Tes darah dengan metode ifa. ELISA: jenis penelitian apa, kapan dan bagaimana dilakukan, dan apa yang ditunjukkannya? Persiapan untuk analisis

Ketika analisis ditentukan, ikuti tes ELISA untuk sifilis. Metode diagnostik laboratorium. Hasil analisis - cara menentukan tingkat dan penyimpangan. Biaya enzim immunoassay.

Sebagai aturan, terus-menerus ketika menghubungi klinik, dokter diminta untuk melakukan berbagai tes. Ini memungkinkan mereka untuk mengidentifikasi infeksi dan penyakit yang diderita seseorang. ELISA atau apa yang disebut enzyme-linked immunosorbent assay adalah cara terbaik untuk menilai sistem kekebalan tubuh, dan untuk mengidentifikasi infeksi dan tahap penyakit dengan adanya antibodi.

Jadi, siapa yang ditugaskan untuk mengikuti tes ini dan apa itu enzim immunoassay? Dokter meresepkan tes ini jika seseorang memiliki penyakit berikut:

• Ruam pada tubuh - reaksi alergi.
• Virus - herpes, cytomegalavirus.
• Penyakit menular seksual - sipilis, Trichomonas.
• Patologi terkait dengan kanker.
• Neurosifilis.

Selain penyakit-penyakit yang terdaftar, analisis ditentukan untuk menentukan tingkat hormon dalam darah. Berdasarkan hasil, kualitas terapi dinilai. Mungkin setiap orang tahu apa itu sifilis, tetapi ia tidak mewakili skalanya, dan berapa banyak orang yang terinfeksi berjalan di sebelah kami.

Sifilis saat ini adalah penyakit yang paling umum. Ini adalah treponoma yang mempengaruhi tubuh manusia. Dan sebagai hasilnya, semua organ internal pasien terpengaruh.

Ini adalah infeksi yang sangat berbahaya, dan sering terjadi bahwa itu mungkin tidak memanifestasikan dirinya untuk waktu yang lama. Karena itu, seseorang dapat menjadi pembawa dan distributor untuk waktu yang lama, tidak tahu bahwa dia sakit.

Metode diagnostik laboratorium

Kedokteran tidak tinggal diam, analisis modern mulai berbeda secara signifikan dari metode lama mempelajari tubuh. Meskipun mereka menjalankan peran mereka dengan sempurna, kadang-kadang Anda harus menunggu hasilnya selama berminggu-minggu atau berbulan-bulan. Ini tentu saja tidak bermanfaat bagi orang yang terinfeksi. Apa yang diharapkan dari hasilnya, orang yang sakit meninggal dunia.

Analisis klasik - deteksi sifilis dengan metode Wasserman, metode Kahn mulai melepaskan posisi mereka dan tes-tes seperti ELISA datang untuk menggantikan.

Ini adalah metode paling modern untuk mendeteksi infeksi pada manusia. Hasilnya didekripsi menggunakan komputer. Ini memungkinkan Anda untuk lebih akurat menentukan tes positif atau negatif.

Baca juga tentang topik tersebut

Apa itu IMS? Gejala, pengobatan

Selama dekripsi, pencarian dilakukan untuk antibodi terhadap penyakit tertentu. Dan sebagai hasil analisis, adalah mungkin untuk mengidentifikasi infeksi ketika hasilnya positif. Menggunakan ELISA untuk mendeteksi sifilis menyiratkan penggunaan imunoglobulin tiga tingkat:

• G, M, A - adalah yang paling penting untuk diagnostik.
• Mereka diproduksi pada orang yang terinfeksi dalam urutan yang ditentukan secara ketat.
• Tahap infeksi dengan cepat ditentukan.

Hasil ELISA - normal dan positif

Jika berbicara tentang tes ELISA untuk sifilis, maka dalam hal ini sulit untuk mengatakan bahwa ada norma atau penyimpangan. Hasilnya biasanya negatif atau positif. Selain itu, ada titer yang menentukan jumlah antibodi dalam darah.

Ada banyak seluk-beluk dalam mendekode analisis, jika itu menunjukkan hasil positif, analisis masih harus diulang beberapa kali untuk mengecualikan metode reaksi positif palsu.

Seperti yang sudah ditulis, ada banyak seluk-beluk ketika decoding analisis, dan hanya dokter yang hadir dapat menentukan hasilnya. Kami memberikan contoh dalam tabel, yang hasilnya dapat ditunjukkan untuk enzim immunoassay:

Jangan putus asa jika tes menunjukkan hasil positif. Sebagai aturan, tes dan tes tambahan dilakukan, dalam berbagai cara, untuk diagnosis yang lebih akurat.

Biaya enzim immunoassay

Sebagai aturan, biaya analisis ini secara langsung tergantung pada analisis itu sendiri dan identifikasi infeksi tertentu. Penentuan penanda untuk infeksi berbagai jenis biayanya 200 hingga 350 rubel. Dan analisis semacam itu dilakukan dalam dua hari.

ELISA adalah metode paling populer dan modern untuk mendiagnosis suatu organisme. Metode ini telah menunjukkan keefektifannya dalam mendeteksi infeksi, dan menentukan waktu infeksi yang tepat.

Mempertimbangkan kebijakan penetapan harga, kita dapat mengatakan bahwa analisis tersedia untuk semua orang dengan anggaran berapapun. Hal ini memungkinkan dokter yang merawat untuk mendapatkan gambaran lengkap dari infeksi seseorang. Dia menunjukkan dirinya dalam aksi dan tidak mengecewakan para dokter. Pada saat yang sama, setelah menerima analisis, dokter yang hadir dapat bereaksi dengan cepat, meresepkan perawatan tepat waktu.

Perkembangan kedokteran modern dalam dunia diagnostik tidak pernah berhenti memukau dengan pencapaiannya, dan sekarang dokter tidak perlu membuat asumsi tentang kemungkinan diagnosis, hanya mengandalkan tanda-tanda tidak langsung. Penciptaan dan pengenalan ke dalam dunia penelitian laboratorium dari uji immunosorbent terkait-enzim (ELISA) memungkinkan Anda untuk dengan cepat dan akurat menentukan tidak hanya keberadaan patogen, tetapi juga banyak karakteristik penyakit lainnya.

Sejarah penciptaan dan pengembangan IFA

Metode tes darah ini mulai digunakan dalam pengobatan praktis pada pertengahan abad terakhir - di suatu tempat di tahun 60an. Awalnya, tujuannya adalah penelitian ilmiah di bidang histologi, yang terbatas pada pencarian dan studi struktur antigenik seluler spesies biologis. Tes darah dengan metode ELISA didasarkan pada interaksi antigen terkait (AG) dan antibodi spesifik (AT), dengan pembentukan kompleks "antigen-antibodi", yang ditentukan oleh enzim.

Fenomena ini mendorong para ilmuwan untuk memutuskan bahwa metode ini dapat digunakan untuk mengenali senyawa protein dari berbagai kelas yang terbentuk dalam serum darah ketika patogen memasuki tubuh. Karena keterlibatan langsung mereka dalam fungsi sistem kekebalan tubuh, senyawa-senyawa ini disebut imunoglobulin (Ig, Ig), dan penemuan ini adalah terobosan terbesar dalam diagnostik laboratorium.

Pada saat yang sama, metode yang sangat sensitif ini mulai digunakan secara aktif hanya pada tahun 80-an, dan hanya tersedia di lembaga medis yang sangat khusus. Yang pertama mampu menggunakan enzim immunoassay analyzer di stasiun dan pusat transfusi darah, kelamin dan lembaga medis infeksius. Ini karena penyebaran cepat "wabah abad ke-20" - AIDS, dan tindakan diagnostik dan terapeutik yang mendesak diperlukan.

Kemungkinan teknik

Bidang penerapan tes darah untuk ELISA cukup luas - saat ini tidak mungkin untuk membayangkan betapa rumitnya pencarian penyebab banyak penyakit. Penelitian semacam itu sekarang digunakan di hampir semua bidang medis, bahkan dalam onkologi. Meskipun sulit bagi yang kurang informasi untuk memahami, dalam beberapa kasus, setelah melakukannya, adalah mungkin untuk menyelamatkan nyawa pasien, setelah menemukan tumor pada tahap awal.

Penting! ELISA adalah tes darah yang menunjukkan tanda-tanda karakteristik dari beberapa proses ganas, yang memungkinkan untuk mendeteksi penyakit pada tahap waktu ketika itu di luar kendali metode lain.

Di pusat diagnostik modern, pemeriksaan laboratorium disajikan tidak hanya oleh penanda tumor - mereka dilengkapi dengan gudang panel yang mengesankan untuk melaksanakan diagnosis ini. Dengan bantuan mereka, adalah mungkin untuk menentukan banyak kondisi patologis, seperti kelainan hormon dan proses infeksi dari berbagai asal.

Selain itu, melakukan dan mendekode tes darah ELISA akan memungkinkan untuk melacak efek obat pada tubuh orang yang sakit dan bahkan hewan. Yang terakhir ini banyak digunakan di klinik hewan, membantu menjaga kesehatan hewan peliharaan atau pencari nafkah kita, menyediakan pasokan daging, produk susu, dan telur yang stabil, yang tidak tergantikan dalam makanan.

Jadi, sebagai hasil dari mengambil hanya beberapa mililiter darah vena dan diagnosisnya menggunakan metode ELISA, dokter, setelah menggambarkan bahan penelitian, akan dapat menentukan:

• keadaan hormonal, termasuk zat aktif biologis dari kelenjar dan kelenjar tiroid, serta kelenjar adrenalin;
• adanya infeksi bakteri dan virus (hepatitis B dan C, sifilis, herpes, klamidia, tuberkulosis, myco- dan ureaplasmosis, HIV, TORCH) dan penyakit lain yang bersifat ini;
• tanda-tanda aktivitas vital patogen dari proses patologis, yang berakhir pada pemulihan dan masuk ke tahap pembentukan antibodi (respon imun).

Kompleks seperti itu jauh lebih mudah dikenali dan dihilangkan oleh sel-sel imun. Efek residu dalam bentuk antibodi dalam banyak kasus terkandung dalam darah seumur hidup, yang secara praktis mengurangi risiko infeksi ulang menjadi nol.

Varietas imunoglobulin

Ada beberapa jenis antibodi, dan masing-masingnya terlibat dalam proses respons imun pada tahap tertentu. Misalnya, imunoglobulin kelas M (IgM) adalah yang pertama dibentuk sebagai respons terhadap masuknya hipertensi ke dalam tubuh. Angka tertinggi diamati pada hari-hari pertama penyakit.

Jenis imunoglobulin yang digunakan dalam ELISA

Kemudian sistem kekebalan meluncurkan Ig G kelas (IgG) ke dalam plasma, yang bertanggung jawab atas penghancuran total antigen dan pemulihan pasien. Kemudian, mereka terus berada di dalam darah, sehingga mempersiapkan kekebalan untuk serangan berulang dari patogen yang identik. Beginilah cara vaksinasi bekerja. Dengan diperkenalkannya antigen mikroorganisme patologis yang melemah, banyak imunoglobulin muncul dan tetap beredar di plasma.

Objek utama yang menarik untuk diagnosa laboratorium adalah kelas Ig M, G dan A. Pada tingkat konsentrasi mereka, Anda dapat menentukan stadium penyakit dan mencari tahu penyakit menular apa yang dimiliki seseorang dalam hidupnya. Misalnya, Anda dapat memeriksa apakah ada riwayat cacar air atau rubella. Dokter, untuk mengetahui apakah tipe AT atau AH tertentu ada dalam tubuh pasien atau konsentrasi hormon apa pun, tidak perlu meresepkan beberapa pemeriksaan laboratorium - cukup dengan meresepkan rujukan untuk ELISA.

Inti dari teknik ini

Metodologi penelitian didasarkan pada beberapa opsi (langsung dan tidak langsung - kompetitif dan non-kompetitif) untuk melakukan tugas yang ditugaskan, masing-masing dirancang untuk tujuan tertentu. Pendekatan ini memungkinkan untuk pencarian yang ditargetkan, dan dalam waktu sesingkat mungkin untuk mengidentifikasi penyebab patologi tertentu. Untuk mendeteksi Ig dari berbagai kategori kelas, digunakan plat 96-well (panel polystyrene), dan protein rekombinan yang diserap ditempatkan di dalam sumurnya. Mereka memainkan peran antigen, dan pada tahap awal berada pada fase padat.

Ketika memasuki sumur dengan plasma darah, antigen atau antibodi mengidentifikasi objek sehubungan dengan orientasi mereka, dan membentuk kompleks (AG - AT). Formasi ini difiksasi oleh senyawa enzim (konjugat), yang kemudian akan memanifestasikan dirinya dengan perubahan pewarnaan sumur. ELISA diproduksi pada sistem pengujian khusus yang diproduksi di laboratorium khusus dan dilengkapi dengan set lengkap reagen.

Analisis ini dapat dilakukan pada pencuci - pencuci dan pembacaan spektrofotometer, tetapi mereka membutuhkan tenaga kerja manual. Tentu saja, beberapa kali lebih mudah dan lebih cepat bagi asisten laboratorium untuk melakukan semua manipulasi pada perangkat yang sepenuhnya otomatis. Saat menggunakannya, staf laboratorium dibebaskan dari sejumlah besar aktivitas monoton - mencuci, menanamkan, dan sisa rutinitas, tetapi tidak semua lembaga medis dapat membeli peralatan yang sedemikian mahal.

Oleh karena itu, banyak rumah sakit dan lembaga diagnostik terus melakukan ELISA dengan cara lama - pada perangkat semi otomatis.

Interpretasi bahan penelitian secara eksklusif adalah kompetensi spesialis diagnosis laboratorium - hanya dia yang bisa diberi tahu tentang rincian dan seluk beluk perjalanan penyakit. Dalam hal ini, dokter harus memperhitungkan kemungkinan mendapatkan tanggapan negatif palsu atau positif palsu.

Decoding bahan

Hasil immunoassay enzim berkualitas tinggi harus menjadi kesimpulan yang jelas apakah mikroorganisme yang diinginkan ditemukan atau tidak dalam sampel darah ini. Analisis kuantitatif akan menunjukkan tingkat konsentrasi dan dapat diekspresikan dalam dua cara - dengan nilai dalam jumlah atau dengan jumlah tanda "+".

Indikator yang dianalisis

Selama penelitian, dilakukan penelitian yang cermat terhadap imunoglobulin utama yang terlibat dalam respons imun, seperti:

• IgM - deteksi kelas ini berarti perkembangan bentuk akut dari penyakit menular. Hasil negatif dalam pencarian IgM dapat menjadi bukti tidak adanya patogen yang diinginkan, dan transisi penyakit menjadi perjalanan kronis.
• IgA - definisi kelas ini dengan tidak adanya IgM dalam banyak kasus adalah sinyal dari bentuk kronis atau laten perkembangan penyakit menular.
• IgM dan IgA (kehadiran simultan) - hasil positif untuk kedua spesies menunjukkan puncak bentuk patologi akut.
• IgG - keberadaannya menunjukkan transformasi penyakit menjadi bentuk kronis atau pemulihan dan pembentukan kekebalan terhadap agen yang ditentukan.

Munculnya dan akumulasi kelas IS tertentu terjadi pada tahap waktu yang berbeda. Jadi, misalnya, IgM muncul pertama kali, sekitar 5 hari setelah patogen menyerang. IG tetap dalam darah selama sekitar 5-6 minggu dan kemudian secara bertahap menghilang. Saat ini, mereka tersedia untuk penentuan oleh ELISA. Sekitar 3-4 minggu setelah timbulnya penyakit, IgG muncul, yang selanjutnya dapat tetap selama beberapa bulan. Tetapi mereka tidak selalu ditemukan dalam analisis.

IgA terbentuk dalam darah dalam periode 2-4 minggu, sementara 20% di antaranya terkandung dalam serum, dan 80% - dalam sekresi selaput lendir. Sebagai aturan, imunoglobulin ini hilang dalam 2-9 minggu, yang menunjukkan penghancuran patogen dan pemulihan pasien. Jika ELISA tetap menunjukkan keberadaan IgA, maka ini menandakan transisi proses ke bentuk kronis.

Opsi hasil analisis

Bergantung pada data yang diperoleh, jawaban ELISA dapat dikeluarkan pada formulir dalam bentuk tabel dengan daftar lengkap semua AT dan AG dan indikasi reaksi positif atau negatif. Dalam situasi tertentu, nilai kuantitatif akan ditampilkan - hasil positif tajam, positif, lemah positif atau negatif. Opsi kedua menunjukkan jumlah antibodi yang terkandung dalam sampel darah yang diteliti.

Opsi interpretasi bahan ELISA

Selain nilai-nilai di atas, parameter kuantitatif lain diselidiki dalam proses ELISA - indeks aviditas AT, dihitung sebagai persentase. Ini menunjukkan berapa lama penyakit berlangsung - yaitu, semakin tinggi indikator, semakin lama patologi berkembang.

Metode ELISA alternatif

Uji imunosorben terkait-enzim adalah diagnosis yang cukup terkenal dan umum. Mungkin beberapa belum pernah mendengarnya, tetapi ada versi lain dari penelitian ini yang bahkan kurang diketahui oleh banyak orang, di mana sampel non-darah diambil. Teknik ini disebut analisis kotoran untuk darah gaib, dan dalam banyak kasus memungkinkan Anda untuk menghindari prosedur melelahkan tambahan, yang juga disertai dengan sensasi yang tidak menyenangkan.

Tes ELISA untuk darah gaib (molekul hemoglobin) memungkinkan untuk mendeteksi pendarahan pada sistem pencernaan, bahkan tidak signifikan, tanda-tanda yang ada di tinja pasien, seperti yang mereka katakan, tidak dapat ditemukan dengan mata telanjang. Suatu uji imunosorben terkait-enzim pada tinja manusia dalam waktu singkat mampu menunjukkan penyakit tukak lambung, poliposis, divertikulosis, tumor yang tidak disertai dengan gejala tertentu pada tahap awal.

Sampai saat ini, ribuan varietas sistem uji enzim immunoassay telah dibuat, yang memberikan kesempatan untuk menemukan AT dan AG dari daftar besar patologi. Oleh karena itu, analisis ini digunakan di hampir semua cabang kedokteran, untuk semua kategori umur. Dan ketidakberdayaan mutlak memungkinkan Anda untuk menggunakannya selama kehamilan dan untuk diagnosis pasien yang lemah.

Daftar teknik diagnostik yang tersedia telah berkembang pesat dalam beberapa dekade terakhir, diagnostik mencoba untuk menggabungkan keuntungan dari semua analisis sebelumnya dalam metode baru, menyingkirkan semua kelemahan sebelumnya.

Baru-baru ini, semakin sering dalam daftar prosedur diagnostik, enzim immunoassay muncul - tes modern dan cukup baru, tentang yang sedikit diketahui orang biasa yang tidak terkait dengan obat-obatan. Namun demikian, teknik ini dengan cepat bergabung dengan jajaran pengikutnya di antara tenaga medis yang berkualitas. Apa itu dan dalam kasus apa itu harus digunakan, Anda dapat mencoba mencari tahu dengan membiasakan diri dengan fitur-fiturnya dan karakteristik utama.

Enzim immunoassay adalah teknik instrumental dan laboratorium berdasarkan reaksi molekuler "antigen-antibody", yang memungkinkan deteksi protein spesifik dalam bahan biologis (sampel untuk penelitian). Protein ini dapat berupa enzim, berbagai mikroorganisme (virus, bakteri, jamur), protozoa, dll.

Setelah penemuan metode ini, ia diberi nama tes ELISA, yang tidak ada hubungannya dengan nama para penemu, tetapi merupakan singkatan dari nama lengkap dalam versi bahasa Inggris - uji immunosorbent terkait-enzim. Dokter di seluruh dunia menggunakan nama ini, beberapa dokter di negara-negara berbahasa Rusia juga menyebut jenis penelitian ini.

Prinsip utama dari metode ini adalah reaksi molekuler "antigen-antibody".

Antigen adalah molekul asing yang memasuki tubuh manusia sebagai bagian dari mikroba patogen. Antigen biasanya molekul protein. Selain mikroorganisme, "orang asing" semacam itu dapat berupa sel-sel darah orang lain yang tidak cocok dengan kelompok atau faktor Rh.

Sebagai tanggapan terhadap masuknya antigen semacam itu di dalam tubuh, respons imun dipicu, yang bertujuan melindungi terhadap molekul asing. Ini disebabkan oleh sintesis agen khusus dari sistem kekebalan tubuh - antibodi (imunoglobulin). Setiap antibodi hanya cocok untuk antigen spesifik, dan menetralkan "orang asing" yang patogen dengan mengikatnya menjadi satu kompleks tunggal. Ini adalah proses pengikatan yang disebut reaksi "antigen-antibodi".

Jenis-jenis antibodi

Semua antibodi (imunoglobulin) dibagi menjadi 5 jenis tergantung pada tahap apa respon imun mereka muncul:

Untuk diagnosa ELISA, level imunoglobulin IgG, IgM dan IgA paling penting. Dengan kredit mereka, Anda dapat mengetahui apakah seseorang memiliki penyakit sebelum atau baru-baru ini menjadi terinfeksi, apakah ia telah mengembangkan kekebalan atau tubuhnya tidak berdaya melawan patologi.

Keuntungan dan kerugian enzim immunoassay

Saat ini, ELISA adalah salah satu metode yang paling akurat dan sensitif. Ini telah diadopsi oleh spesialis di berbagai bidang kedokteran dan terus memperluas aplikasinya.

Keuntungan metode

• Akurasi tinggi dari data yang diterima.
• Sensitivitas (memungkinkan Anda untuk mendeteksi zat yang diperlukan bahkan dengan kehadiran minimal patogen dalam sampel).
• Kemungkinan diagnosis pada hari-hari pertama sakit atau selama masa inkubasi.
• Kecepatan akuisisi data dibandingkan dengan teknik lain yang memiliki akurasi serupa.
• Otomatisasi proses yang tinggi dan partisipasi manusia yang minimal, yang mengurangi kesalahan pemain.
• Memperoleh data tentang tahap proses patologis dan efektivitas terapi yang dipilih.
• Tanpa rasa sakit dan invasif yang rendah dalam pemilihan material.

Kekurangan dari metode ini

• Dalam kebanyakan kasus, ini memungkinkan Anda untuk menentukan respons tubuh terhadap agen patogen, dan bukan patogen itu sendiri.
• Sebelum penelitian, penyakit yang dicurigai harus diketahui dengan tepat, karena tes ini sangat spesifik.
• Kemungkinan indikator palsu yang disebabkan oleh masalah teknis, minum obat, kehadiran simultan beberapa penyakit kronis atau gangguan metabolisme dalam tubuh pasien.
• Interpretasi hasil harus dilakukan hanya oleh spesialis yang berkualifikasi tinggi, karena untuk menafsirkan data yang diperoleh, perlu untuk memiliki pelatihan khusus dan stok besar pengetahuan medis di bidang tertentu.
• ELISA adalah analisis yang agak langka, oleh karena itu, ELISA tidak dilakukan di semua laboratorium diagnostik.
• Metode ini cukup mahal, karena selain reagen, laboratorium harus memiliki banyak peralatan mahal dan sampel antigen yang diproduksi di lembaga khusus.

Dalam kasus apa enzim immunoassay digunakan?

Daftar lengkap indikasi untuk pengangkatan enzim immunoassay sangat luas, mencakup hampir semua cabang kedokteran.

Paling sering, ELISA digunakan untuk tujuan berikut:

• identifikasi penyakit menular;
• diagnostik penyakit menular seksual;
• penentuan status kekebalan atau penyakit autoimun individu;
• identifikasi penanda tumor;
• penentuan hormon.

Dalam kasus penyakit menular dan virus, teknik ini memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi patologi berikut:

Selain itu, ELISA memungkinkan Anda untuk dengan cepat dan efektif menentukan kondisi infark, menilai potensi reproduksi tubuh, mengidentifikasi alergi, sumbernya, dll.

Uji imunosorben terkait-enzim digunakan untuk uji klinis dalam pengembangan obat baru dan dalam menilai efeknya pada tubuh manusia.

Jenis sampel dan metode pemilihannya untuk penelitian

Paling sering, bahan uji untuk enzim immunoassay adalah darah, yang diambil dari vena cubiti pasien. Pengambilan sampel dilakukan dengan perut kosong, terutama di pagi hari. Setelah pengambilan sampel dari darah, sel-sel seragam yang mengganggu penelitian dipisahkan dan dikeluarkan, hanya menyisakan serum.

Ketika mendiagnosis infeksi genitourinarius, apusan dari jaringan mukosa organ genital, lendir dari uretra atau leher rahim, sampel dari dubur, kerokan dari erosi atau borok di pangkal paha dan dari bagian tubuh lainnya sering menjadi bahan. Usap dapat diambil dari rongga mulut dan juga dari nasofaring.

Kadang-kadang enzim immunoassay digunakan dalam praktik kebidanan dan kandungan selama kehamilan untuk menentukan keadaan cairan ketuban. Dalam hal ini, cairan ketuban menjadi sampel. Untuk ini, sejumlah kecil cairan diambil dengan menusuk kandung kemih janin dengan jarum panjang. Semua manipulasi dilakukan dengan instrumen steril untuk meminimalkan kemungkinan risiko.

Seringkali bahan tersebut menjadi cairan serebrospinal atau cairan serosa. Ini terjadi dengan anestesi lokal, yang diberikan dengan injeksi.

Untuk mengklarifikasi jenis bahan apa yang dibutuhkan untuk enzim immunoassay, spesialis yang mengirim ke penelitian harus. Sampel sering diambil dari beberapa jenis sekaligus atau dari lokasi yang berbeda. Dokter yang mengeluarkan rujukan untuk jenis pemeriksaan ini juga harus memberi tahu pasien tentang persiapan pengiriman biomaterial.

Persiapan untuk enzim immunoassay

Untuk meningkatkan keakuratan data yang diperoleh setelah enzim immunoassay, persiapan untuk pemilihan bahan harus sebagai berikut:

• tidak termasuk antibiotik, obat antivirus dan antimikotik 10 hari sebelum penelitian;
• per hari perlu untuk mengecualikan alkohol, merokok dan menggunakan narkoba;
• selama periode yang sama, kelelahan fisik harus dihindari;
• memperingatkan spesialis resep tentang semua obat yang diminum pasien;
• beri tahu dokter jika hamil atau dicurigai hamil.

Cara terbaik adalah jika bahan untuk pengujian dikumpulkan di pagi hari dengan perut kosong.

Jika diagnosis bertujuan untuk menentukan keadaan latar belakang hormonal, maka penting untuk memastikan diri Anda dalam keadaan tenang sehari sebelumnya dan menghindari ketegangan saraf. Bagi wanita, mendonorkan darah untuk hormon jelas ditentukan oleh periode siklus bulanan, yang akan diberitahukan oleh dokter pada saat pengangkatan.

2-3 hari sebelum pemilihan bahan, goreng dan lemak harus dikeluarkan dari menu, dan sebelum analisis untuk hepatitis, jangan makan buah jeruk dan buah jeruk dan kuning lainnya dan sayuran.

Menguraikan hasil immunoassay enzim

Hasil studi kualitatif biasanya ditunjukkan oleh "+" (ditemukan) atau "-" (tidak ditemukan).

Berdasarkan ada atau tidak adanya kelompok imunoglobulin tertentu, kesimpulan berikut dapat diambil:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) - kekebalan terhadap penyakit benar-benar tidak ada (tubuh sebelumnya belum pernah menemukan jenis antigen ini);
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) - sebelumnya ada tabrakan dengan antigen ini atau dengan vaksin;
• JgM (+), JgG (- / +), JgA (- / +) - proses patologis akut (kemungkinan besar primer);
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - proses kursus kronis;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) - kambuh;
• JgM (-) - tahap pemulihan.

Nilai kuantitatif membawa muatan informasi yang besar, tetapi hanya dokter yang hadir yang dapat menginterpretasikannya, berdasarkan indikasi sebelumnya, usia pasien, dan norma-norma untuk setiap penyakit tertentu. Karena alasan inilah Anda tidak dapat mengevaluasi hasilnya sendiri.

Berapa lama untuk menunggu hasil

Teknik ini memiliki banyak varietas, tergantung pada waktu menentukan data yang tersedia. Durasi rata-rata diagnostik ELISA adalah 4-6 jam, yang memungkinkan Anda untuk memberikan hasil pada hari berikutnya.

Metode yang paling lama memakan waktu hingga 10 hari, misalnya, dalam kasus infeksi HIV.

Dalam hal kebutuhan mendesak, dimungkinkan untuk menggunakan metode kilat, di mana jawabannya diterima dalam 1-2 jam.

Di mana saya bisa mendapatkan pengujian ELISA?

Karena peralatan untuk jenis diagnostik ini cukup mahal, tidak semua laboratorium dapat membelinya. Selain itu, tes yang mengandung antigen spesifik memiliki umur simpan terbatas (biasanya sekitar 1 tahun) dan karenanya perlu diperbarui secara konstan.

Karena alasan ini, lembaga medis negara tidak selalu memiliki laboratorium ELISA. Paling sering, Anda harus pergi ke pusat medis besar swasta atau diagnostik.

Untuk melakukan studi ELISA, laboratorium harus memiliki lisensi khusus, dan staf dan teknisi laboratorium harus menjalani pelatihan khusus.

Paling sering, pusat diagnostik atau laboratorium khusus direkomendasikan oleh dokter yang mengirim pasien untuk diperiksa.

Biaya enzim immunoassay

Harga untuk penelitian ini tergantung pada wilayah negara dan pada tingkat klinik yang menyediakan layanan. Di Moskow, harga minimum untuk menentukan satu antigen mulai dari 700 rubel. Jika perlu untuk mengidentifikasi beberapa imunoglobulin sekaligus, maka harganya akan diringkas.

Dalam hal analisis mendesak, biaya meningkat 150-200 rubel. untuk setiap antigen.

Meskipun biayanya agak tinggi, uji immunosorbent terkait-enzim memungkinkan Anda melakukan pemeriksaan pasien seinformatif dan secepat mungkin, yang mengurangi waktu sebelum memulai pengobatan dan memungkinkan Anda menstabilkan kondisi orang tersebut dengan cepat.

Video ini menyajikan film "Fundamentals of enzyme immunoassay".

Sekarang, sebagai aturan, pasien diminta untuk menjalani hanya satu tes - enzim immunoassay.

Penerapan tes darah ELISA

Uji imunosorben terkait - jenis analisis yang sangat khusus yang dilakukan di laboratorium. Analisis ini didasarkan pada respons tubuh, yang biasa disebut sebagai "antigen-antibodi".

Metode analisis berdasarkan indikator ini memberikan akurasi 99%. Ini adalah metode paling akurat yang dikenal saat ini. Dalam praktiknya, hampir tidak ada kasus ketika analisis seperti itu memberikan hasil yang salah.

Enzim immunoassay banyak digunakan dalam diagnosis berbagai macam penyakit. Nilai utamanya adalah memungkinkan mendeteksi penyakit tanpa gejala dengan akurasi tinggi.

Seperti yang Anda ketahui, penyakit seperti itu sering bermasalah untuk dideteksi pada tahap awal dan, karenanya, mulai sembuh tepat waktu.

Penyakit apa yang didiagnosis menggunakan enzim immunoassay:

• penyakit onkologis;
• infeksi menular seksual (HIV, klamidia, sifilis, ureaplasmosis, herpes dan penyakit lainnya);
• tBC, campak, toksoplasmosis, hepatitis, dan sebagainya;
• hormon tiroid;
• hormon seks;
• berbagai gangguan autoimun;
• reaksi alergi dan intoleransi terhadap makanan tertentu.

Prosedur ini membantu mengidentifikasi:

• infeksi pada tubuh dengan bakteri dan virus;
• basis protein;
• invasi cacing;
• benda asing.

Sebenarnya, prosedur ELISA terdiri dari dua bagian:

1. respon imun;
2. reaksi enzimatik.

Inti dari prinsip "antigen-antibodi" adalah bahwa agen penyebab penyakit atau benda asing, yaitu, antigen, memasuki tubuh secara bertahap bersama dengan sumber infeksi. Proses ini memicu apa yang disebut respon imun, yang dirancang untuk melindungi tubuh dari unsur-unsur asing.

Manifestasi perlindungan semacam itu tergantung pada antigen itu sendiri dan pada gejala penyakit yang ditimbulkannya. Skema ini disebut "antigen-antibodi".

Untuk keandalan diagnostik yang lebih besar, seluruh prosedur immunoassay enzim hanya dilakukan di laboratorium dan pusat medis. Berbagai antigen dan antibodi berinteraksi dengan sampel darah.

Analisis semacam itu harus mengungkapkan:

Apa respons imun dan bagaimana pengakuan antigen ditentukan?

Respon imun menunjukkan koneksi biologis dalam molekul sel mikroba, untuk keberadaan analisis yang dilakukan. Respons imun hanya merupakan salah satu komponen dari program ELISA yang komprehensif, sedangkan komponen kedua adalah reaksi enzimatik.

Pengenalan antigen terjadi selama kontak sel sistem imun (imunosit) dengan sel asing. Karakteristik individu antigen berfungsi sebagai alat untuk mengenali "teman atau musuh" untuk sistem kekebalan tubuh.

Ketika antigen dikenali berbahaya, tubuh akan merespons dengan respon imun untuk menghilangkan hama.

Apa itu antibodi?

Faktanya, antibodi:

• Ini hanyalah sebuah molekul yang terletak di permukaan imunosit.
• Molekul ini digunakan untuk mengenali sel asing.

Transmisi informasi yang diterima tentang antigen terjadi pada tingkat sel. Sambungan hancur jika sel kebal, tetapi jika tidak, tubuh meluncurkan reaksi pertahanan alami.

Ilmu pengetahuan modern tahu 5 kelas antibodi, yang disebut imunoglobulin atau struktur protein.

Untuk antibodi, huruf Latin digunakan: A, D, E, G dan M.

Dalam hasil analisis, sebutan ini terlihat seperti ini:

Prosedur ELISA

Pertama-tama, perlu untuk menyiapkan pelat polistiren khusus yang berisi 96 sumur. Sebelum dianalisis, dinding masing-masing sumur diperlakukan dengan antigen adsorben.

Serum darah diteteskan ke sel yang dirawat. Antibodi dan antigen homolog bereaksi satu sama lain untuk membentuk ikatan yang kuat. Tubuh yang tidak terikat dihilangkan. Kemudian antibodi imunoglobulin ditambahkan ke sumur bersama dengan elemen enzim berlabel khusus.

Reagen diberi label untuk memudahkan identifikasi antibodi dalam serum yang sedang dianalisis. Unsur kromogenik yang mempercepat reaksi dan mewarnai sumur ditambahkan setelah pembilasan. Intensitas warna dibandingkan dengan enzim yang diteliti menunjukkan perkiraan persentase antigen dalam sampel darah.

Teknisi kemudian menggunakan cairan optik untuk:

• mengukur konsentrasi antibodi di dalam sumur;
• bandingkan hasil yang diperoleh dengan sampel kontrol, yaitu standar;
• menghitung konsentrasi antibodi menggunakan skala khusus.

Untuk analisis invasi cacing, versi khusus dari sistem pengujian digunakan, dengan serangkaian indikator norma dan penyimpangan darinya.

Persiapan untuk analisis

Pengambilan sampel serum darah untuk enzim immunoassay hanya dilakukan di laboratorium. Mereka mengambil darah dari vena, menghilangkan unsur-unsur dari sana yang dapat memengaruhi proses analisis dan keakuratan hasilnya. Ambil analisis di pagi hari dengan perut kosong.

Menguraikan hasil immunoassay enzim

Kualitas dan kuantitas antibodi menunjukkan adanya unsur asing dalam tubuh pasien, termasuk patogen. Tanda-tanda yang sama menunjukkan bahwa proses peradangan telah dimulai dalam tubuh.

Contoh pengodean ulang hasil ELISA:

Tahap penyakit	IgA	IgM	IgG
Primer (2 minggu dari saat infeksi)	+	—	—
Primer (2,5-3 minggu dari saat infeksi)	+	+	—
Primer (3-4 minggu dari saat infeksi)	+	+	+
Eksaserbasi fase kronis (2 minggu sejak permulaan eksaserbasi)	+	—	+
Kronis	+/-	—	+
Masa lalu (infeksi sembuh)	—	—	+
Pemulihan	Titer menurun 2-4 kali setelah perawatan yang berhasil	—	Titer menurun 4-8 kali setelah 1-1,5 bulan setelah perawatan yang berhasil
Hasilnya negatif	—	—	—

Dengan sendirinya, analisis kuantitatif yang dilakukan dengan metode ini belum memungkinkan untuk secara akurat mendiagnosis penyakit, meresepkan pengobatan dan menentukan dosis obat.

Pro dan kontra dari ELISA

Semua metode pengujian, bahkan yang paling canggih dan sangat akurat, sayangnya, terlepas dari kelebihannya, memiliki kelemahan.

Manfaat enzim immunoassay:

• Spesialisasi metode diagnostik;
• Peningkatan sensitivitas metode ini;
• Penerapan teknologi terbaru.

Sensitivitas metode diagnostik adalah probabilitas tinggi untuk menemukan yang diinginkan, bahkan jika konsentrasinya dalam bahan uji sangat rendah.

Kerugian yang mungkin dari metode analisis ini:

1. Ini mengandaikan penentuan sifat penyakit, yaitu, tidak mungkin untuk secara intuitif "menebak" diagnosis yang benar dalam kasus ini;
2. Biaya analisis yang tinggi.

Perbandingan duodenal dan immunoassay enzim langsung

Prosedur ELISA secara langsung menggunakan kemampuan antibodi untuk menemukan antigen dengan membentuk ikatan dengan label. Metode analisis ini dianggap industri, waktu tunggu untuk hasilnya tidak lebih dari satu jam.

Label substrat khusus muncul setelah fermentasi. Tingkat antibodi sesuai dengan proporsi antigen dalam biomaterial yang diteliti.

Enunoassay enzim duodenal (tidak langsung) dilakukan dalam 2 tahap:

1. Pertama, antibodi berlabel dibandingkan dengan antigen yang diinginkan;
2. Terapkan antibodi berlabel untuk antibodi tidak berlabel yang ditemukan pada tahap sebelumnya.

Dengan demikian, kontrol ganda antigen dan antibodi tercapai, meningkatkan keandalan analisis.

Dengan ELISA tidak langsung di laboratorium, antigen melekat pada permukaan sumur, ia membentuk ikatan dengan bagian antibodi yang tidak berlabel.

Keuntungan dari metode duodenal:

• Kontrol ganda dari biomaterial yang dipelajari, yang secara signifikan meningkatkan akurasi;
• Meningkatkan akurasi dan spesifisitas metode analisis itu sendiri.

Namun, metode ini membutuhkan banyak waktu dan melibatkan sejumlah langkah tambahan. Namun, keakuratan penelitian ini sangat tinggi sehingga membenarkan kerugian ini. Untuk alasan ini, sebagian besar dokter merekomendasikan metode analisis duodenal.

Ke mana harus pergi, berapa lama untuk menunggu dan berapa banyak untuk membayar?

Jika Anda memiliki semua alat dan barang habis pakai yang diperlukan, Anda akan bisa mendapatkan hasilnya dalam 2 hari setelah melahirkan. Jika laboratorium memiliki layanan analisis cepat, maka sampel dapat diproses hanya dalam 3-5 jam.

Di mana saya dapat mengambil ELISA:

• di klinik negara;
• di klinik swasta.

Harga untuk immunoassay enzim secara langsung tergantung pada tingkat harga di klinik tertentu, rata-rata, harganya setidaknya 4000 rubel.

Temuan dari penelitian ini dapat menjadi kontribusi yang berguna bagi ilmu kedokteran, namun pasien harus ingat bahwa karena biaya enzim immunoassay sangat tinggi, akan lebih bijaksana untuk mempercayakan prosedur ini ke klinik yang andal dan telah teruji oleh waktu.

Sayangnya, institusi medis negara tidak selalu dilengkapi dengan sains terbaru. Perangkat yang diperlukan untuk pengambilan sampel biomaterial berkualitas tinggi dan pemrosesan di klinik distrik mungkin tidak tersedia.

Saat memilih klinik untuk ELISA, Anda harus memeriksa bahwa institusi ini memiliki sertifikat internasional yang diakui secara universal.

Jadi, bagaimana enzim immunoassay bermanfaat bagi pasien:

• memungkinkan Anda untuk mendeteksi invasi cacing pada tahap awal;
• sebagai konsekuensi dari ini, memungkinkan inisiasi pengobatan tepat waktu;
• stabilitas metode memungkinkan dilakukannya analisis dengan akurasi yang sama pada anak-anak dan orang dewasa.

Uji imunosorben terkait-enzim menunjukkan tidak hanya faktor kualitatif, tetapi juga kuantitatif, yaitu, tidak hanya menunjukkan fakta keberadaan cacing dalam tubuh pasien, tetapi juga memungkinkan untuk memperkirakan jumlahnya.