15 años que hemos estado observando la infección por VIH en Rusia, hemos visto decenas, si no cientos, de casos de errores asociados con la confianza fanática de algunos médicos en los resultados de una prueba de laboratorio. No podemos detenernos en los errores "ordinarios" que ocurren con bastante frecuencia cuando se mezclan los sueros, la documentación se completa incorrectamente, etc. El médico debe conocer el valor diagnóstico de un método en particular. Conocemos un caso en San Petersburgo, como resultado del uso inepto de algún método "nuevo", un "científico" diagnosticó una "infección por VIH" a una persona completamente sana y no infectada (a quien, por cierto, él nunca había visto), por lo que este último se suicidó. Otro "científico" no menos destacado durante varios años argumentó al liderazgo de una de las ex repúblicas soviéticas que la población de este país estaba "afectada por la epidemia del SIDA", ya que el método de investigación "supersensible" que desarrolló "detecta la infección por VIH en personas infectadas mucho antes que todos los demás métodos conocidos". En ambos casos, por supuesto, se trataba de las falsas reacciones que daban sus “últimos métodos”.

Se describe un caso típico de "establecimiento de un diagnóstico de infección por VIH (virológicamente)". A pesar de que el hombre fallecido descrito, de 21 años, no tenía factores de riesgo significativos para la infección por el VIH en la historia epidemiológica, los análisis de sangre para anticuerpos contra el VIH eran negativos, no se diagnosticó una sola enfermedad oportunista típica de la infección por el VIH y se realizó un estudio anatomopatológico. diagnóstico de linfogranulomatosis con daño a la médula ósea, hígado, bazo, ganglios linfáticos intestinales”, el autor de la descripción anterior (aparentemente, solo en su propio artículo) le hace un “diagnóstico póstumo” de infección por VIH. La base de este diagnóstico "retrospectivo" fue la mención de que el material del paciente "fue examinado por hibridación molecular utilizando una sonda radiactiva y reveló la presencia de secuencias específicas del virus VIH-1 en células mononucleares". Aparentemente, el autor del artículo, bajo la fuerte impresión de la terminología virológica, vio en "este ejemplo el valor excepcional de los diagnósticos virológicos en comparación con los serológicos, especialmente en niños pequeños".

Como ya hemos señalado, los nuevos métodos de diagnóstico deben ser confirmados por los antiguos, y no al revés. Por lo tanto, nuestra recomendación general para clínicos y epidemiólogos es ser escépticos ante todas las "nuevas técnicas" hasta que se conozcan todas sus ventajas y desventajas. En la actualidad, esto afecta directamente al diagnóstico de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y otros "métodos de diagnóstico genético", con la ayuda de los cuales algunos investigadores ya han "descubierto el SIDA en momias egipcias" y "ya han comenzado a detectarlo en ratas". Los avances recientes solo muestran que llevará varios años más adaptar completamente estas técnicas a las necesidades de la medicina.

Hasta hace poco, las disputas sobre si es posible diagnosticar la infección por VIH sin confirmación de laboratorio no han cesado. Este sería el tema de un debate serio si los métodos para detectar anticuerpos contra el VIH no estuvieran ampliamente disponibles en Rusia. Sin embargo, somos de la opinión de que es bastante posible. Observamos muchos casos en los que el diagnóstico de infección por el VIH no estuvo en duda desde el momento de la recogida de la anamnesis y la primera exploración del paciente. Es difícil para nosotros recordar un caso en el que la linfadenopatía típica en un nativo de África Central o Oriental no resultó ser un signo seguro de infección por VIH. Sólo en 2 pacientes jóvenes a los que tuvimos que consultar, aunque previamente habían recibido hormonoterapia masiva, el sarcoma de Kaposi en cabeza y cuerpo no era manifestación de infección por VIH.

Debido a la tradición que se ha desarrollado en Rusia, millones de personas son examinadas en busca de anticuerpos contra el VIH sin indicaciones específicas y, en la mayoría de los casos, el médico primero recibe los resultados del estudio (una reacción positiva a los anticuerpos contra el VIH) y solo luego ve al paciente. él mismo y puede entrevistarlo.

Se olvida rápidamente que los datos de laboratorio son solo una confirmación de los clínicos. En los casos en que el médico ya sabe que el paciente examinado tiene anticuerpos contra el VIH, fácilmente puede cometer un error al hacer un diagnóstico. Entonces, en 1985-1989. tuvimos que examinar a decenas de pacientes que fueron enviados a Moscú desde todo el país debido a falsas confirmaciones de laboratorio de infección por VIH. En 1987-1995 para un verdadero "diagnóstico de laboratorio" positivo, basado solo en la determinación de anticuerpos contra el VIH por inmunoensayo enzimático (ELISA), ¡hubo hasta 2000-3000 falsos! Todas las personas con tal reacción solían estar bajo observación de dispensario durante mucho tiempo, creando mucho trabajo para el personal de los centros para la prevención y el control del SIDA.

En el 90-95% de las personas infectadas, los anticuerpos contra el VIH aparecen dentro de los 3 meses posteriores a la infección, en el 5-9%, después de 6 meses y en el 0,5-1%, en una fecha posterior. El tiempo más temprano para la detección de anticuerpos es de 2 semanas desde el momento de la infección.

De interés práctico son los casos en los que se examina a un paciente en el período de incubación o en la etapa IIA de la infección por VIH y la cantidad de anticuerpos en su sangre aún es demasiado baja para su detección. Sin embargo, con suficiente experiencia, los especialistas en enfermedades infecciosas reconocen rápidamente estos casos. Así, por ejemplo, una vez que el doctor M.A. Burchik, quien trabajaba en el departamento de botiquín del Hospital Clínico de Enfermedades Infecciosas No. 2 de Moscú, sospechó infección por VIH en un hombre de 44 años que había regresado de un viaje a los Estados Unidos, quien padecía una enfermedad que clínicamente muy se parecía mucho a la mononucleosis infecciosa, y en el primer examen fue seronegativo para el VIH. MAMÁ. Burchik señaló con razón que la edad madura del paciente es atípica para la mononucleosis, porque N.F. Filatov en un momento lo llamó "fiebre glandular infantil", y algunos autores que lo observaron en adultos también lo llamaron "la enfermedad de los estudiantes y amantes", es decir, personas de corta edad. Una prueba repetida de anticuerpos contra el VIH, realizada después de 1 semana, también dio resultados negativos. Sin embargo, M. A. Burchik mostró perseverancia, y ya en el tercer estudio, realizado 1 mes después del inicio de las manifestaciones clínicas, se detectaron anticuerpos contra proteínas individuales del VIH y, posteriormente, una reacción "completamente positiva" para anticuerpos contra el VIH en inmunotransferencia. Durante la posterior recolección de la historia epidemiológica, resultó que el paciente mantuvo relaciones homosexuales durante un viaje a Estados Unidos, a raíz de lo cual se infectó con el VIH.

Entre los más estudiados y difundidos se encuentra el método de detección de anticuerpos contra el VIH. Dado que la infección por el VIH en la mayoría de los casos es de por vida, el mero hecho de detectar anticuerpos es suficiente para el diagnóstico. Con la infección por VIH, a diferencia de otras infecciones, en la mayoría de los casos no es necesario usar emparejado, es decir. tomado después de un cierto período de tiempo, suero.

La detección de anticuerpos puede, en principio, detectar a más del 99% de las personas infectadas por el VIH. Algunas dificultades están asociadas con el hecho de que los anticuerpos contra el VIH están ausentes en las primeras semanas después de la infección y, en la etapa terminal de la enfermedad, su número puede disminuir notablemente. Hay información sobre algunos casos bastante raros de infección por VIH, cuando los anticuerpos no se detectan durante mucho tiempo o desaparecen durante un tiempo relativamente largo.

Así, de 1995 a 1997, se identificaron 8 pacientes con signos clínicos de infección por VIH en EE. UU. y Canadá, en los que las pruebas séricas repetidas para la presencia de anticuerpos dieron resultados negativos. Todos los pacientes tenían manifestaciones clínicas correspondientes a la definición de SIDA, el nivel de linfocitos CD4 fue inferior a 0,2 10 9 /l. Las pruebas para el antígeno p24 fueron positivas, al igual que los resultados de detección de ARN y ADN del VIH. El estudio de los sueros de estos pacientes en varios sistemas de prueba para la detección de anticuerpos mostró que algunos de ellos detectan la presencia de anticuerpos contra el VIH, mientras que otros no. La inmunotransferencia de sueros en 4 de 8 pacientes reveló la presencia de anticuerpos contra las proteínas del VIH, i. estos sueros podrían considerarse cuestionables (resultado no interpretable).

La observación anterior enfatiza la necesidad de una evaluación integral de los resultados del examen en el diagnóstico de la infección por VIH, ya que en todos los casos se sospechó la enfermedad en base a las manifestaciones clínicas. En varios pacientes de este grupo se pudo identificar antecedentes de relaciones sexuales con personas que posteriormente enfermaron de sida. La importancia epidemiológica de tales casos es generalmente baja, ya que ocurren con poca frecuencia, pero en teoría pueden desempeñar un papel en la aparición de brotes individuales, lo que debe tenerse en cuenta al realizar una investigación epidemiológica.

Incluso antes, los expertos expresaron la opinión de que la ausencia de anticuerpos contra el VIH 6 meses después de la infección es extremadamente rara y que un resultado negativo de la prueba de anticuerpos contra el VIH dentro de este período probablemente sea "un fuerte argumento en contra del diagnóstico de infección por VIH". Descrito por P. Sullivan et al. Los casos "seronegativos" de infección por VIH clínicamente pronunciada representaron solo centésimas por ciento del número total de pacientes con SIDA detectados en los Estados Unidos durante el mismo período de tiempo. Teóricamente, se puede suponer que con un aumento en la incidencia de la infección por VIH en Rusia, el número absoluto de tales casos aumentará y, en consecuencia, puede aumentar el papel de las fuentes seronegativas en el proceso epidémico. Sin embargo, a medida que aumenta la calidad de los sistemas de pruebas de diagnóstico y su capacidad para detectar concentraciones cada vez más bajas de anticuerpos, estos cálculos pueden no ser significativos.

Dado que la terminología utilizada en el diagnóstico de laboratorio de la infección por el VIH no siempre es clara para el médico, debemos detenernos en ella con más detalle.

Los sistemas de pruebas de diagnóstico se denominan conjuntos especiales de reactivos para la detección de marcadores de infección por VIH. La mayoría de las veces, como señalamos anteriormente, están diseñados para detectar anticuerpos contra el VIH. Su principal diferencia es solo el método de detección de la reacción del anticuerpo con el antígeno del VIH. Los sistemas de prueba difieren, además del método de detección de una reacción antígeno-anticuerpo, en la selección de los antígenos del VIH utilizados, que pueden obtenerse directamente del VIH por métodos recombinantes o sintetizarse a partir de aminoácidos, así como en la selección de los reactivos relacionados. y diseño. Los profesionales no deben confundirse con las expresiones "sistemas de prueba de tercera generación", "sistemas de prueba de nueva generación", etc., que se utilizan con mayor frecuencia con fines publicitarios. De hecho, esto solo oculta el uso de nuevos ingredientes, aunque de hecho la calidad del "sistema de prueba de cuarta generación" puede ser significativamente menor que la del sistema de prueba de "primera generación". Por lo tanto, los sistemas de prueba que utilizan un "lisado viral" como antígeno, es decir, del virus destruido se denominan “primera generación”, pero en su capacidad para identificar a todas las personas infectadas que tienen anticuerpos contra el VIH, pueden superar a las “nuevas generaciones”.

Las características cualitativas de estas pruebas son la capacidad de detectar el máximo número de sueros positivos verdaderos, es decir, sueros que realmente contienen anticuerpos contra el VIH (sensibilidad del sistema de prueba), y la capacidad de registrar el número mínimo de falsos positivos, es decir, dando una reacción falsa con el diagnosticum, sueros (especificidad del sistema de prueba). Si la sensibilidad declarada de la prueba es del 99,9%, esto significa que detecta 999 de 1000 sueros que contienen anticuerpos y no detecta un suero. Si la especificidad se declara como 99.9%, entonces esto significa que la prueba reaccionará como positiva con uno de los 1000 sueros probados, que definitivamente no contienen anticuerpos contra el VIH.

Por regla general, la sensibilidad y especificidad reales de los sistemas de prueba son inferiores a las declaradas por los fabricantes, y su valor puede juzgarse principalmente por los resultados de la aplicación práctica.

Es bastante natural que la mayor cantidad de sueros que contienen anticuerpos contra el VIH se detecten mediante aquellas pruebas que contienen determinantes antigénicos que se encuentran con mayor frecuencia en el VIH-1. Pero para detectar, por ejemplo, sueros aún más raros con anticuerpos contra el VIH-2 o el subtipo O del VIH-1, actualmente es necesario introducir determinantes antigénicos específicos para estas variantes en el conjunto de antígenos, es decir, ampliar constantemente el conjunto de determinantes antigénicos. La incapacidad del sistema de prueba para detectar ambos sueros positivos que contienen algunos anticuerpos conduce a resultados falsos negativos, que pueden deberse tanto a una sensibilidad insuficiente asociada con la selección incorrecta de los reactivos utilizados como a una selección inadecuada de los determinantes antigénicos utilizados.

Todos los sistemas de prueba conocidos tienen algunas limitaciones en su capacidad para detectar todos los sueros que contienen anticuerpos contra el VIH (en términos de sensibilidad), aunque solo sea porque la cantidad de estos anticuerpos puede ser muy pequeña, especialmente en los períodos inicial y final de la enfermedad. Sin embargo, en experimentos modelo con sueros positivos previamente conocidos ("panel de diagnóstico de sueros"), la sensibilidad de algunos sistemas de prueba puede alcanzar el 100%, es decir, detectan todos los sueros positivos conocidos utilizados en este experimento. Al mismo tiempo, por supuesto, no se debe olvidar que las personas que realizan las pruebas pueden seleccionar accidental o deliberadamente sueros con ciertas características que afectan el resultado de la prueba.

Al mismo tiempo, las reacciones de falso positivo son inherentes a casi todos los sistemas de prueba. Esto se debe al hecho de que en los materiales de prueba pueden estar presentes anticuerpos contra antígenos similares a los antígenos del VIH o contra antígenos contaminantes. Así, en el método clásico de obtención de un antígeno del VIH a partir de un lisado de cultivos de células virales, en el producto final se encuentran fragmentos de linfocitos, cuyos anticuerpos pueden provocar falsas reacciones, etc. Se observó que a medida que aumenta la sensibilidad de la prueba, existe una tendencia a aumentar el número de reacciones falsas positivas.

En la práctica, a esto también se suman los resultados falsos negativos y falsos positivos, que surgen debido a errores humanos, deterioro de la calidad de los sistemas de prueba debido al transporte y almacenamiento inadecuado. Por lo tanto, junto con la especificidad y la sensibilidad determinadas en el laboratorio, estos parámetros a veces se determinan en las llamadas condiciones de campo, es decir, en entornos prácticos de atención médica. Como regla general, la especificidad y la sensibilidad determinadas en las condiciones de "campo", debido a las razones anteriores, son más bajas que las de laboratorio. Incluso factores como la calidad del agua utilizada para lavar el material de vidrio del laboratorio, etc., pueden afectar los resultados del uso de los sistemas de prueba.

Muy a menudo, los anticuerpos contra el VIH se detectan mediante métodos ELISA. No existen diferencias fundamentales en numerosos sistemas de prueba comerciales para ELISA en fase sólida, aunque pueden diferir significativamente en sensibilidad y especificidad. Muy a menudo sucede que los mismos sueros dan resultados diferentes cuando se utilizan diferentes sistemas de prueba. A este respecto, se reconoce que un resultado positivo de un estudio en un sistema de prueba no puede considerarse un resultado incondicionalmente positivo.

Se han propuesto y utilizado varios métodos para probar la especificidad de los resultados de detección de anticuerpos. Entre estos métodos, la reacción de inmunotransferencia más utilizada ("inmunotransferencia" en la modificación de Western Blot. En este hermoso nombre "científico", "transferencia" probablemente se traduzca como "transferencia" y "occidental" como "occidental", que refleja la dirección de distribución de esta "mancha" en el papel de izquierda a derecha, es decir, en un mapa geográfico, esto corresponde a la dirección de oeste a este). La esencia del método de inmunotransferencia es que la reacción inmunoabsorbente ligada a enzimas no se lleva a cabo con una mezcla de antígenos, sino con antígenos del VIH, previamente distribuidos por inmunoforesis en fracciones ubicadas de acuerdo con el peso molecular en la superficie de la membrana de nitrocelulosa. . Como resultado, las principales proteínas del VIH, portadoras de determinantes antigénicos, se distribuyen sobre la superficie en forma de bandas separadas, que aparecen durante el inmunoensayo enzimático.

Los sueros de pacientes infectados con VIH-1 detectan anticuerpos contra las siguientes proteínas y glicoproteínas principales: proteínas de envoltura estructural (env) - gpl60, gpl20, gp41, núcleos (gag) - pi7, p24, p55, así como enzimas virales ( pol) - p31, p51, p66. Para el VIH-2, los anticuerpos contra env son típicos: gpl40, gpl05, gp36, gag - pl6, p25, p56, pol - p68.

Entre los métodos de laboratorio necesarios para establecer la especificidad de la reacción, la detección de anticuerpos contra las proteínas de la cubierta del VIH-1 (gp41, gpl20, gpl60) y VIH-2 (gp36, gpl05, gpl40) ha recibido el mayor reconocimiento. Sin embargo, incluso aquí hay algunas diferencias entre las opiniones de los grupos de investigación individuales.

Por lo tanto, la OMS considera sueros positivos en los que se detectan anticuerpos contra cualquiera de las dos glicoproteínas del VIH mediante inmunotransferencia. De acuerdo con estas recomendaciones, si se produce una reacción con una sola de las proteínas de la envoltura (gp 160, gp 120, gp 41) en combinación con una reacción con otras proteínas o sin ella, el resultado se considera dudoso y se realiza una segunda prueba con un Se recomienda un kit de una serie diferente o de otra empresa. Si después de esto el resultado sigue siendo dudoso, se recomienda la observación durante 6 meses (investigación después de 3 meses).

En nuestra opinión, es aceptable interpretar los resultados como positivos incluso en presencia de anticuerpos contra una sola proteína de la cubierta, especialmente cuando se trata del examen en focos de infección por VIH. Es bastante obvio que cuando se trata del suero de un niño que estaba en el foco nosocomial de la infección por el VIH, o de un receptor de sangre de un donante seropositivo, o de una pareja sexual de una persona infectada por el VIH, la importancia diagnóstica de un positivo la reacción aumenta dramáticamente. Aquí, una vez más, nos gustaría llamar la atención del lector sobre el hecho de que el diagnóstico de infección por VIH se establece no sobre la base de los resultados de las pruebas de laboratorio, sino comparándolos con datos clínicos y epidemiológicos. Por lo tanto, fue en Elista que durante la investigación epidemiológica de un brote nosocomial, observamos alrededor de 10 casos en los que, en niños infectados, se observaron inicialmente anticuerpos contra una sola glicoproteína env en la reacción de inmunotransferencia.

La presencia de una reacción positiva con el antígeno p24 puede indicar un período de seroconversión, ya que a veces aparecen primero los anticuerpos contra esta proteína. En este caso, se recomienda, dependiendo de los datos clínicos y epidemiológicos, repetir el estudio con una muestra de suero tomada no antes de las 2 semanas, y esto es exactamente lo que ocurre cuando se necesitan sueros pareados en la infección por el VIH.

Las reacciones positivas con las proteínas gag y pol sin una reacción con las proteínas env pueden reflejar la etapa de seroconversión temprana y también pueden indicar infección por VIH-2 o una reacción no específica. Las personas con tales resultados después de la prueba del VIH-2 se vuelven a examinar después de 3 meses (dentro de los 6 meses). Si, después de 6 meses, se obtienen nuevamente resultados indeterminados (sin reacción con las proteínas env del VIH-1 y VIH-2), y no se identifican los factores de riesgo y los síntomas clínicos de inmunodeficiencia, generalmente se concluye una reacción inespecífica de inmunotransferencia. . Se cree que en el caso de una verdadera infección por VIH, generalmente después de varios meses de monitorear el espectro de anticuerpos, se determina una tendencia positiva, es decir, la aparición de anticuerpos frente a otras estructuras del VIH, y sobre la nitrocelulosa en la reacción de inmunoblotting, se observa la aparición de bandas faltantes para el diagnóstico. Por el contrario, en el caso de una reacción falsa, los resultados del inmunoblot quedan indeterminados o se vuelven negativos, es decir, desaparecen las bandas "sospechosas".

La eficacia del diagnóstico de la infección por el VIH mediante la detección de anticuerpos en la sangre se ve reducida por el hecho de que los anticuerpos contra el VIH pueden no detectarse en los primeros meses de la infección o en la etapa terminal de la enfermedad y, por el contrario, pueden detectarse en los primeros meses de vida en niños no infectados nacidos de madres infectadas por el VIH.

Dado que los niños tienen anticuerpos contra el VIH, en este caso la reacción no puede llamarse un falso positivo. Por un lado, durante el 1.er año de vida, los anticuerpos maternos circulan en el suero sanguíneo de un niño y, por tanto, la detección de anticuerpos contra el VIH en niños del 1.er año de vida no es base suficiente para realizar un diagnóstico de infección por VIH Por otro lado, dado que la infección por VIH en el período neonatal puede inducir hipo y agammaglobulinemia, la desaparición de anticuerpos no puede considerarse motivo suficiente para descartar el diagnóstico de infección por VIH. En este sentido, los niños nacidos de madres infectadas por el VIH deben haber sido observados clínicamente durante al menos 36 meses después del nacimiento. Con la llegada de nuevos métodos de diagnóstico, existe una tendencia a reducir el período de observación. La detección de antígenos del VIH o secuencias de nucleótidos virales en tales niños puede confirmar el diagnóstico de infección por VIH en un momento anterior, pero los resultados negativos de dichos estudios no lo rechazan por completo (ver más abajo). Después de todo el período de observación, la cuestión de si el niño tiene infección por VIH se decide sobre la base de un análisis de un conjunto de datos clínicos, inmunológicos y serológicos.

La desventaja de los sistemas de inmunoensayo enzimático más comunes actualmente es la necesidad de utilizar equipos especiales para evaluar los resultados de la reacción: espectrofotómetros con accesorios, que pueden incluir computadoras con programas especiales de cálculo, etc., lo que aumenta significativamente el costo de la investigación y dificulta el investigador depende de muchas condiciones, incluyendo locales especiales, electricidad y suministro de agua.

El uso del método de inmunotransferencia está severamente limitado por su alto costo.

La inmunotransferencia, contrariamente a la creencia popular, es menos sensible que el ELISA en fase sólida. Por lo tanto, en algunos países, se permite el diagnóstico serológico después de la detección de anticuerpos contra el VIH utilizando varios kits de prueba para ELISA en fase sólida, que difieren en la composición de los antígenos. La eficacia del método de inmunotransferencia reduce la detección de un número suficientemente grande de resultados no interpretables o indeterminados.

Teóricamente, el método de detección de anticuerpos contra el VIH en la saliva simplifica el diagnóstico, que actualmente tiene una sensibilidad cercana al método para detectar anticuerpos en la sangre, pero hasta ahora es significativamente inferior en especificidad, es decir. da más falsos positivos.

Para estudios de "campo", actualmente se ofrecen todo tipo de versiones simplificadas de sistemas de prueba para la detección de anticuerpos contra el VIH. Su sensibilidad y especificidad pueden variar considerablemente.

En Rusia, en la actualidad, el procedimiento estándar para el diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH es la detección de anticuerpos contra el VIH con la subsiguiente confirmación de su especificidad en inmunotransferencia.

La detección de anticuerpos contra el VIH implica 2 pasos. En la primera etapa, el espectro total de anticuerpos contra los antígenos del VIH se detecta mediante varias pruebas: inmunoensayo enzimático, aglutinación, combinado, peine, filtración por membrana o difusión por membrana. En la segunda etapa, se utiliza el método de inmunotransferencia para determinar anticuerpos contra proteínas individuales del virus. En el trabajo, está permitido usar solo sistemas de prueba aprobados para su uso por el Ministerio de Salud de Rusia. Los procedimientos de diagnóstico solo deben llevarse a cabo de acuerdo con las instrucciones aprobadas para el uso de las pruebas apropiadas.

Se extrae sangre de la vena cubital en un tubo de ensayo limpio y seco en una cantidad de 3-5 ml. Los recién nacidos pueden extraer sangre de la vena umbilical. No se recomienda conservar el material obtenido (sangre entera) más de 12 horas a temperatura ambiente y más de 1 día en nevera a 4-8 °C, ya que la aparición de hemólisis puede afectar a los resultados de los análisis. El suero se separa por centrifugación o frotando la sangre a lo largo de la pared del tubo de ensayo con una pipeta Pasteur o una varilla de vidrio. El suero separado se transfiere a un tubo de ensayo, vial o recipiente de plástico limpio (preferiblemente estéril), y de esta forma se puede almacenar hasta 7 días a 4-8 °C. Al trabajar, debe seguir las normas de seguridad.

Al recibir el primer resultado positivo, el análisis se realiza 2 veces más (con el mismo suero y en el mismo sistema de prueba).

Si se obtiene al menos un resultado positivo más (2 resultados positivos de 3 pruebas ELISA), el suero se examina en otro sistema de prueba para determinar los anticuerpos totales contra el VIH.

Suero principalmente positivo, i.e. que dio 2 resultados positivos en el primer sistema de prueba, se vuelve a examinar en ELISA en el segundo (otro) sistema de prueba seleccionado para confirmación.

Cuando se obtiene un resultado positivo en la prueba y en el segundo sistema de prueba, el suero debe analizarse en la reacción de inmunotransferencia. Si se obtiene un resultado negativo en el segundo sistema de prueba, el suero se vuelve a examinar en el tercer sistema de prueba.

Si se obtiene un resultado negativo tanto en el segundo como en el tercer sistema de prueba, se emite una conclusión de que no hay anticuerpos contra el VIH.

Si se obtiene un resultado positivo en el tercer sistema de prueba, el suero también debe enviarse para análisis de inmunotransferencia.

Los resultados de la inmunotransferencia se interpretan como positivos, indeterminados y negativos.

Las muestras se consideran positivas (positivas) en las que se detectan anticuerpos contra dos o tres glicoproteínas del VIH, negativas (negativas): sueros en los que no se detectan anticuerpos contra ninguno de los antígenos (proteínas) del VIH. Las muestras que detectan anticuerpos contra una sola glicoproteína del VIH y/o cualquiera de las proteínas del VIH se consideran sospechosas (indeterminadas o no interpretables).

Si se obtiene un resultado indeterminado con anticuerpos contra las proteínas centrales (gag) en el inmunoblot con antígenos del VIH-1, se realiza una prueba con antígenos del VIH-2.

Al recibir los resultados positivos de la inmunotransferencia, se llega a una conclusión sobre la presencia de anticuerpos contra el VIH en el material de prueba.

Al recibir un resultado negativo en la prueba de inmunotransferencia, se emite una conclusión de que no hay anticuerpos contra el VIH.

Si se obtiene un resultado indeterminado, se realizan pruebas repetidas de anticuerpos contra el VIH a los 3 meses y si persisten los resultados indeterminados, a los 6 meses.

Si a los 6 meses se vuelven a obtener resultados indeterminados, y el paciente no presenta factores de riesgo de infección y clínica de infección por VIH, el resultado se considera falso positivo. En presencia de indicaciones epidemiológicas y clínicas, se repiten los estudios serológicos.

Una característica del serodiagnóstico de la infección por VIH en niños nacidos de madres infectadas por el VIH es que tanto los niños infectados como los no infectados en los primeros 6 a 12 meses de vida tienen anticuerpos contra el VIH de origen materno, que luego pueden desaparecer. El criterio que indica la presencia de infección por VIH en un niño es la detección de anticuerpos contra el VIH a la edad de 18 meses o más. La ausencia de anticuerpos contra el VIH en un niño de 18 meses nacido de una madre infectada por el VIH es un criterio contra la presencia de la infección por el VIH.

Con fines de diagnóstico, también se utilizan métodos para detectar el virus, sus antígenos o material genético (secuencias de nucleótidos específicas).

Entre los antígenos del VIH, la mayoría de las veces intentan detectar la proteína p24 del VIH-1, pero esta técnica no ha sido ampliamente utilizada en estudios epidemiológicos, ya que la mayor parte del antígeno no se une a los anticuerpos solo en el período inicial de la enfermedad y durante el desarrollo de inmunodeficiencia clínicamente pronunciada. En este sentido, el método es de interés para identificar pacientes en las primeras etapas de la infección por VIH y, en ocasiones, para evaluar la progresión de la enfermedad (ver más abajo). La detección de este antígeno en un niño nacido de madre infectada por el VIH puede servir como criterio para establecer un diagnóstico de infección por el VIH en él. Sin embargo, es posible que se puedan desarrollar modificaciones del método para expandir su aplicación diagnóstica.

El aislamiento y la identificación del cultivo de VIH es un signo confiable de infección por VIH, sin embargo, este método es inaccesible, requiere mucho tiempo, artistas altamente calificados y equipo especial. Por lo tanto, el aislamiento del virus y su identificación se realizan únicamente con fines científicos. Los métodos modernos hacen posible aislar el VIH en la gran mayoría de los casos o incluso en todos los casos de verdadera infección por VIH, a menos, por supuesto, que los investigadores tengan las habilidades adecuadas, sean persistentes (intenten repetidamente aislar el VIH) y cuenten con grandes fondos que brindar la oportunidad de utilizar un laboratorio virológico especial equipado con tecnología y reactivos modernos. La última condición, sin embargo, limita significativamente el uso de este enfoque y, por lo general, se usa solo para fines científicos limitados.

Debe recordarse que los resultados negativos de un solo intento de aislar el VIH no tienen importancia práctica, ya que tales intentos de aislar el VIH solo tienen éxito en la mitad de los casos. El informe del laboratorio de que se ha aislado el VIH tiene mayor valor diagnóstico, sin embargo, todos los laboratorios concluyen que es el VIH el que se ha aislado sobre la base de sus pruebas de detección, y el médico puede evaluar la exactitud de esta prueba solo por la grado de su confianza en este laboratorio virológico. Hemos señalado repetidamente que algunos virólogos supuestamente pudieron aislar el VIH de materiales que no tienen nada que ver con personas infectadas por el VIH, por ejemplo, de materiales obtenidos de pacientes con varicela o paperas, o incluso de personas sanas (más correctamente, no infectadas con VIH) personas.

Otro problema importante es que la identificación del virus lleva un tiempo relativamente largo.

Finalmente, en los últimos años, el método de detección de material genético del VIH se ha vuelto muy popular mediante métodos de replicación (amplificación, reproducción) de secuencias genéticas específicas, a menudo combinadas bajo el nombre de una de las variantes de este método: "reacción en cadena de la polimerasa". . Como se muestra de manera convincente en una revisión de la literatura sobre el desarrollo de este método de diagnóstico para la infección por VIH, la sensibilidad de las modificaciones de PCR conocidas para diagnosticar la infección por VIH es solo del 98%, es decir, detectan solo el 98 % de las muestras de personas infectadas por el VIH, lo que es significativamente menor que cuando se utiliza ELISA (hasta el 99,9 %). En otras palabras, estas modificaciones en 1998 solo pudieron detectar 980 personas infectadas de 1000, y no 999, como ELISA. Por esta razón, tampoco pueden usarse como pruebas de confirmación, ya que obviamente producirán más resultados falsos negativos que el inmunoblot. Uno solo puede estar en desacuerdo con A.G. Shipulin et al., quienes atribuyen a su reacción “favorita” una especificidad cercana al 100%, aunque en realidad esta reacción se comporta en la práctica como demasiado sensible a las fluctuaciones externas y en manos ineptas y en laboratorios insuficientemente equipados da una cantidad considerable de reacciones no específicas. (falsos positivos) resultados. La especificidad de la PCR también depende de la selección de los ingredientes utilizados en ella, en particular los llamados cebadores, que deben imitar las secuencias del gen del VIH, pero no siempre pueden coincidir con precisión. Una mala selección puede conducir, en particular, al hecho de que dichas pruebas pueden detectar diferentes subtipos de VIH-1 con diferente éxito, por ejemplo, detectar el subtipo B y no detectar los subtipos A y G, etc. Sin embargo, el desarrollo de estos métodos avanza a un ritmo rápido y es posible que pronto aparezcan conjuntos de reactivos estándar de mejor calidad. En la práctica, los médicos deben tener en cuenta las características operativas de las pruebas diagnósticas que ofrecen, asumiendo inicialmente que su valor práctico puede ser significativamente inferior al declarado por los fabricantes.

La ventaja teórica de la PCR es que es capaz de detectar la infección por VIH en los períodos de incubación y clínicos tempranos, cuando es posible que los anticuerpos aún no estén presentes. Sin embargo, no siempre es capaz de detectar la infección en periodos posteriores. Esto también puede ser importante en el futuro al tratar de diagnosticar la infección por VIH en personas que reciben terapia antirretroviral, cuando el nivel de VIH en la sangre se reduce significativamente. El uso conjunto de dos métodos, ELISA y PCR, que podría ser una salida a esta situación, lamentablemente encarecerá mucho la investigación, especialmente si se lleva a cabo a gran escala.

En la actualidad, los sistemas de prueba para la detección de material genético del VIH están aprobados para su uso en Rusia. Estos sistemas de prueba pueden dar reacciones positivas a la presencia de marcadores de VIH en las primeras etapas de la infección por VIH. Si bien la experiencia de su uso no puede considerarse lo suficientemente grande, recomendamos adherirse a las siguientes tácticas para su uso. Si se encuentran resultados positivos de la prueba para la infección por VIH en sistemas de prueba de este tipo, se debe realizar un examen de anticuerpos contra el VIH. Si se detectan anticuerpos, se deben seguir las tácticas de diagnóstico estándar. Si los resultados de la prueba son positivos para marcadores genéticos o antigénicos del VIH y los resultados de la prueba son negativos para anticuerpos contra el VIH, las pruebas para anticuerpos contra el VIH deben repetirse después de 3 y 6 meses.

Hasta ahora, el método de amplificación se ha utilizado con relativo éxito solo para diagnosticar la infección por VIH en niños nacidos de madres infectadas por el VIH. Como se sabe, el diagnóstico de la infección por VIH en ellos se ve dificultado por la presencia de anticuerpos maternos contra el VIH en la sangre en el primer año de vida, tanto en niños sanos como infectados. Pero aquí también, el uso de métodos de ingeniería genética tiene un valor limitado. Según los datos modernos, un resultado positivo de determinar el material genético del VIH en un niño en el primer mes de vida realmente indica infección por VIH con una probabilidad del 50-95%, y un resultado negativo con una probabilidad del 3-10% indica la ausencia de infección por VIH. Así, resulta que un niño menor de 1 mes con una PCR positiva probablemente esté infectado, y un niño con una reacción negativa muy probablemente no esté infectado. Los estudios repetidos del material del niño, realizados después de 1 o 2 meses, si su resultado coincide con el primero, aumentan la precisión del diagnóstico, pero no brindan una certeza absoluta. Un resultado de PCR positivo obtenido con más de 4 meses de edad (más cerca de los 6 meses) tiene mayor valor diagnóstico, principalmente porque la concentración de VIH aumenta en este momento. En nuestra opinión, el contenido de información de los resultados de esta reacción en las primeras etapas puede verse influenciado por la vía de infección del niño (in utero, perinatal o durante la lactancia), lo que naturalmente determina la duración de la infección. Es bastante natural que en los niños que se infectan a través de la lactancia, es probable que los resultados de la PCR en los primeros días de vida sean negativos. Por lo tanto, parece que el uso de PCR para detectar la infección por VIH en niños tampoco es todavía un método fiable para el diagnóstico precoz y puede que no sea de gran utilidad en el futuro. Creemos que todos los niños nacidos de madres infectadas por el VIH deben tomar medidas preventivas, como la quimioprofilaxis del VIH, y más aún, es necesario cancelar la lactancia, independientemente de los resultados preliminares de la PCR. Los especialistas de los EE. UU. recomiendan el uso de terapia antirretroviral (preventiva) para la prevención de la infección por VIH en niños recién nacidos de madres infectadas por el VIH sin referencia especial a los resultados de los diagnósticos de PCR. Es probable que la quimioprevención antirretroviral de la infección por VIH pueda afectar la efectividad del diagnóstico, ya que naturalmente puede reducir la concentración de VIH a un nivel indetectable. Esto significa que en personas que reciben medicamentos antirretrovirales para prevenir la infección, el diagnóstico final por PCR debe realizarse solo después del final de los medicamentos.

Sin embargo, las reacciones de tipo PCR ya han encontrado su lugar en el diagnóstico de la infección por VIH. Ahora se utilizan con éxito para predecir el curso de la enfermedad y evaluar la efectividad de la terapia, para determinar los indicadores cuantitativos de la presencia de VIH en fluidos biológicos, que discutiremos con más detalle en los siguientes capítulos.

Con la infección por VIH, tales cambios inespecíficos en los parámetros de laboratorio como una disminución en el nivel de linfocitos CD4, un aumento en el porcentaje de linfocitos CD8, un aumento en el nivel de microglobulina P2, neopterina, un aumento en el número de inmunoglobulinas , etc.. La detección de estos signos es una evidencia adicional a favor del diagnóstico de infecciones por VIH. Sin embargo, estos cambios pueden estar ausentes en ciertas etapas de la infección por VIH (ver más abajo), tener fluctuaciones individuales en diferentes pacientes y ocurrir en otras enfermedades.

Como ya hemos destacado, el diagnóstico de la infección por el VIH incluye 2 etapas sucesivas que tienen objetivos independientes:

• 1. Establecer el diagnóstico real de infección por VIH, es decir, determinar el estado de la infección por el VIH.
• 2. Establecer un diagnóstico clínico, es decir, determinación de la etapa y la naturaleza del curso de la infección por VIH.

La determinación oportuna del estado de la infección por el VIH es de gran importancia para las medidas antiepidémicas y tiene importantes consecuencias legales y sociales. Incluso ante la más mínima sospecha de infección por VIH, a menudo es necesario tomar algunas medidas urgentes para prevenir la posible propagación del VIH, por ejemplo, excluir la transfusión de sangre sospechosa. Si se encuentra una persona infectada con el VIH, se la retira de la donación y se le somete a asesoramiento, lo que puede reducir la propagación del VIH. La investigación epidemiológica que se realiza cuando se detecta permite identificar vías de transmisión del VIH, que en algunos casos (por ejemplo, en brotes nosocomiales) pueden interrumpirse rápidamente. La investigación epidemiológica identifica otras fuentes de infección, así como individuos en riesgo de infección.

El establecimiento de un diagnóstico clínico se lleva a cabo con el fin de brindar una atención médica adecuada a la condición del paciente. Esta asistencia debe incluir no solo terapia farmacológica, sino también apoyo psicológico. Este último evento también tiene algún significado contra la epidemia.

Independientemente del propósito, el diagnóstico de la infección por VIH se lleva a cabo mediante una evaluación integral de los datos del examen clínico, los resultados de una investigación epidemiológica y pruebas de laboratorio.

Al mismo tiempo, en el primer tiempo tras la sospecha de la presencia de la infección por el VIH, tanto el infectólogo como el epidemiólogo pueden simplemente no disponer de datos suficientes para realizar un diagnóstico definitivo. Los resultados de todos los estudios de laboratorio pueden estar disponibles solo después de unas pocas semanas, y es posible que nunca se obtengan datos epidemiológicos completos. Muy a menudo, los profesionales experimentados tienen dudas sobre el valor o la fiabilidad del diagnóstico de laboratorio de la infección por el VIH. A veces, se debe tomar una decisión de diagnóstico incluso en ausencia de la posibilidad de un examen clínico, por no mencionar la posibilidad de un examen clínico completo.