HIV infekcijas diagnostikas principi. Mūsdienu HIV infekcijas diagnostikas metodes. Laboratoriskās diagnostikas metodes: kādi testi atklāj HIV

HIV infekcijas diagnostika ir būtiska efektīvai ārstēšanai. Lai diagnosticētu AIDS, tiek veikta standarta pacienta izmeklēšanas procedūra. Tas sastāv no 2 posmiem:

• skrīnings;
• imūnblotēšana.

Lai noteiktu diagnozi, papildus tiek noteikts PCR, eksprestests.

ELISA

Sākotnējā AIDS diagnoze balstās uz laboratorisku HIV proteīnu izmantošanu, kas aiztur specifiskas antivielas. Pēc to saskares ar testa sistēmas fermentiem indikatora krāsa mainās. Pēc tam izmainītā krāsu shēma tiek apstrādāta, izmantojot īpašu aprīkojumu, kas nosaka testa rezultātu.

Līdzīga HIV infekcijas laboratoriskā diagnoze uzrāda rezultātu 21 dienu pēc inficēšanās. Ar ELISA palīdzību nav iespējams noteikt vīrusa klātbūtni. Šī diagnostikas metode palīdz noteikt vīrusa antivielu veidošanos. Līdzīgu procesu var novērot 2-6 nedēļas pēc inficēšanās.

Speciālisti izšķir 4 ELISA sistēmu paaudzes ar dažādu jutību. Ārsti bieži izmanto 3. un 4. paaudzes testus. Šo sistēmu pamatā ir sintētiskas izcelsmes rekombinantie proteīni vai peptīdi, kuriem ir ievērojama precizitāte un specifiskums. Vīrusa izplatības noteikšanai, uzraudzībai izmanto ELISA, kas nodrošina drošību, pārbaudot ziedotās asinis. Šādu sistēmu precizitāte svārstās no 93-99%. Rietumeiropā izdotie testi ir jutīgāki. Lai veiktu diagnostiku, laborants ņem venozās asinis (5 ml). 8 stundas pirms pētījuma ieteicams atteikties no ēšanas. Pētījums biežāk tiek veikts no rīta.

Datu atšifrēšana

Testa rezultātu saņemšana prasīs 10 dienas. Ja rezultāts ir negatīvs, tad pacients nav inficēts. Šajā gadījumā ārstēšana nav noteikta. Tiek atklāts kļūdaini negatīvs rezultāts:

• līdz 3 nedēļām pēc inficēšanās;
• AIDS pēdējā stadijā ar zemu imūnsistēmu;
• ar nepareizu asins sagatavošanu.

Ja rezultāts ir pozitīvs, pacients ir inficēts. Šajā gadījumā tiek veikta IB. Viltus pozitīvs rezultāts norāda uz vienlaicīgu slimību klātbūtni un nepareizi veiktu asins sagatavošanu. Ja testēšana ir indicēta grūtniecēm, tad savāktajā materiālā ārsts var noteikt nespecifiskas antivielas, kuru veidošanās nav saistīta ar vīrusu. Savākto materiālu pārbauda references vai arbitrāžas laboratorijā. Ja atkārtotā testa rezultāts ir negatīvs, tad pirmais rezultāts ir nepatiess. Šajā gadījumā IB netiek veikta.

Imūnblotēšanas veikšana

AIDS ārstēšana tiek veikta, ja tiek iegūts pozitīvs imūnblotēšanas rezultāts. Šo diagnostikas metodi veic, izmantojot nitrocelulozes sloksni, uz kuras tiek uzklāti vīrusu proteīni. IB gadījumā tiek izmantotas venozās asinis, kuras pēc tam tiek apstrādātas. Sūkalās atrodamās olbaltumvielas ir sadalītas grupās, pamatojoties uz to lādiņu un molekulmasu. Lai veiktu šo procesu, tiek izmantots īpašs aprīkojums.

Ja testa materiālā ir antivielas pret vīrusu, uz sloksnes parādās atbilstošās līnijas. Pozitīvs IB norāda, ka pacients ir HIV pozitīvs. Apšaubāms rezultāts tiek konstatēts sākotnējās infekcijas stadijās ar tuberkulozi un onkoloģiju grūtniecēm. Šādos gadījumos ir ieteicams atkārtot IB.

Nenoteikts IB rezultāts norāda uz viena vai vairāku vīrusa proteīnu klātbūtni imūnblotā. Līdzīga aina vērojama ar nesenu infekciju, kad asinīs ir neliels daudzums antivielu pret infekciju. Šajā gadījumā IB pēc kāda laika būs pozitīvs. Šī pētījuma neskaidrais rezultāts var būt saistīts ar HIV infekcijas neesamību hepatīta, hronisku vielmaiņas slimību gadījumā grūtniecības laikā. Šajā gadījumā IB kļūs negatīvs vai speciālisti noteiks pacienta neskaidrā rezultāta cēloni.

PCR pētījums

Aizsardzības sistēma tiek ietekmēta uz vīrusa ievadīšanas cilvēka organismā fona. Inkubācijas periods parasti ir 3 mēneši. Tāpēc pēc dzimumkontakta ar HIV inficētu partneri ieteicams veikt PCR diagnostiku. Tas ļaus jums noteikt vīrusa RNS. Periods, kurā ieteicams veikt šādu pētījumu, ir 8-24 mēneši.

Galīgai diagnozei indicēta regulāra asins nodošana HIV (1 reizi 3 mēnešos). Pateicoties augstajai jutībai, šis izmeklējums ļauj atklāt vīrusu 10 dienas pēc inficēšanās. Kļūdaini pozitīvu PCR rezultātu var iegūt arī tad, ja pacienta organismā ir cita infekcija. PCR pētījumi tiek uzskatīti par dārgu procedūru, jo tam ir nepieciešams īpašs aprīkojums.

PCR ir paredzēta, lai noteiktu vīrusu šādām personām:

• jaundzimušais, kas dzimis no HIV inficētas mātes;
• pacienti ar apšaubāmu IB.

Ir pierādīts, ka šī metode kontrolē vīrusa koncentrāciju asinīs un donoru asiņu izpēti.

Ātrās izpētes metodes

Eksperti iekļauj mūsdienu AIDS diagnostikas metožu ātrās pārbaudes. To atšifrēšana prasīs 10-15 minūtes. Imūnhromatogrāfiskie testi, kuru pamatā ir kapilārā plūsma, sniedz precīzus rezultātus. Šādas pārbaudes sistēmas ir uzrādītas īpašu sloksņu veidā, uz kurām tiek uzklātas asinis vai siekalas. Vīrusa klātbūtnē testā pēc 10 minūtēm parādās 2 sloksnes:

• kontrole;
• krāsa.

Šajā gadījumā testa rezultāts ir pozitīvs. Par negatīvu rezultātu norāda vienas kontroles sloksnes parādīšanās. Lai apstiprinātu iegūto rezultātu, tiek veikta IB. Pamatojoties uz vispārējiem datiem, ārsts veic diagnozi un nosaka ārstēšanu.

Jūs varat atklāt vīrusu mājās. Šim nolūkam tiek izmantoti speciāli ekspreskomplekti. OraSure Technologies1 ir ASV izstrādāta sistēma. Ja pēc pārbaudes tiek konstatēts pozitīvs rezultāts, pacientam ieteicams iziet pilnu pārbaudi medicīnas centrā.

Bērna apskate

Jaundzimušie, kas dzimuši no inficētām mātēm, tiek steidzami pārbaudīti. Ar seroloģisko metožu palīdzību nav iespējams precīzi noteikt vīrusu bērniem vecumā no 5 līdz 18 mēnešiem. Bet šādas aptaujas rezultāts ir svarīgs, veicot IB.

Jūs varat noteikt infekciju bērniem, izmantojot PCR. Vīrusa DNS speciālists nosaka pirmā dzīves mēneša bērniem. Lai noteiktu patogēna RNS koncentrāciju, eksperti nosaka imūndeficīta provīrusu. Pētījumiem ārsts izmanto pilnas asinis vai to izžāvētu vietu. Materiālu ievieto mēģenē ar EDTA konservantu (proporcija 1:20). Paraugs jāuzglabā temperatūrā, kas nepārsniedz 8°C (2 dienas). Materiālu sasaldēšana nav atļauta.

Lai iegūtu sausu asins paraugu, visu šķidrumu uzklāj uz speciāla papīra. Paraugu var uzglabāt temperatūrā līdz 8°C. Kartes tiek izmantotas 8 mēnešus. Jaundzimušais ir jāpārbauda, ​​ņemot materiālu pētniecībai, šādos periodos:

• 48 stundas pēc dzimšanas;
• 2 mēnešu vecumā pēc dzimšanas;
• 3-6 mēnešus pēc dzimšanas.

Ja ārsts HIV provīrusa gēnu konstatēja dažas stundas pēc mazuļa piedzimšanas, tad bērns tika inficēts intrauterīnā veidā. Ar vīrusu var inficēties arī dzemdību vai zīdīšanas laikā. Rezultāti, kas liecina par vīrusa DNS klātbūtni 2 paraugos, liecina par AIDS attīstību bērnam. Dispansera novērošana nav nepieciešama, ja PCR rezultāti ir negatīvi 4 mēnešus pēc bērna piedzimšanas.

Ja testa rezultāts ir negatīvs, bet AIDS simptomi ir, tad ieteicams konsultēties ar ārstu. Šādu klīniku var izraisīt citas slimības. Testēšana tiek uzskatīta par vienīgo un 100% vīrusu diagnostikas metodi. Pat kvalificēti un pieredzējuši speciālisti nevar atpazīt vīrusu pēc tā simptomiem.

Ja pēc kāda laika pacienta rezultāti ir negatīvi, tad HIV organismā nav.

Tas neņem vērā simptomus. Bet šāda klīniskā aina var būt saistīta ar AIDS fobiju. Šajā gadījumā ir nepieciešama psihologa palīdzība. Ja nepieciešams, bērnam vai pieaugušajam tiek nozīmēta atbilstoša ārstēšana.

un

Ja slimība tiek atklāta agrīnā stadijā un nekavējoties ārstēta, ir iespējams apturēt vīrusa pārnešanu no nesējiem uz veseliem cilvēkiem. Tāpat agrīna atklāšana ir aktuāla sociālās, psiholoģiskās palīdzības sniegšanai un ambulances ārstēšanas iespējai. Līdz šim ir iespējams izārstēt šo slimību, taču ar nosacījumu, ka HIV infekcijas diagnoze ir atklājusi agrīnu infekcijas stadiju. Tas ievērojami pagarina pacientu mūžu, kas viņiem ir svarīgi.

Ir vairāki simptomi, kuriem vajadzētu jūs brīdināt un likt jums doties uz pārbaudi:

• Biežs, neizskaidrojams nogurums;
• Svīšana naktī;
• Biežas sāpes galvas rajonā;
• Drudžains stāvoklis, līdz apmēram desmit dienām, ar temperatūru līdz 38,5 C;
• caurejas izpausmes;
• Nepamatots svara zudums īsā laika periodā.

Ja diagnozes laikā būs izsitumi, furunkuloze un citas izpausmes, tas atvieglos slimības identificēšanu. Limfadenopātija vai palielināti limfmezgli var liecināt par iespējamu infekciju, visbiežāk šie mezgli ir kakla, augšžokļa, subklāvija, paduses un elkoņa kaula. To izmērs ir aptuveni 2,5 centimetri diametrā. Palpējot sāpes nav jūtamas, tās ir ar blīvu elastīgu saturu, reti parādās kā saplūstot konglomerātā. Ar HIV mezgli visbiežāk palielinās grupās, ilgāk par trim mēnešiem.

Bieži slimības sākuma fāzēs rodas neiropsihiski simptomi:

• Nemierīga uzvedība un sajūta;
• Depresīvs stāvoklis;
• Neskaidra gaita, satricinājumi;
• Redzes skaidrības pasliktināšanās, tās samazināšanās;
• krampji;
• atmiņas traucējumi;
• Neadekvāta rīcība un personai neierasta rīcība;
• Jūtu vājināšanās;

HIV sākotnējās fāzes pazīmes, kurām jāpievērš uzmanība:

• Svara zudums līdz 10%;
• Gļotādas izmaiņu noteikšana (dermatīts, furunkuls, psoriāze, nagu sēnīte, čūlas un gingivīts);
• Herpes cilvēkiem, kas jaunāki par 50 gadiem;
• Atkārtotas elpceļu infekcijas.

Otro slimības posmu nosaka imūndeficīta superinfekciju saraksts:

• Svara zudums par vairāk nekā 10%;
• Caureja, kas ilgst vairāk nekā mēnesi;
• kandidoze, kas ietekmē mutes dobumu;
• Tuberkulozi orgānu bojājumi, leikoplakija;
• Neiropatija, Kapoši sarkoma, herpetiski procesi;
• Bakteriālas infekcijas, kas izpaužas smagā formā;

Pēdējā slimības diagnostikas fāze var ietvert:

• pneimonija;
• Toksoplazmoze;
• CMV infekcija;
• Kriptokokoze;
• Herpes izpausmes;
• Leikoencefalopātija ar vairākiem perēkļiem;
• Histoplazmoze, ezofagīts;
• MAC infekcija;
• Tuberkuloze un daudzas citas slimības sarežģītākā pakāpē.

Laboratorijas metodes- tā ir ar AIDS saistītu anomāliju identificēšana pacientam, kas inficēts ar sekundāru imūndeficītu. HIV slimībai ir 23 nosoloģiskie veidi; precīzākas diagnozes noteikšanai ir piemērota sindromiska pieeja.

HIV noteikšanas pamatā ir HIV antivielu un vīrusu antigēnu noteikšana, un atsevišķos gadījumos tiek konstatēta HIV provīrusa DNS un HIV vīrusa RNS (zīdaiņiem līdz 1 gada vecumam). bāze darbojas trīs virzienos: HIV un tā sastāvdaļu definīcija, anti-HIV noteikšana, imūnsistēmas funkcionalitātes izmaiņu noteikšana. HIV sastāvdaļa- tie ir strukturālie gēni gag, pol un arī env, tie kodē proteīnu translāciju, pamatojoties uz vīrusa tiešo struktūru.

Regulējošie gēni ir tat, rev, vif, nyf, vpx un vpr savienība. Gag gēns kodē kodolproteīnus ar sākotnējiem translācijas produktiem, pp53 ir prekursoru proteīns, kam ir tendence šķelties par p15, p17 un p24 vai p39, kam seko šķelšanās par p17 un p24. Pacientam veidojas antivielas pret šo antigēnu, infekcijas sākuma fāzēs var noteikt acre 24, jo p24 ir imunogēnāks par p17.

1. Seroloģiskās metodes antivielu (AT) noteikšana pret HIV ir standarts HIV infekcijas diagnosticēšanai (ELISA testu sistēmām, kuru pamatā ir sintētiskie peptīdi, ir gandrīz 100% jutība un specifiskums). ELISA ļauj noteikt HIV AG, kas var liecināt par agrīnu inficēšanos vai, otrādi, vēlu - progresējošu HIV infekcijas attīstību (p24 AG)

2. Apstiprinošie testi— imūnblotēšana (IB), netiešā imunofluorescence (NIF) un radioimūnprecipitācija (RIP).

a) PVO iesaka serumus uzskatīt par pozitīviem, ja IB ir antivielas pret diviem apvalka proteīniem un vienu no HIV iekšējiem proteīniem. Pacienti, kuriem ELISA ir pozitīvi, bet kuriem ir nenoteikti IB rezultāti, klīniski jāpārbauda un jānovērtē ar citiem līdzekļiem, medicīnisko izmeklēšanu, imunoloģiski un pēc 3 līdz 6 mēnešiem asins serumā jāpārbauda antivielas pret HIV.

b) netiešās imunofluorescences (NIF) metode – izmanto kā apstiprinošu testu daudzās laboratorijās vai kā skrīninga testu.

c) radioimūnprecipitācija ir ļoti jutīga un specifiska metode, kuras pamatā ir ar radioaktīviem izotopiem marķētu aminoskābju izmantošana. Metode ir ļoti jutīga, lai noteiktu antivielas pret virsmas proteīniem, un tāpēc tā ir ļoti specifiska, jo šie vīrusa komponenti pēc serokonversijas ir gandrīz visiem HIV inficētiem cilvēkiem.

3. Molekulāri bioloģiskās metodes: nukleīnskābju molekulārās hibridizācijas metode, PCR

1) kā alternatīvu un papildu apstiprinošu metodi vīrusa klātbūtnes noteikšanai organismā saistībā ar seroloģiskās laboratoriskās diagnostikas metodēm;

2) kā pirmo specifiskās analīzes metodi agrīnas HIV infekcijas diagnostikā, kad specifiskas pretvīrusu antivielas vēl nav pieejamas;

3) HIV infekcijas diagnosticēšanai jaundzimušajiem no HIV inficētām mātēm;

4) noteikt vīrusu slodzi un izrakstīt specifisku pretretrovīrusu terapiju un uzraudzīt tās īstenošanu;

5) kā precizējošu metodi neskaidru seroloģisko rezultātu un seroloģisko un kultūras analīžu neatbilstības gadījumā;

6) HIV inficētu personu dzimumpartneru izpētē;

7) kā HIV-1 un HIV-2 diferenciāldiagnostikas metodi;

4. Virusoloģiskā metode.

1. Antiretrovīrusu terapijas principi: ārstēšana jāsāk pirms nozīmīga imūndeficīta attīstības; sākotnējā terapijā jāiekļauj vismaz trīs zāļu kombinācijas; terapijas pārveidošanai jāietver vismaz divu jaunu zāļu aizstāšana vai pievienošana; ir būtiski izmērīt CD4+ šūnu līmeni un vīrusu slodzi; vīrusu slodzes samazināšanās zem jutīgo testu noteikšanas robežas atspoguļo optimālo ārstēšanas efektu.

2. Pastāv trīs mūsdienu pretretrovīrusu zāļu grupas:

a) nukleozīdu reversās transkriptāzes inhibitori (NRTI): zidovudīns (azidotimidīns, retrovīrs); didanozīns (ddI, videx); zalcitabīns (ddC, chivid); stavudīns (Zerit, d4T); lamivudīns (3TC, epivīrs); abakavirs; adefovīrs; kombivirs (zidovudīns + abakavirs); trizivīrs (zidovudīns + lamivudīns + abakavirs); adefovirs (nukleotīdu reversās transkriptāzes inhibitori).

b) nenukleozīdu reversās transkriptāzes inhibitori (NNRTI): delaverdīns (reskriptors); nevirapīns (viramune); ifavirenzs.

c) proteāzes inhibitori (PI): sakvinavīrs; ritonavīrs (norvir); indinavīrs (kriksivāns); nelfinavīrs (viracepts); amprenavīrs (agenāze); lopinavirs (aluvirāns); kaletra (lopinavirs + ritonavīrs).

3. Monoterapija ar jebkādām zālēm nevar nodrošināt pietiekami izteiktu un ilgstošu HIV replikācijas nomākšanu. Turklāt, lietojot monoterapiju, palielinās rezistentu celmu rašanās un krusteniskās rezistences attīstības risks pret vienas un tās pašas grupas zālēm. Vienīgais izņēmums ir zidovudīna lietošana monoterapijā, lai samazinātu perinatālās HIV pārnešanas risku.

4. Vissvarīgākais terapijas efektivitātes kritērijs ir vīrusu slodzes dinamika, kas jānosaka: bez ārstēšanas - ik pēc 6-12 mēnešiem, ārstēšanas laikā - ik pēc 3-6 mēnešiem, kā arī 4-8 nedēļas pēc plkst. pretvīrusu terapijas sākums.

Papildus pretretrovīrusu terapijai ir nepieciešama arī sekundāro slimību terapija, kas ir pievienojušās.

34.3 AIDS (klīniskie varianti, oportūnistiskas slimības).

oportūnistiskās slimības- smagas, progresējošas slimības, kas attīstās uz pieaugošas imūnsupresijas fona un nerodas cilvēkam ar normāli funkcionējošu imūnsistēmu (AIDS-indikatorslimības).

a) pirmā grupa- tās ir slimības, kas raksturīgas tikai smagam imūndeficītam (CD4+ līmenis< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

b) otrā grupa- slimības, kas var attīstīties gan uz smaga imūndeficīta fona, gan atsevišķos gadījumos bez tā: 1. Bakteriālas infekcijas, kombinētas vai recidivējošas bērniem līdz 13 gadu vecumam (vairāk nekā divi gadījumi 2 gadu novērošanas laikā): kauli vai locītavas , abscesi, ko izraisa Haemophilus influenzae, streptokoki. 2. Izkliedēta kokcidioidomikoze (ārpusplaušu lokalizācija). 3. HIV encefalopātija 4. Diseminēta histoplazmoze ar ekstrapulmonālu lokalizāciju. 5. Izosporoze ar caureju, kas turpinās ilgāk par 1 mēnesi. 6. Kapoši sarkoma jebkura vecuma cilvēkiem. 7. B-šūnu limfomas (izņemot Hodžkina slimību) vai nezināma imūnfenotipa limfomas. 8. Ārpusplaušu tuberkuloze. 9. Salmonellas septicēmija atkārtojas. 10. HIV distrofija.

Biežākās ir pneimocistiskā pneimonija, kriptokoku izraisīts meningoencefalīts, ģeneralizēta citomegalovīrusa infekcija (encefalīts, retinīts, ezofagīts, hepatīts, kolīts), jauktas etioloģijas sepse, ģeneralizēta Kapoši sarkomas forma, plaušu tuberkuloze.

Visas šīs slimības rodas ar viena vai vairāku orgānu un sistēmu bojājumiem: smadzenēm, plaušām, aknām, kuņģa-zarnu traktā un ir smaga progresējoša rakstura. AIDS indikatorslimības parādās dažādās kombinācijās, un pat adekvāta terapija nedod gaidīto efektu.

AIDS klīniskie varianti: infekcijas-, neiro-, onko-AIDS, atkarībā no dažādu klīniku izplatības.

HIV: diagnostika un ārstēšana, profilakse

Iegūtā imūndeficīta sindroms ir bijusi viena no mūsdienu sabiedrības galvenajām problēmām jau vairāk nekā četrdesmit gadus. Tāpēc HIV diagnostika šobrīd piesaista lielu uzmanību un resursus. Galu galā, jo ātrāk tiks atklāts vīruss, kas iznīcina ķermeņa imūnsistēmu, jo lielāka būs iespēja izvairīties no letāla iznākuma.

Zem saīsinājuma HIV slēpjas cilvēka imūndeficīta vīrusa definīcija - viens no visbīstamākajiem esošajiem. Tās ietekmē notiek dziļa visu ķermeņa aizsargājošo īpašību nomākšana. Tas savukārt noved pie dažādu ļaundabīgu audzēju un sekundāru infekciju rašanās.

HIV infekcija var progresēt dažādos veidos. Dažreiz slimība iznīcina cilvēku 3-4 gadu laikā, dažos gadījumos tā var ilgt vairāk nekā 20 gadus. Ir vērts zināt, ka šis vīruss ir nestabils un ātri mirst, ja tas atrodas ārpus saimnieka ķermeņa.

HIV var pārnest mākslīgi, kontaktā ar asinīm un biokontakta mehānisma starpniecību.

Ja ir bijis viens kontakts ar vīrusa nesēju, tad inficēšanās risks būs zems, bet ar pastāvīgu mijiedarbību tas ievērojami palielinās. HIV infekcijas diagnozi nevar atstāt bez ievērības, īpaši mainot seksuālos partnerus

Pievērsiet uzmanību parenterālajam infekcijas ceļam. Tas var notikt inficētu asiņu pārliešanas laikā, injekciju laikā ar adatām, kas ir piesārņotas ar HIV inficētu cilvēku asinīm, kā arī nesterilu medicīnisku manipulāciju laikā (tetovējumi, pīrsingi, zobārstniecības procedūras, izmantojot nepareizi apstrādātus instrumentus) .

Tajā pašā laikā der zināt, ka nav jābaidās no vīrusa pārnešanas no kontakta-mājsaimniecības. Bet fakts paliek fakts: cilvēkam ir augsta uzņēmība pret HIV infekciju. Un, ja inficējas subjekts, kas vecāks par 35 gadiem, tad AIDS attīstība notiek ievērojami ātrāk nekā tiem, kuri vēl nav pārvarējuši trīsdesmit gadu pagrieziena punktu.

Protams, labākais veids, kā noteikt problēmu vai tās trūkumu, ir diagnosticēt HIV infekciju. Bet kādu iemeslu dēļ cilvēks, kurš piekopj veselīgu dzīvesveidu, var doties pārbaudīt sevi, vai nav inficējies? Dabiski, ka šādai iniciatīvai vajadzētu kaut ko pamatot. Tāpēc ir svarīgi zināt, kādi simptomi var liecināt par destruktīviem procesiem, kas nomāc imūnsistēmu.

Maz ticams, ka vīrusa inkubācijas stadija tiks atklāta bez asins analīzes, jo ķermenis šajā laikā joprojām nekādā veidā nereaģē uz naidīgiem elementiem.

Otrais posms (primārās izpausmes) bez ārsta palīdzības var arī palikt nepamanīts. Bet dažreiz notiek aktīva vīrusa replikācija, un organisms sāk uz to reaģēt - tiek atzīmēts drudzis, dažādi polimorfi izsitumi, lien sindroms un faringīts. Otrajā posmā ir iespējams pievienot tādas sekundāras slimības kā herpes, sēnīšu infekcijas, pneimonija utt.

Trešo, latento posmu raksturo pakāpenisks imūndeficīta pieaugums. Sakarā ar to, ka aizsardzības sistēmas šūnas mirst, palielinās to ražošanas dinamika, un tas ļauj kompensēt taustāmus zaudējumus. Šajā posmā var iekaist vairāki limfmezgli, kas pieder pie dažādām sistēmām. Bet spēcīgas sāpīgas sajūtas netiek novērotas. Vidēji latentais periods ilgst no 6 līdz 7 gadiem, bet var aizkavēties līdz 20 gadiem.

Sekundāro slimību stadijā, kas ir ceturtā, vienlaikus ir sēnīšu, baktēriju vienšūņu, vīrusu izcelsmes infekcijas, kā arī ļaundabīgi audzēji. Tas viss notiek smaga imūndeficīta fona.

HIV infekcijas diagnostikas metodes

Runājot par ķermeņa aizsardzības mehānismu dziļu nomākšanu vīrusa iedarbības dēļ, ir vērts atzīmēt, ka pacienta nākotne šajā gadījumā ir tieši atkarīga no savlaicīgas un precīzas diagnostikas.

Lai to izdarītu, mūsdienu medicīnā tiek izmantotas dažādas testu sistēmas, kuru pamatā ir imūnķīmiluminiscējoša, kā arī enzīmu imūnanalīze. Šīs metodes ļauj noteikt dažādām klasēm piederošu antivielu klātbūtni. Šis rezultāts palīdz ievērojami palielināt analītiskās, klīniskās specifikas un jutīguma metožu informācijas saturu, strādājot ar infekcijas slimībām.

Interesanti ir arī tas, ka tieši polimerāzes ķēdes reakcijas metode ļāva HIV diagnostiku pacelt principiāli jaunā līmenī. Kā materiāls pētniecībai ir piemēroti dažādi bioloģiskie materiāli: asins plazma, biopsija, skrāpēšana, serums, cerebrospinālais vai pleiras šķidrums.

Ja mēs runājam par laboratorijas pētījumu metodēm, tās galvenokārt ir vērstas uz vairāku galveno slimību noteikšanu. Mēs runājam par HIV infekciju, tuberkulozi, visām seksuāli transmisīvajām infekcijām un vīrusu hepatītu.

Lai identificētu imūndeficīta vīrusu, tiek izmantoti arī molekulāri ģenētiskie un seroloģiskie testi. Pirmajā gadījumā tiek noteikta vīrusa RNS un provīrusa DNS, otrajā gadījumā tiek analizētas antivielas pret HIV un tiek noteikts P24 antigēns.

Klīnikās, kurās izmanto, tā sakot, klasiskās diagnostikas metodes, pārsvarā tiek izmantots seroloģiskās pārbaudes standarta protokols.

Agrīna HIV diagnostika

Šāda veida inficēšanās fakta noteikšana ir nepieciešama, lai pēc iespējas agrāk identificētu imūnsistēmas bojājuma draudus. Tas, pirmkārt, ļauj izvairīties no infekcijas izplatīšanās, un, otrkārt, ietekmēt slimību sākotnējā stadijā.

Ja ņemam vērā Krievijas piemēru, tad HIV infekcijas klīniskā klasifikācija tika ieviesta Krievijas Federācijas armijā un flotē. Tas ir devis pozitīvus rezultātus: agrīnas klīniskās diagnostikas process ir kļuvis daudz vieglāks.

Galvassāpes, nakts svīšana un nemotivēts nogurums var tikt identificēti kā bieži sastopami simptomi, kas norāda uz iespējamu imūnsistēmas bojājumu. Ir iespējama arī drudža attīstība, ko papildina tonsilīta pazīmes. Tas nozīmē, ka temperatūra paaugstinās līdz 38 grādiem un augstāk, un tajā pašā laikā palielinās palatīna mandeles, un rīšanas laikā parādās arī sāpes. To visu papildina straujš svara zudums. Tomēr šie simptomi bieži ir sarežģīti.

Atsevišķos gadījumos HIV infekcija agrīnā stadijā var izpausties dažādu ādas stāvokļa izmaiņu veidā. Mēs runājam par plankumiem, rozolu, pustulām, furunkulozi utt. Agrīna HIV diagnostika ietver arī darbu ar tādiem simptomiem kā ģeneralizēts vai ierobežots perifēro limfmezglu palielinājums.

Ja vienlaicīgi aug vairāki limfmezgli, kas ilgst trīs mēnešus vai ilgāk, un dažādās grupās, izņemot cirkšņa reģionu, tad ir pamats aizdomām par cilvēka imūnsistēmas vīrusu.

Runājot par diagnozi vēlākā periodā, jums jāpievērš uzmanība sekundāra imūndeficīta izpausmei, kas bieži rodas dažādu klīnisku simptomu aizsegā. Šīs ir šādas izpausmes:

• nemotivēta ģeneralizēta perifēra limfadenopātija;
• nezināmas etioloģijas artralģija, kurai ir viļņveida gaita;
• SARS (ARVI), plaušu un elpceļu iekaisuma bojājumi, kas liek sevi manīt diezgan bieži;
• nezināmas izcelsmes drudzis un ilgstošs subfebrīla stāvoklis;
• vispārēja intoksikācija, kas izpaužas ar nemotivētu vājumu, nogurumu, letarģiju utt.

Vēlīnā HIV diagnoze ietver skrīningu, lai noteiktu tādu slimību kā Kapoši sarkoma, kas izpaužas ar vairāku audzēju parādīšanos, bieži jauniešiem ķermeņa augšdaļā, kam seko dinamiska attīstība un metastāzes.

polimerāzes ķēdes reakcija

Ņemot vērā dažādās HIV infekcijas diagnostikas metodes, tam jāpievērš īpaša uzmanība. Nekavējoties jāatzīmē, ka šī asins analīze var būt vērsta uz kvantitatīvām un kvalitatīvām īpašībām.

Kā šīs vīrusa noteikšanas metodes mērķi var definēt šādus uzdevumus:

• agrīna HIV infekcijas diagnostika;
• precizēšana apšaubāmu rezultātu klātbūtnē imūnblotēšanas pētījumu rezultātā;
• noteiktas slimības stadijas noteikšana;
• uzraudzīt vīrusa nomākšanas ārstēšanas efektivitāti.

Ja mēs runājam par primāro infekciju, jāatzīmē, ka šī metode ļauj noteikt HIV RNS pacienta asinīs pēc 14 dienām no inficēšanās brīža. Tas ir ļoti labs rezultāts. Šajā gadījumā pašam pētījuma rezultātam būs kvalitatīva izpausme: vai nu pozitīvs (vīruss ir klāt), vai negatīvs.

Kvantifikācija ar PCR

Šāda veida polimerāzes ķēdes reakciju izmanto, lai noteiktu iespējamo AIDS attīstības ātrumu un prognozētu pacienta dzīves ilgumu.

HIV RNS šūnu kvantitatīva noteikšana asinīs ļauj saprast, kad slimība nonāk klīniskajā stadijā.

Ir vērts pievērst uzmanību tam, ka HIV laboratoriskās diagnostikas metodes dod precīzāku rezultātu, ja ir pareizi noteikts analīzei nepieciešamais biomateriāls un pareizi veikta tā paraugu ņemšana.

Lai veiktu inficētā kvalitatīvu uzraudzību, ir nepieciešams (ja iespējams) izmantot integrētu pieeju pacienta imūnsistēmas stāvokļa izpētei. Mēs runājam par visu aizsardzības sistēmas daļu kvantitatīvo un funkcionālo noteikšanu: šūnu, humorālo imunitāti un nespecifisko rezistenci kā tādu.

Laboratorijas diagnostika

Arvien biežāk mūsdienu laboratorijas apstākļos tiek izmantota daudzpakāpju imūnsistēmas stāvokļa novērtēšanas metode. Šis paņēmiens bieži ietver imūnglobulīnu, limfocītu apakšpopulācijas noteikšanu asinīs. Tas nozīmē, ka tiek ņemta vērā CD4/CD8 šūnu attiecība. Ja rezultāts uzrāda mazāk nekā 1,0, tad ir pamats aizdomām par imūndeficītu.

HIV infekcijas laboratoriskajā diagnostikā šis tests noteikti jāiekļauj, jo šim vīrusam raksturīgs selektīvs CD4 limfocītu bojājums, kas izraisa ievērojamu iepriekš minētās attiecības pārkāpumu (mazāk nekā 1,0).

Lai novērtētu imunoloģisko stāvokli, ārsti var veikt testu, lai noteiktu humorālās un šūnu imunitātes sistēmas "rupju" vai vispārēju defektu klātbūtni. Mēs runājam par hipogammaglobulinēmiju vai hipergammaglobulinēmiju termināla stadijā, kā arī par citokīnu ražošanas samazināšanos, cirkulējošo imūnkompleksu koncentrācijas palielināšanos, limfocītu reakcijas pavājināšanos uz mitogēniem un antigēniem.

Ir vērts pievērst uzmanību faktam, ka HIV laboratoriskajai diagnostikai ir divi galvenie posmi:

1. Skrīninga laboratorija. Ja ELISA (enzīmu imūntestā) tika iegūts pozitīvs rezultāts, tad to atkārto vēl divas reizes tajā pašā sistēmā un nemainot serumu. Gadījumā, ja divi no trim izmeklējumiem ļauj atklāt vīrusa ietekmi, serums tiek nosūtīts tālākai analīzei uz references laboratoriju.
2. Otrais posms, kas ietver HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas metodes, ir imūnsistēmas stāvokļa noteikšana. To veic iepriekš minētajā references laboratorijā. Šeit pozitīvs serums atkal tiek pārbaudīts ELISA, bet izmantojot citu testa sistēmu, kas atšķiras no iepriekšējā antigēnu, antivielu sastāva vai pašu testu formāta. Nosakot negatīvu rezultātu, trešajā testa sistēmā tiek veikts otrs pētījums. Ja vīrusa ietekme beigās netika konstatēta, tiek reģistrēts HIV infekcijas neesamība. Bet ar pozitīvu rezultātu serumu pārbauda lineārā vai imūnblotā.

Galu galā šāds algoritms rada pozitīvus, neitrālus vai negatīvus rezultātus.

Katram iedzīvotājam jāzina, ka viņam ir pieejama HIV diagnostika. AIDS var identificēt privātās, pašvaldības vai valsts veselības aprūpes iestādēs.

Protams, vīrusa identificēšana būtu maz lietderīga, ja nebūtu dažādu infekcijas ietekmēšanas metožu. Un, lai gan šobrīd joprojām nav vakcīnas, kas varētu pilnībā neitralizēt vīrusu, kompetenta diagnostika, HIV ārstēšana un turpmāka profilakse var būtiski uzlabot pacienta stāvokli, tādējādi pagarinot viņa dzīvi. Šī tēze apstiprina faktu, ka vidējais dzīves ilgums vīriešiem, kuri uzsāka savlaicīgu HIV ārstēšanu, ir 38 gadi. Sievietes, kuras sāk cīņu pret imūndeficīta vīrusu, dzīvo vidēji 41 gadu.

Kad diagnoze ir noteikta, HIV ārstēšana tiek samazināta līdz vairāku metožu izmantošanai. Aktīvo pretretrovīrusu terapiju, kas pazīstama arī kā HAART, var identificēt kā vienu no visizplatītākajām. Ja šāda veida ārstēšana tiek piemērota laikus un pareizi, tad ir iespējams būtiski palēnināt AIDS attīstību vai apturēt to pavisam.

HAART būtība ir tāda, ka vienlaikus tiek lietoti vairāki medikamenti, kuru mērķis ir ietekmēt dažādus imūndeficīta vīrusa attīstības mehānismus.

Pēc tam, kad dažādas HIV diagnostikas metodes ir noskaidrojušas inficēšanās faktu, var lietot zāles, kurām ir šāda iedarbība:

Imunoloģiskās. Imūnsistēma stabilizējas, paaugstinās T-limfocītu līmenis, atjaunojas aizsardzība pret dažādām infekcijām.

Klīniskā. Tiek novērsta AIDS attīstība un jebkādas tās izpausmes, tiek pagarināts pacientu mūžs, saglabājot visas organisma funkcijas.

Virusoloģiski. Notiek vīrusa vairošanās bloķēšana, kā rezultātā vīrusa slodze samazinās un pēc tam tiek fiksēta zemā līmenī.

Ir grūti pārvērtēt tādu slimības ietekmēšanas pasākumu nozīmi kā HIV infekcijas diagnostika, ārstēšana un profilakse. Tāpēc labākais, ko var darīt pēc pozitīva infekcijas pētījuma rezultāta, ir nekavējoties sākt cīnīties ar slimību. Kā vēl vienu metodi, kas palīdzēs to izdarīt, var noteikt virusoloģisko ārstēšanu.

Šajā gadījumā mēs runājam par tādu zāļu lietošanu, kas neļauj vīrusam pievienoties T-limfocītam un iekļūt organismā. Šīs zāles sauc par iespiešanās inhibitoriem. Konkrēts piemērs ir Cellzentry.

Vīrusu proteāzes inhibitorus var izmantot, lai nomāktu HIV. Šīs zāļu grupas mērķis ir novērst jaunu limfocītu infekciju. Tās ir tādas zāles kā Viracept, Reyataz, Kaletra utt.

Trešā lokālo zāļu grupa ir reversās transkriptāzes inhibitori. Tie ir nepieciešami, lai bloķētu fermentu, kas ļauj vīrusa RNS vairoties limfocītu kodolā. Šādas metodes var būtiski ietekmēt tādu problēmu kā HIV infekcija. AIDS diagnostika, ārstēšana un profilakse ir kvalificētu ārstu bizness, tāpēc narkotiku lietošanas algoritms ir jāizstrādā viņiem pašiem.

Ja nepieciešams, var izmantot arī imunoloģisko un klīnisko iedarbību.

Pasaules Veselības organizācija iesaka šādas HIV infekcijas apkarošanas metodes:

Seksuāli transmisīvo infekciju profilakse. Tie ir aizsargāts dzimumakts, prezervatīvu izplatīšana, STS ārstēšana un izglītības programmas.

Grūtniecēm, kurām diagnosticēts HIV, diagnostika, profilakse ar atbilstošām ķīmiskām vielām un profesionālas konsultācijas un ārstēšana.

Profilakses organizēšana, izmantojot asins pagatavojumus. Šajā gadījumā mēs runājam par pretvīrusu apstrādi un donoru pārbaudi.

Sociālā un medicīniskā palīdzība pacientiem un viņu ģimenēm.

Lai HIV diagnostika neatklātu vīrusa klātbūtni, jāievēro vienkārši drošības noteikumi:

ja inficētas personas asinis nokļūst uz ādas, tās nekavējoties jānomazgā ar ziepēm un ūdeni un pēc tam jāapstrādā ar spirtu;

ja bojājumus guva priekšmets ar vīrusa elementiem, tad brūce ir jāsaspiež, jāizspiež asinis, šī vieta jāapstrādā ar ūdeņraža peroksīdu un malas jāsadedzina ar jodu;

nekad neizmantojiet šļirces, kuru sterilitāte ir pārkāpta;

dzimumakta laikā lietojiet prezervatīvu, taču labāk sākotnēji pārbaudīt partneri, vai nav infekcijas.

Pateicoties tam, ka HIV diagnostika nestāv uz vietas, tūkstošiem cilvēku iegūst iespēju laicīgi uzsākt ārstēšanu un būtiski palielināt dzīves ilgumu. Galvenais ir neignorēt acīmredzamos simptomus un nebaidīties doties pie ārsta.

HIV infekcijas laboratoriskā diagnostika

HIV infekcijas pārbaudei tiek pakļauti:

2. Personas ar aizdomām vai apstiprinātu diagnozi: bakteriāla infekcija bērniem līdz 13 gadu vecumam, daudzkārtēja un recidivējoša; barības vada, trahejas, bronhu vai plaušu kandidoze; invazīvs dzemdes kakla vēzis; izplatīta vai ekstrapulmonāra kokcidioidomikoze; ekstrapulmonāla kriptokokoze; kriptosporidioze ar caureju 1 mēnesi vai ilgāk; citomegalovīrusa bojājumi citos orgānos, izņemot aknas, liesu, limfmezglus pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi; citomegalovīrusa retinīts ar redzes zudumu; herpetiska infekcija, kas izraisa multifokālas čūlas, kas nedzīst 1 mēneša laikā, vai bronhīts, pneimonija, ezofagīts; diseminēta vai ekstrapulmonāla histoplazmoze; izosporoze ar caureju ilgāk par 1 mēnesi; plaši izplatīta vai ārpusplaušu tuberkuloze; plaušu tuberkuloze pieaugušajiem vai pusaudžiem, kas vecāki par 13 gadiem; ārpusplaušu tuberkuloze; citas mikobaktēriju izraisītas slimības, izņemot M. tuberculosis diseminēto vai ekstrapulmonālo; pneimonija, ko izraisa pneimocistis; progresējoša multifokāla leikoencefalopātija; salmonellas (izņemot Salmonella typhi) septicēmija, recidivējoša; smadzeņu toksoilāze bērniem, kas vecāki par 1 mēnesi; Kapoši sarkomas; limfoīdā intersticiālā pneimonija bērniem līdz 13 gadu vecumam; Burkitta limfoma; imūnblastiskā limfoma; primārā smadzeņu limfoma; novājēšanas sindroms, B hepatīts, HBsAg pārnēsāšana; infekciozā mononukleoze; recidivējoša herpes zoster personām, kas vecākas par 60 gadiem; seksuāli transmisīvās slimības.

Augsti specializētā laboratorijā tiek veiktas:

a) asinīs cirkulējošo antivielu, antigēnu un imūnkompleksu noteikšana; vīrusa kultivēšana, tā genoma materiāla un fermentu noteikšana;

b) imūnsistēmas šūnu saites funkciju novērtējums. Galvenā loma ir seroloģiskās diagnostikas metodēm, kas vērstas uz antivielu, kā arī patogēnu antigēnu noteikšanu asinīs un citos ķermeņa bioloģiskajos šķidrumos.

Antivielu noteikšana pret HIV tiek veikta, lai:

a) asins pārliešanas un transplantācijas drošums;

b) uzraudzība, testēšana, lai uzraudzītu HIV infekcijas izplatību un pētītu tās izplatības dinamiku konkrētā populācijā;

c) HIV infekcijas diagnostika, t.i., brīvprātīga asins seruma pārbaude praktiski veseliem cilvēkiem vai pacientiem ar dažādām HIV infekcijai vai AIDS līdzīgām klīniskām pazīmēm un simptomiem.

HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas sistēma balstās uz trīs posmu principu. Pirmais posms ir skrīnings, kas paredzēts, lai veiktu primārās asins analīzes, lai noteiktu antivielu klātbūtni pret HIV proteīniem. Otrais posms ir atsauces – tas ļauj ar speciālu metodisko paņēmienu palīdzību noskaidrot (apstiprināt) skrīninga posmā iegūto primāro pozitīvo rezultātu. Trešais posms - eksperts, paredzēts iepriekšējos laboratoriskās diagnostikas posmos konstatēto HIV infekcijas marķieru esamības un specifikas galīgai pārbaudei. Nepieciešamība pēc vairākiem laboratoriskās diagnostikas posmiem galvenokārt ir saistīta ar ekonomiskiem apsvērumiem.

Praksē tiek izmantoti vairāki testi, lai ar pietiekamu ticamības pakāpi identificētu ar HIV inficētus cilvēkus:

ELISA (ELISA) tests (ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests) pirmā līmeņa noteikšanai ir raksturīgs ar augstu jutību, lai gan ar mazāku specifiskumu nekā turpmāk minētajam;

Imūnblots (Western-blot), ļoti specifisks un visbiežāk izmantotais tests, lai atšķirtu HIV-1 un HIV-2;

Antigenēmijas p25 tests, efektīvs infekcijas sākuma stadijās;

Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR).

Asins paraugu masveida skrīninga gadījumos ieteicams pārbaudīt pētāmo personu grupas serumu maisījumus, kas sastādīti tā, lai katra parauga galīgais atšķaidījums nepārsniegtu 1:100. Ja seruma un strāvas maisījums ir pozitīvs, tiek pārbaudīts katrs pozitīvā maisījuma serums. Šī metode neizraisa jutības zudumu gan ELISA, gan imūnblotā, bet samazina darbaspēka izmaksas un sākotnējās izmeklēšanas izmaksas par 60-80%.

HIV infekcijas primārajā serodiagnozē kopējās antivielas nosaka, izmantojot skrīninga skrīninga testus – ELISA un aglutinācijas reakcijas. Otrajā (šķīrējtiesas) posmā tiek izmantots sarežģītāks tests - imūnblots, kas ļauj ne tikai apstiprināt vai noraidīt sākotnējo secinājumu, bet arī to izdarīt, nosakot antivielas pret atsevišķiem vīrusa proteīniem.

Saistīts imūnsorbcijas tests(ELISA) ir galvenā un visplašāk izmantotā metode HIV antivielu noteikšanai. Bet ELISA izmantošanas trūkumi HIV infekcijas serodiagnozē ietver biežus viltus pozitīvus rezultātus. Šajā sakarā ELISA rezultāts nav pamats, lai secinātu, ka subjekts ir HIV seropozitīvs. Tas ir saistīts ar nepietiekamu imūnsorbenta attīrīšanu no balasta proteīniem; seruma antivielu spontāna saistīšanās ar plastmasu, ja tās zonas, kuras neaizņem imūnsorbents, ir nepietiekami bloķētas vai nav bloķētas ar pilnīgi īpašu neitrālu proteīnu; krusteniskā mijiedarbība ar dažādu proteīnu imūnsorbenta HIV proteīniem, kas atrodas indivīdu asinīs ar noteiktiem, biežāk autoimūniem patoloģiskiem procesiem, piemēram, multiplā skleroze, SLE, tuberkuloze; ar biežu ziedošanu, infekcijas un onkoloģiskām slimībām, apdegumiem, grūtniecību, atkārtotu asins pārliešanu, orgānu, audu transplantāciju, kā arī personām, kurām tiek veikta hemodialīze; ar reimatoīdā faktora klātbūtni asinīs, bieži provocējot HIV viltus pozitīvas reakcijas; izmeklējamo cilvēku asinīs antivielu klātbūtne pret HIV gag proteīniem un, galvenais, pret proteīnu p24 (acīmredzot, antivielas veidojas pret eksogēniem vai endogēniem retrovīrusiem, kas vēl nav identificēti). Tā kā HIV serokonversijas sākumposmā anti-p24 tiek sintezēts bez problēmām, tiek veikta turpmāka imunoloģiskā uzraudzība personām ar antivielām pret HIV gag proteīniem, kā arī to izņemšana no ziedošanas.

Enzīmu imūntesta jutīgums un specifika nepārtraukti pieaug. Rezultātā ceturtās paaudzes ELISA diagnostikas spēju ziņā nav zemāka par imūnblotēšanu, un to var izmantot ne tikai skrīningā, bet arī HIV infekcijas diagnostikas apstiprināšanas stadijā [Smolskaya T. T., 1997].

Imunoblotēšana ir pēdējā seroloģiskās diagnostikas metode, kas ļauj izdarīt galīgo secinājumu par pētāmās personas HIV pozitivitāti vai negatīvismu.

Ir skaidra korelācija starp serumu pētījuma rezultātiem imūnblotā un ELISA - divreiz pozitīvs ELISA ar dažādām testu sistēmām, serums 97-98% gadījumu pēc tam imūnblotā izrādās HIV pozitīvs. Ja serumi ELISA testā izrādījās pozitīvi tikai vienā no divām izmantotajām testa sistēmām, imūnblotā tie tiek atklāti pozitīvi tikai 4% gadījumu. 5% gadījumu, veicot apstiprinošus pētījumus cilvēkiem ar pozitīviem datiem, ELISA imūnblots var dot "nenoteiktus" rezultātus, un to vidū aptuveni 20% gadījumu antivielas pret HIV-1 gag proteīniem (p55, p25, p18 ). Antivielu klātbūtne tikai pret HIV-1 gag proteīniem ir iemesls papildu asins seruma pārbaudei HIV-2 infekcijas noteikšanai.

Imunoblotēšanas rezultātu novērtējums tiek veikts stingri saskaņā ar instrukcijām, kas pievienotas testa sistēmai. Ja nav norādījumu par rezultātu interpretāciju, jāizmanto PVO kritēriji.

Saņemot pozitīvus testa rezultātus HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas references stadijā un negatīvu pētījuma rezultātu ar imūnblotēšanas metodi, 6 mēnešus pēc pirmās pārbaudes tiek veikta obligāta atkārtota ekspertīze.

Ja imunoblotēšanas rezultāti 12 mēnešus pēc pirmā parauga izpētes paliek negatīvi vai nenoteikti, tad, ja nav riska faktoru, klīnisku simptomu vai citu ar HIV infekciju saistītu faktoru, subjekts tiek izņemts no ambulatorās novērošanas.

Starp seroloģiskajām metodēm nenoteiktu rezultātu gadījumā imūnblotu izmanto kā eksperta diagnozi. radioimunoprecipitācija(RIP). Tas ir balstīts uz vīrusu proteīnu izmantošanu, kas marķēti ar radioaktīvo jodu, un nogulsnes tiek noteiktas, izmantojot beta skaitītājus. Metodes trūkumi ietver augstās aprīkojuma izmaksas, nepieciešamību aprīkot īpašas telpas šiem nolūkiem.

Personas, kurām diagnosticēta HIV infekcija, tiek pakļautas pastāvīgai dinamiskai uzraudzībai ar obligātu laboratorisko izmeklēšanu ik pēc 6 mēnešiem.

Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) atklāj iepriekš pavairotās nukleotīdu sekvences, kas raksturīgas konkrētā patogēna genomam. Izolēta gēna vai tā fragmenta pavairošana, ko sauc par amplifikāciju, PCR ļauj veikt in vitro, izmantojot enzīmu termostabilu DNS polimerāzi. 2-3 stundu laikā PCR ļauj iegūt miljoniem konkrētas vīrusa sadaļas kopiju. HIV infekcijas laikā no šūnu RNS, tajā skaitā vīrusa RNS, ja tā tika reproducēta šūnā vai tika integrēta tās genomā, izmantojot reverso transkripciju un hibridizāciju ar marķētām oligonukleotīdu "zondēm", tiek iegūts pietiekams daudzums provīrusu DNS, lai. analīze, kas tiek atklāta un raksturota kvantitatīvi, kā arī saistībā ar piederību HIV genomam, izmantojot radioaktīvo vai citu zondes marķējumu, nosakot DNS un vīrusam raksturīgo aminoskābju secību homoloģiju. PCR jutība ir vīrusu gēnu noteikšana vienā no pieciem tūkstošiem šūnu.

PCR, tostarp kvantitatīvo, var izmantot tikai, lai noteiktu vīrusu slodzi uz plazmu, lai atrisinātu jautājumu par pacienta medikamentozās ārstēšanas sākšanu vai pretretrovīrusu zāļu maiņu. PCR nevar ieteikt HIV infekcijas diagnosticēšanai, jo pat visprogresīvākās tā formulēšanas metodes un reaģenti ļauj noteikt vīrusu slodzi, kas nav zemāka par noteiktu līmeni - 50 kopijas / ml. Un PCR iestatīšanas sarežģītība un augstās izmaksas (apmēram 200 USD) atceļ tās plašo izmantošanu kā ikdienas HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas metodi. Tādējādi PCR joprojām ir neaizstājama tikai vīrusu slodzes plazmā novērtēšanai pacientiem ar jau noteiktu HIV infekcijas diagnozi, lai atrisinātu pacienta terapijas jautājumu.

Shematiski HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas posmi ir parādīti attēlā. viens.

Rīsi. 1. HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas stadijas

HIV infekcijas laikā iestājas "tumšā laboratorijas loga" periods, kad anti-HIV antivielu daudzums ir nepietiekams testa sistēmu jutībai. Šis periods svārstās no vienas nedēļas līdz trim mēnešiem no HIV inficēšanās brīža atkarībā no testa sistēmas jutības līmeņa. Ņemot vērā šo parādību, grūtības rodas, izmeklējot ziedotās asinis no personām, kuras atrodas minētajā HIV infekcijas periodā. Tāpēc lielākajā daļā pasaules valstu ir ieviesta sistēma asins lietošanai tikai pēc 3-6 mēnešu uzglabāšanas, lai veiktu šo asins devu donoru obligāto HIV inficēšanās izmeklējumu. un tā sastāvdaļas.

Primāro izpausmju stadiju raksturo replikācijas procesa aktivitāte. Iegūtā virēmija un antigēnēmija izraisa specifisku IgM klases antivielu veidošanos: anti-p24, anti-gp41, anti-gp120. P24 antigēnu dažiem inficētajiem var noteikt asinīs ar ELISA palīdzību jau 2 nedēļas pēc inficēšanās, un to var noteikt līdz 8. nedēļai. Turklāt HIV infekcijas klīniskajā gaitā tiek novērots otrs p24 proteīna satura pieaugums asinīs, tas attiecas uz AIDS stadijas veidošanās periodu.

Pilnīgas serokonversijas parādīšanās, kad perifērajās asinīs tiek reģistrēts augsts IgG klases specifisko antivielu līmenis pret HIV gp41, p24, gpl20 strukturālajiem proteīniem, ievērojami atvieglo HIV infekcijas diagnostiku. Lielākā daļa komerciālo komplektu ir paredzēti, lai norādītu tikai šādas antivielas.

Grūtības noteikt antivielas HIV inficētiem pacientiem var rasties masīvas virēmijas un antigenēmijas periodos, kad pieejamās specifiskās antivielas asinīs tiek izmantotas līdz vīrusu daļiņu saistīšanai, un replikācijas process ir priekšā jaunu pretvīrusu antivielu ražošanai.

Indivīdiem ar sākotnēji novājinātu imūnsistēmu virēmija un antigenēmija parādās agrāk un saglabājas augstā līmenī līdz slimības iznākumam. Tajā pašā laikā šādiem pacientiem ir zems brīvo HIV antivielu saturs divu iemeslu dēļ - nepietiekama B-limfocītu antivielu ražošana un virionu un šķīstošo HIV proteīnu saistīšanās ar antivielām, tāpēc infekcijas noteikšanai testu sistēmas ar paaugstinātu. nepieciešama analīzes metožu jutība vai modifikācijas, nodrošinot antivielu atbrīvošanās stadiju no imūnkompleksiem.

Neskatoties uz specifisko HIV infekcijas marķieru pārpilnību, visbiežāk tiek noteikts kopējo antivielu klātbūtne pret HIV proteīniem. Termins "kopā" ​​nozīmē divu klašu antivielu (IgG un IgM) klātbūtni un plašu antivielu klāstu pret dažādiem, galvenokārt strukturāliem, HIV proteīniem.

CD4 šūnu noteikšana. Galvenais klīniskais un laboratoriskais rādītājs HIV infekcijas stadijas, pacientu imūnsistēmas destrukcijas pakāpes diagnosticēšanai ikdienā, bija CD4+ limfocītu satura noteikšana: līmeņa pazemināšanās zem 200 šūnām/mm3 ir Galvenais AIDS diagnosticēšanas kritērijs. Tiek uzskatīts, ka visiem HIV inficētiem indivīdiem ar CD4+ limfocītu skaitu 200 šūnām/mm3 vai mazāk ir nepieciešama gan pretvīrusu terapija, gan pneumocystis pneimonijas profilakse. Un, lai gan 1/3 HIV inficēto cilvēku, kuriem CO4+ limfocītu skaits ir mazāks par 200 šūnām/mm3, nav klīnisku izpausmju, pieredze liecina, ka viņiem simptomi parādās nākamo 2 mēnešu laikā, tāpēc viņi visi tiek uzskatīti par AIDS slimniekiem. posms.

HIV infekcijas diagnostika

Kā zināt, vai cilvēkam ir HIV? Visizplatītākā HIV infekcijas diagnostikas metode ir ar enzīmu saistītā imūnsorbcijas pārbaude (ELISA). ELISA testu sistēmas izmanto, lai noteiktu antivielas pret HIV asins serumā.

HIV infekciju apstiprina divi dažādi testi – skrīninga tests un apstiprinājuma tests. To augstās jutības dēļ skrīninga testi var sniegt viltus pozitīvus rezultātus. Tāpēc parasti, kad tiek iegūts sākotnējais pozitīvs rezultāts, tiek ņemts viens un tas pats asins paraugs un skrīninga tests tiek dublēts otrreiz, un, ja tas atkal ir pozitīvs, tikai tad tiek veikta cita veida apstiprinoša pārbaude. Apstiprinošus testus veic tikai tiem asins paraugiem, kuru tests atkārtoti ir pozitīvs (ir "reaktīvi").

Visizplatītākais skrīninga tests ir enzīmu imūntests (ELISA). Parasti imūnblotēšanu izmanto kā apstiprinošu testu. Divu dažādu testu veidu kombinācija nodrošina iegūto rezultātu "augstu precizitāti".

Skrīninga testu sistēmās tiek izmantoti mākslīgi radīti HIV proteīni, kas “noķer” specifiskas antivielas, ko organisms ražo, reaģējot uz vīrusu proteīniem. Kad antivielas ir noķertas, tās "var noteikt ar reaģentiem, kas tiek lietoti kopā ar indikatoru, piemēram, fermentu, kas izraisa krāsas maiņu". Krāsu izmaiņas nolasa iekārta, kas nosaka rezultātu. Imunoblotēšana darbojas līdzīgi, taču tā izmanto elektrisko lauku, kas izšķir dažādas sastāvdaļas, pamatojoties uz to molekulmasu. Tas ļauj identificēt antivielas pret specifiskiem vīrusu antigēniem, kuras pēc tam tiek attēlotas uz papīra kā atšķiramas "svītras". Mūsdienu testu sistēmas lielākajai daļai cilvēku var noteikt HIV infekciju 3-5 nedēļu laikā.

Ja pastāvēja risks inficēties ar HIV, kad es varu veikt testu?

Enzīmu imūntests (ELISA), ko izmanto HIV diagnosticēšanai, var parādīt rezultātus tikai vairākas nedēļas pēc inficēšanās. Šāda veida analīze nenosaka pašu vīrusu, bet gan antivielas pret to. Dažiem cilvēkiem antivielas pietiekamā daudzumā ir asinīs pēc 2 nedēļām. Tomēr lielākajai daļai cilvēku ir nepieciešams ilgāks laiks, lai izveidotu antivielas (serokonversija). Lai testa rezultāts būtu pietiekami ticams, ir nepieciešams, lai kopš riskantās situācijas būtu pagājuši aptuveni 3 mēneši. Dažkārt antivielu veidošanās aizņem ilgāku laiku – no 3 līdz 6 mēnešiem.

Ja pēc 3 mēnešiem testa rezultāts ir negatīvs, vai pēc 6 mēnešiem ir nepieciešams veikt otru pārbaudi?

Lielākajai daļai cilvēku tests ir diezgan uzticams pēc 3 mēnešiem (vairumam antivielas parādās pat agrāk). Jūs varat pilnībā novērst inficēšanās iespēju, nokārtojot testu pēc 6 mēnešiem.

Cik ilgi man jāgaida testa rezultāti?

Tas ir atkarīgs no tās laboratorijas īpašībām, kurā tiek veikta pārbaude. ELISA testu var veikt vienas dienas laikā, bet lielākajā daļā laboratoriju šis periods var būt no 1-2 dienām līdz 2 nedēļām. Ņemot vērā, ka rezultātu gaidīšana var būt ļoti nomākta periods, vislabāk ir iepriekš noskaidrot šo jautājumu pirms analīzes veikšanas. Varat arī uzzināt, vai nedēļas nogales un brīvdienas ietekmēs pārbaudes laiku.

Cik uzticams ir pozitīvs testa rezultāts?

Dažkārt ELISA rezultāti ir viltus pozitīvi (apmēram 1% gadījumu), šī rezultāta iemesls var būt grūtniecība, dažādas vīrusu infekcijas, kā arī vienkārša nelaime. Pēc pozitīva rezultāta saņemšanas ir nepieciešams precīzāks tests - imūnblots, pēc kura rezultātiem tiek veikta diagnoze. Pozitīvs imūnblota rezultāts pēc pozitīva ELISA ir 99,9% uzticams - tā ir jebkura medicīniskā testa maksimālā precizitāte. Ja imūnblots ir negatīvs, tad pirmais tests bija kļūdaini pozitīvs, un patiesībā cilvēkam nav HIV.

Kas ir nenoteikts (šaubīgs) rezultāts?

Ja ELISA ir pozitīva vai negatīva, imūnblots var būt pozitīvs, negatīvs vai nenoteikts. Nenoteikts imūnblota rezultāts, t.i. vismaz viena vīrusa proteīna klātbūtni imūnblotā var novērot, ja infekcija notikusi nesen un asinīs joprojām ir maz antivielu pret HIV, un tādā gadījumā imūnblots pēc kāda laika kļūs pozitīvs. Nenoteikts rezultāts var parādīties arī tad, ja nav HIV infekcijas ar hepatītu, dažām hroniskām vielmaiņas slimībām vai grūtniecības laikā. Šajā gadījumā vai nu imūnblots kļūs negatīvs, vai arī tiks atrasts nenoteiktā rezultāta cēlonis.

Vai, piesakoties darbam, ir jāveic HIV tests?

Saskaņā ar Krievijas Federācijas tiesību aktiem obligātās HIV pārbaudes var veikt tikai asins donori, ārvalstu pilsoņi un bezvalstnieki, kuri vēlas ieceļot Krievijas Federācijas teritorijā uz laiku, kas pārsniedz trīs mēnešus, kā arī medicīnas darbinieki, kas strādā tieši. ar asinīm; personas aizturēšanas vietās. Visi pārējie iedzīvotāji HIV testu veic brīvprātīgi.

HIV infekcija Slimība, ko izraisa inficēšanās ar cilvēka imūndeficīta vīrusu (HIV).

HIV ir RNS vīruss, kas pieder retrovīrusu ģimenei.

Kopēja retrovīrusu īpašība ir enzīma – reversās transkriptāzes (revertāzes) klātbūtne, kas no RNS "noņem" ģenētiski precīzu kopiju DNS formā. Pēc morfoloģijas, genoma struktūras un citām pazīmēm HIV pieder lentivīrusu ģimenei, tas ir, lēnas infekcijas vīrusiem. Šīs ģimenes vīrusu izraisīto slimību kopīgās pazīmes ir: ilgs inkubācijas periods, kam nav precīzu datumu (no 1 mēneša līdz 10 gadiem vai vairāk); nemanāms, asimptomātisks slimības sākums; lēni augoša klīniskā aina; patoģenēzes starpniecība caur imūnsistēmu un vīrusa augstais ģenētiskās variabilitātes līmenis. Tas viss ievērojami sarežģī HIV infekcijas diagnostiku, ārstēšanu un profilaksi.

Pašlaik ir zināmi divi HIV veidi: HIV-1 un HIV-2. HIV-2 izraisītajai slimībai ir raksturīga lēna dinamika un garāks kurss.

Epidemioloģija un pārnešanas veidi:

HIV infekcija ir antroponoze, vienīgais patogēna avots cilvēkam ir vīrusa nēsātājs un AIDS slimnieks.

Vīrusu daļiņas (virioni) atrodas visos ķermeņa bioloģiskajos šķidrumos, bet dažādās koncentrācijās. Vislielākais vīrusa saturs ir asinīs un sēklu šķidrumā.

Vīruss tiek pārraidīts trīs veidos:

no mātes līdz auglim/jaundzimušajam.

HIV netiek pārnests parasta sadzīves kontakta un gaisa pilienu ceļā. Nav konstatēti HIV pārnešanas gadījumi caur asinssūcēju kukaiņu kodumiem.

Tomēr HIV lipīgums nav tik augsts kā citām STI. Tādējādi no vairāk nekā 1600 aptaujātajiem HIV inficēto seksuālajiem partneriem tikai 15% inficējās ar šo vīrusu.

HIV infekcijas attīstību nosaka divi savstarpēji mijiedarbojoši faktori: galvenā HIV patogēnā īpašība - novājināt inficēta cilvēka imūnsistēmu un specifiskā organisma imūnreakcija, kas veidojas slimības gaitā.

HIV ir pantropēns, bet galvenās tā mērķa šūnas ir T-helpers, kas uz membrānas nēsā simtiem CD4+ receptoru molekulu. Organismā vīruss no mazāk agresīva stāvokļa pārvēršas agresīvākā, kas izpaužas kā progresējoša CD4+ limfocītu skaita samazināšanās asinīs līdz to pilnīgai izzušanai un noved pie klīniskās ainas pasliktināšanās.

No inficēšanās brīža līdz specifisku pretvīrusu antivielu parādīšanās notiek, kā likums, 6-8 nedēļas. Periods starp inficēšanos un nosakāmu HIV antivielu parādīšanos asins serumā tiek saukts par "loga" periodu.

No vienas puses, imūnsistēma ir vīrusa mērķis, no otras puses, tā pati ražo pret to specifiskas antivielas. Tajā pašā laikā imūnsistēmā attīstās autoimūni procesi, kas pastiprina ķermeņa šūnu un audu iznīcināšanas procesu.

HIV infekciju raksturo specifiska klīniskā attēla trūkums, un tās diagnoze parasti tiek veikta, pamatojoties uz rūpīgi savāktu anamnēzi, apvienojumā ar vairākām pazīmēm, ko apstiprina laboratoriskā diagnostika. 1983. gadā PVO izstrādāja noteiktus kritērijus, pēc kuriem var noteikt HIV infekcijas klātbūtni bez seroloģiskās diagnostikas (kritēriji "Bangi"). Tie ietver:

- ķermeņa masas samazināšanās par vairāk nekā 10% no sākotnējā;

- hroniska caureja ilgāk par vienu mēnesi;

- ilgstošs drudzis vienu mēnesi (pastāvīgs vai periodisks).

- pastāvīgs klepus ilgāk par vienu mēnesi;

- ģeneralizēts niezošs dermatīts;

- herpes zoster anamnēzē;

- hroniska progresējoša vai izplatīta herpes infekcija (herpes simplex);

HIV infekcijas diagnozi pēc šiem kritērijiem var noteikt pacientam, ja viņam ir vienlaikus vismaz divas "lielas" pazīmes un viena "maza". Pietiekams pamats AIDS diagnosticēšanai var būt ģeneralizētas Kapoši sarkomas vai kriptokoku meningīta atklāšana pacientam. Šo kritēriju zemās jutības un specifiskuma dēļ PVO pēc tam pieprasīja diagnozes seroloģisku apstiprinājumu.

HIV infekcijas klīniskā klasifikācija:

Primāro izpausmju stadija:

A. akūta febrila fāze;

B. asimptomātiska fāze;

B. pastāvīga ģeneralizēta limfadenopātija.

Sekundāro slimību stadija:

A. Svara zudums mazāks par 10 kg, virspusēji baktēriju, vīrusu, sēnīšu ādas un gļotādu bojājumi, herpes zoster, atkārtots faringīts, sinusīts.

B. Progresējošs svara zudums par vairāk nekā 10 kg, neizskaidrojama caureja, drudzis ilgāk par 1 mēnesi, matains leikoplakija, plaušu tuberkuloze, atkārtoti vai pastāvīgi baktēriju, sēnīšu, vīrusu, vienšūņu izraisīti iekšējo orgānu bojājumi (bez izplatīšanās) vai dziļi orgānu bojājumi. āda un gļotādas, atkārtota un izplatīta herpes zoster, lokalizēta Kapoši sarkoma.

Antivielu klātbūtne pret HIV atkarībā no slimības stadijas.

Antivielas pret HIV asinīs

HIV testa rezultāts

II. Primārās izpausmes

B. Asimptomātiska fāze

III. Sekundārās slimības

Pēc vīrusa iekļūšanas organismā tas vairojas asinīs. 50% inficēto personu šajā periodā var attīstīties prodromāls stāvoklis, ko pavada ķermeņa temperatūras paaugstināšanās līdz 38,5-39,5 ° C un citi mononukleozei līdzīgi simptomi un ilgst no trim līdz 10 dienām. Šis stāvoklis pāriet, atgādinot atveseļošanās periodu pēc gripas infekcijas.

Sākot ar slimības 6.-8.nedēļu, paaugstinās antivielu līmenis asinīs, tas ir, serokonversija. Šajā periodā var attīstīties ģeneralizēta limfadenopātija un neliels imūndeficīts, bet dažiem pacientiem HIV infekcijas klīniskās izpausmes ir minimālas. Ar izteiktu iegūtā cilvēka imūndeficīta sindromu (AIDS) strauji attīstās iekšējo orgānu oportūnistiskās infekcijas, tiek ietekmēta nervu sistēma. Uz ādas un gļotādām tiek novērota saprofītiskās floras aktivācija. Attīstās Kapoši sarkoma un citi audzēji. Var aktivizēties tādas infekcijas kā tuberkuloze, sifiliss, dziļās mikozes u.c.Pneumocystis pneimonija ir tipiska saslimšana ar HIV inficētiem cilvēkiem. Dažiem pacientiem ir palielinātas aknas un liesa, kas ir nelabvēlīga pazīme, kas liecina par procesa strauju progresu. Ir HIV infekcijas cerebrālās formas – piemēram, rauga sēnīšu izraisīts meningīts, toksoplazmas smadzeņu abscesi, akūts un subakūts encefalīts, izolēti smadzeņu audzēji (limfomas). Pacientiem var būt dažādi asinsvadu bojājumi.

Nespecifiskās diagnostikas metodes ietver: T-limfocītu subpopulāciju satura noteikšana asinīs, T-limfocītu reaktivitātes aktivitātes novērtējums perifērajās asinīs vai biopsijas materiālā.

Īpašas diagnostikas metodes ietver:

— provīrusa DNS vai HIV vīrusa RNS noteikšana cilvēka šūnās ar PCR;

- nobriedušu infekciozu virionu noteikšana bioloģiskajos šķidrumos un šūnās;

- vīrusa šķīstošo proteīnu (antigēnu) noteikšana;

- antivielu noteikšana pret HIV (ELISA, imūnblots, aglutinācijas reakcija, radioimūnprecipitācija).

Visizplatītākā skrīninga diagnostikas metode ir ELISA. Negatīvs rezultāts var norādīt:

- par infekcijas neesamību;

- par pētījuma veikšanu pirms serokonversijas sākuma ("loga" periodā vai citos antivielu titra izzušanas periodos).

Pozitīvie rezultāti ir patiesi vai nepatiesi. Viltus pozitīvus rezultātus var iegūt, izmeklējot pacientus ar hroniskām infekcijas, autoimūnām vai onkoloģiskām slimībām, neinficētas grūtnieces, pacientus pēc asins pārliešanas un pacientus ar hronisku alkoholismu. Agrākais HIV antivielu noteikšanas laiks ir 3-4 nedēļas no inficēšanās dienas.

Apstiprinoša analīze. Imūnblots.

Pēc skrīninga testa visi pozitīvie rezultāti tiek pārbaudīti citā ELISA sistēmā un pēc tam - jutīgākā testā - imūnblots. Serumus, kas apstiprināti ar šo testu, var uzskatīt par patiesi pozitīvu.

Pirms HIV testa veikšanas pacientam obligāti jākonsultējas (konsultācija pirms testa) par iemesliem, kuru dēļ ir nepieciešams veikt analīzi, un pēc rezultāta saņemšanas attiecīgi jāveic pēctests. konsultācijas, lai izskaidrotu pētījuma rezultātus. Visos diagnostikas un turpmākās ārstēšanas posmos jāievēro konfidencialitāte.

Ir četras galvenās pieejas HIV infekcijas ārstēšanai: etioloģiska, imūnstimulējoša, imūnaizstājējdarbība un patoģenētiska (pret sekundārajām infekcijām).

Citu klašu nukleotīdu analogi vai inhibitori spēj nomākt vīrusa reverso transkriptāzi. Pirmās zāles AIDS slimnieku ārstēšanai bija nukleotīdu analogs - azidotimidīns. Zāles izraisa blakusparādības, kas galvenokārt ietekmē hematopoēzi, un lielākajai daļai pacientu ar ilgstošu lietošanu (vairāk nekā 6 mēnešus) veidojas rezistence pret to. Šobrīd tiek lietoti vairāk nekā 10 jauni medikamenti – proteāžu un reversās transkriptāzes inhibitori. Ātrais HIV mutācijas ātrums organismā, ko papildina pret ārstēšanu rezistentu celmu parādīšanās, ievērojami sarežģī efektīvu zāļu radīšanas procesu.

Tikai kombinēta pieeja var ierobežot vīrusa replikāciju un novērst zāļu rezistences attīstību. Trīskāršā pretretrovīrusu terapija (trīs zāļu kombinācija, kuras pamatā ir divi nukleozīdu analogi un proteāzes inhibitori) ir kļuvusi par standartu.

HIV infekcijas diagnostika ietver divus posmus: faktiskā HIV infekcijas fakta konstatēšanu un slimības stadijas noteikšanu. Stadijas noteikšanai nesaraujami seko slimības gaitas rakstura noskaidrošana un pēc tam prognozes veidošana šim pacientam, kā arī ārstēšanas taktikas izvēle.

Kā zināms, jebkuras infekcijas slimības diagnoze balstās uz epidemioloģisko, klīnisko un laboratorisko datu salīdzināšanu, un kādas no šo datu grupu vērtības pārspīlēšana var radīt diagnostikas kļūdas.

HIV infekcijas epidemioloģiskie kritēriji .

HIV infekcijas diagnosticēšanas pirmais solis ir epidemioloģiskās vēstures un citu epidemioloģisko datu apkopošana par izmeklējamo pacientu. Epidemioloģisko datu trūkums var būtiski sarežģīt HIV infekcijas diagnostiku un apgrūtināt pretepidēmijas pasākumu īstenošanu.

Epidemioloģiskie kritēriji dažkārt var būt izšķiroši HIV infekcijas diagnozes noteikšanā, taču tiem var būt arī sekundāra nozīme. Augstas inficēšanās iespējamības kritērijs ir tādu inficēšanās riska faktoru konstatēšana izmeklējamai personai kā donoru asiņu pārliešana, kas saņemta no HIV inficētas personas, HIV inficēta bērna piedzimšana izmeklētajai sievietei. Inficēšanās iespējamība ir liela, ja pētāmā persona piedzimusi no HIV inficētas mātes, dzimumkontakts ar HIV inficētu personu, kopīga parenterāla narkotiku lietošana ar HIV inficētu personu. Zināms inficēšanās risks tiek konstatēts ar uzticamu parenterālu iejaukšanos, ko veic ar instrumentiem, kas, iespējams, ir inficēti ar HIV (t.i., nozokomiālos un līdzīgos HIV infekcijas perēkļos ar parenterālu HIV pārnešanu).

Par ievērojamu inficēšanās risku var runāt gadījumos, kad subjekts ziņo par dzimumaktu vai parenterālu narkotiku lietošanu apgabalos, kur HIV ir ievērojami izplatīts iedzīvotāju grupā, pie kuras pieder subjekts.

Tajā pašā laikā dzimumakts un narkotiku lietošana teritorijās ar zemu HIV infekcijas izplatību neizslēdz HIV infekcijas iespējamību.

Uzticamu HIV infekcijas riska faktoru trūkums var radīt šaubas par laboratorijas datiem. Šādos gadījumos ieteicams atkārtot laboratorijas izmeklējumus.

HIV infekcijas klīniskie kritēriji.

Savlaicīga HIV infekcijas diagnostika nodrošina savlaicīgu pacienta ārstēšanu un profilakses pasākumu ieviešanu uzliesmojuma gadījumā, novēršot nejaušu vīrusa pārnešanu no inficētas personas uz veselu cilvēku. Visbeidzot, agrīna diagnostika ļauj veikt savlaicīgu klīnisko pārbaudi, psiholoģisko palīdzību un sociālo rehabilitāciju. Pirmie panākumi pacientu ārstēšanā ļauj ar agrīnu diagnostiku ievērojami pagarināt pacientu dzīvi un pat cerēt uz izārstēšanos.

Agrīnas diagnostikas sarežģītība, pamatojoties uz klīnisko ainu, ir simptomu nespecifiskums, polimorfisms II stadijā, nemaz nerunājot par klīnikas neesamību I stadijā. Tomēr visos nemotivēta noguruma gadījumos ir nakts svīšana. , galvassāpes, īpaši uz īslaicīga drudža fona (3-10 dienas) ar temperatūru 38-38,50 C, ko pavada tonsilīts, ilgstošas ​​caurejas sindroms, svara zudums īsā laikā, vispirms ir jāizslēdz HIV infekcija. Diagnozi šajā periodā palīdz noteikt dažādu ādas izsitumu (plankumi, papulas, rozolas, pustulas) vai furunkulozes identificēšana objektīvas izmeklēšanas laikā. Limfadenopātijas klātbūtne pat gadījumos, kad palielinās viena limfmezglu grupa un vēl jo vairāk ar ģeneralizētu limfmezglu grupu, ir lielāka iespēja klīniski aizdomas par HIV infekciju. Slimību īpaši raksturo aizmugurējo kakla, submandibulāro, supra- un subclavian, paduses un elkoņa kaula limfmezglu palielināšanās. Parasti tie palielinās līdz 2-5 cm diametrā, ir nesāpīgi, blīvi elastīgi pēc konsistences, laiku pa laikam saplūst konglomerātā. HIV infekcijai ir ļoti raksturīgi palielināt vairāk nekā vienu mezglu, vairāk nekā vienu grupu (izņemot cirkšņu), kas ilgst vairāk nekā 3 mēnešus.

Bieži slimības sākuma fāzē psihoneiroloģisku simptomu klātbūtne: trauksme, depresija, nestabila gaita, samazināts redzes asums, konvulsīvi krampji ar psihoemocionālās sfēras bojājuma pazīmēm (atmiņas traucējumi, aizmāršība, neatbilstoša uzvedība, trulums emocijām). Līdz raksturīgākajām iezīmēm HIV infekcijas agrīnās stadijas ir:

1. Mazāk nekā 10% svara zudums;

2. Izmaiņas ādā un gļotādās (seborejas dermatīts, folikulīts, nieze, psoriāze, nagu sēnīšu infekcijas, atkārtotas mutes čūlas, nekrotizējošs gingivīts);

3 . Herpes zoster personām, kas jaunākas par 50 gadiem;

4. Atkārtotas augšējo elpceļu infekcijas;

AT starpposms Visraksturīgākās ir slimības, kurām raksturīga paplašinātas superinfekcijas klīnika, kas veidojas imūndeficīta rezultātā:

1 . Progresīvs svara zudums virs 10%;

2 . Nezināmas izcelsmes caureja, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi;

3 . mutes dobuma kandidoze;

4 . Leikoplakija;

5. Plaušu tuberkuloze;

6. Perifēra neiropātija;

7. Lokalizētas Kapoši sarkomas formas;

8. Izplatošs herpes zoster;

9. Smaga, atkārtota bakteriāla infekcija (pneimonija, sinusīts, piomiozīts).

Priekš vēlīnā stadija, kas ļauj diagnosticēt HIV infekciju vai jebkurā gadījumā veikt diferenciāldiagnozi, ietver:

1. Pneumocystis pneimonija;

2 . Toksoplazmoze;

3. Kriptokokoze;

4. CMV infekcija;

5. Herpes simplex;

6. Progresējoša multifokāla leikoencefalopātija;

7. Histoplazmoze;

8. Candida ezofagīts;

9. MAC infekcija;

10. Salmonellas septicēmija;

11. Ārpusplaušu tuberkuloze;

12. Limfoma, Kapoši sarkoma;

13. kaheksija;

14. HIV encefalopātija.

1988. gadā PVO ierosināja veikt klīnisko diagnostiku simptomu rādītājs pieejams pacientiem, kuriem ir aizdomas par HIV infekciju:

Pastāvīga ģeneralizēta limfadenopātija 0

Izmaiņas ādā un gļotādās 1

Svara zudums 1

Smags nogurums 1

Herpes simplex 2

Caureja, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi. 4

Drudzis, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi. 4

Svara zudums par 10% 4

Plaušu tuberkuloze 5

Atkārtota bakteriāla infekcija 5

Mutes leikoplakija 5

Stomatīts, mutes piena sēnīte 5

Lokalizēta Kapoši sarkoma 8

Kaheksija 12

Tajā pašā laikā tiek lēsta punktu summa no 0 līdz 3, jo HIV infekcijas iespējamība ir ļoti maza, 4-11 punkti - slimība ir iespējama, un 12 un vairāk punkti - ļoti iespējama.

Kopumā HIV infekcijas klīniskā diagnoze, pirmkārt, ir ar AIDS saistītas patoloģijas spektra diagnostika pacientam ar sekundāru imūndeficītu. Tā kā HIV indikatorslimības ietver 23 nosoloģiskās formas, vispiemērotākā ir sindromiskā pieeja diagnozei. Gandrīz vienmēr pacientam ir vispārējas intoksikācijas sindroms (nemotivēts vājums, letarģija, nogurums), kas attīstās uz ilgstošas ​​nelielas vai nezināmas izcelsmes drudža fona, biežāk naktīs un rītos, ko pavada spēcīga sviedri. Nemotivētas ģeneralizētas perifērās limfadenopātijas sindroms ir pastāvīgs, 20% gadījumu to pavada dažāda smaguma hepatosplenomegālija. Viens no vadošajiem slimības sindromiem ir bronho-plaušu patoloģijas sindroms, lai gan progresējošos slimības gadījumos attīstās dziļi plaušu audu bojājumi pneimocistiskās pneimonijas formā, jo pneimocistoze attīstās uz dziļa imūndeficīta fona. Bet, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi, nemotivētas caurejas sindroms attiecas uz agrīnu parādīšanos, to raksturo rezistence pret zāļu terapiju. Viens no HIV infekcijas sindromiem ir nezināmas etioloģijas viļņveida artralģija. Raksturīgākās slimības izpausmes ir ādas un gļotādu bojājumu sindroms, kas izpaužas ar nespecifiskiem makulopapulāriem izsitumiem, pret steroīdu terapiju rezistentu ekzēmu un stafilokoku impetigo. Dermatoloģiskās izpausmes ietver arī atkārtotus sēnīšu (mikoze, kandidoze, bakteriālas (folikulīts, furunkuloze, hidroadenīts), vīrusu (herpes) ādas un gļotādu bojājumus.Visbeidzot, HIV infekcijai ir raksturīgi arī jaunveidojumi, galvenokārt Kapoši sarkomas un limfoma, kā arī daži citi audzēju veidi.

Ja pacientam ir vismaz divas klīniskās un divas klīniskās laboratorijas (leiko-lifonutropēnija, hipogammaglobulinēmija) iepriekš minētie simptomi, tas ļauj ar augstu ticamības pakāpi diagnosticēt HIV infekciju. Bet tajā pašā laikā, ja tiek atklāti divi no šādiem pacientiem ļoti bieži sastopamiem sindromiem, piemēram, drudzis un limfadenopātija, kas saglabājas mēnesi vai ilgāk, ilgstoša nemotivēta caureja, svara zudums par vairāk nekā 10% vai izteikts. nakts svīšana, rada diagnozi un rūpīgu laboratorisko izmeklēšanu.

AT posms 2a Par slimību var aizdomas tikai pēc persistējošas ģeneralizētas limfadenopātijas simptoma riska pacientam vai epidemioloģiskās vēstures klātbūtnē.

AT 2.b posms(agrīna vai viegla), somatiskā pašsajūta, normāla aktivitāte joprojām saglabājas. Ādas un gļotādu bojājumi nav smagi, atkārtotas elpceļu infekcijas nav ģeneralizētas, svara zudums nepārsniedz 10%.

Saskaņā ar PVO rekomendācijām, uzticama HIV infekcijas klīniska diagnoze pieaugušajiem un bērniem ir iespējama, ja ir kāda no 12 AIDS indikatīvām slimībām: 1) barības vada, trahejas, bronhu, plaušu kandidoze; 2) ekstrapulmonāra kriptokokoze; 3) kriptosporidioze ar caureju ilgāk par vienu mēnesi; 4) citomegalovīrusa bojājumi jebkuram orgānam (izņemot un papildus aknām, liesai un limfmezgliem pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi); 5) herpes simplex vīrusa izraisīta infekcija, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi pacientam, kas vecāks par 1 mēnesi; 6) Kapoši sarkoma pacientam, kas jaunāks par 60 gadiem; 7) smadzeņu limfoma pacientam, kas jaunāks par 60 gadiem; 8) limfocītu intersticiāla pneimonija bērnam līdz 13 gadu vecumam, 9) izplatīta infekcija, ko izraisa Mycobacterium avium intracellulare vai M. Kansassii grupas baktērijas; 10) pneimocistiskā pneimonija; 11) progresējoša multifokāla leikoencefalopātija; 12) centrālās nervu sistēmas toksoplazmoze pacientiem, kas vecāki par 1 mēnesi. Vienas no šīm slimībām klātbūtne ļauj diagnosticēt HIV infekciju bez seroloģiskās ar enzīmu saistītās imūnsorbcijas analīzes vai pat tad, ja tiek iegūts seronegatīvs rezultāts.

Ne mazāk sarežģīta ir slimības fāžu diferenciācija, t.i. stadijas noteikšana atbilstoši klīniskajiem kritērijiem. Pēc CDC ekspertu (ASV) domām, objektīvākais kritērijs ir T-helper šūnu skaits, nevis klīniskās izpausmes, jo daudzi no šiem stāvokļiem bieži tiek konstatēti cilvēkiem, kuri nav inficēti ar HIV. Centrs 1991.gadā noteica, ka AIDS diagnozi var noteikt, ja: a) inficētajai personai ir kāds no 23 ar AIDS saistītiem stāvokļiem vai b) viņš ir HIV inficēts un tajā ir mazāk par 200 CD4+ šūnām/mm.

HIV infekcijas laboratorijas kritēriji.

HIV infekcijas pārbaude galvenokārt ir pakļauta:

2 . Personas ar kandidoza ezofagīta klīniku, bronhu un plaušu kandidozi, diseminētu vai ekstrapulmonāru kokcidiomikozi, pneimocistisko pneimoniju, ekstrapulmonālo kriptokokozi, kriptosporidiozi ar caureju ilgāk par 1 mēnesi, citomegalovīrusu, izņemot iekšējos orgānos, limfas orgānu bojājumus, pacienti, kas vecāki par 6 mēnešiem, citomegalovīrusa retinīts ar redzes zudumu, herpetiska infekcija ar multifokālām čūlām, kas ilgst vairāk nekā 1 mēnesi, bronhīts, pneimonija vai ezofagīts, recidivējoša herpes zoster, diseminēta vai ekstrapulmonāra histoplazmoze, plaušu vai ekstrapulmonāla tuberkuloze, izosporioze, kas ilgst vairāk nekā caureju 1 mēnesis, plaši izplatītas vai ekstrapulmonāras MAC infekcijas, progresējoša multifokāla leikoencefalopātija, smadzeņu toksoplazmoze, salmonellas septicēmija, Kapoši sarkoma, limfoma, limfoīdā intersticiāla pneimonija (bērniem)

Šobrīd HIV infekcijas laboratoriskai diagnostikai tiek izmantotas dažādas HIV, HIV antigēnu un HIV gēnu materiāla noteikšanas metodes, kā arī antivielu noteikšanas metodes pret HIV. Visām šīm metodēm ir atšķirīga efektivitāte, tām ir nepieciešams atšķirīgs aprīkojums un dažāda līmeņa personāla apmācība. Šo pētījumu rezultāti prasa kompetentu interpretāciju.

HIV infekcijas diagnostika ietver 2 posmus: faktiskā HIV inficēšanās fakta konstatēšanu un slimības stadijas noteikšanu. Pēc stadijas noteikšanas nesaraujami seko slimības gaitas rakstura noskaidrošana un pēc tam prognozes veidošana šim pacientam, kā arī ārstēšanas taktikas izvēle.

Kā zināms, jebkuras infekcijas slimības diagnoze balstās uz epidemioloģisko, klīnisko un laboratorisko datu salīdzināšanu, un kādas no šo datu grupu vērtības pārspīlēšana var radīt diagnostikas kļūdas.

Lasītājs jau sākumā jābrīdina, ka izplatīta kļūda HIV infekcijas diagnosticēšanā ir diagnozes noteikšana, pamatojoties uz vienu laboratorijas izmeklējumu, kuram ārstam viena vai otra iemesla dēļ ir pārāk liela pārliecība. Daži laboratorijas darbinieki pat uzņemas brīvību diagnosticēt HIV infekciju, nekad neredzot pacientu. Dažreiz klīnicisti arī netieši uzticas laboratorijas rezultātiem, kas var būt noderīgi tikai kā pacienta "individuālie liecinieki galīgajā spriedumā". 15 gadu laikā, kad esam novērojuši HIV infekciju Krievijā, esam redzējuši desmitiem, ja ne simtiem kļūdu gadījumu, kas saistīti ar dažu ārstu fanātisku uzticēšanos laboratorisko izmeklējumu rezultātiem. Mēs nevaram kavēties pie diezgan bieži sastopamām "parastām" kļūdām, kas rodas, ja serumi ir sajaukti, dokumentācija ir nepareizi aizpildīta utt. Klīnicistam ir jāzina konkrētas metodes diagnostiskā vērtība. Zināms gadījums, kad Sanktpēterburgā kādas “jaunas” metodes nepiemērotas lietošanas rezultātā viens “zinātnieks” pilnīgi veselam un neinficētam cilvēkam (kuru, starp citu, viņš arī konstatēja “HIV infekciju” nekad nebija redzējis), kā rezultātā pēdējais izdarīja pašnāvību. Cits, ne mazāk ievērojams "zinātnieks" vairākus gadus iebilda vienas no bijušās padomju republikas vadībai, ka šīs valsts iedzīvotājus ir "skārusi AIDS epidēmija", jo viņa izstrādātā "superjutīgā" pētniecības metode "atklāj HIV infekciju". inficētiem cilvēkiem daudz agrāk nekā visas citas zināmās metodes." Abos gadījumos, protams, runa bija par viltus reakcijām, kas deva savas "jaunākās metodes".

Ir aprakstīts tipisks "HIV infekcijas diagnozes noteikšanas (viroloģiski)" gadījums. Neskatoties uz to, ka aprakstītajam mirušajam vīrietim 21 gadu vecumā epidemioloģiskajā anamnēzē nebija nozīmīgu HIV infekcijas riska faktoru, tika konstatētas negatīvas asins analīzes uz HIV antivielām, netika konstatēta neviena HIV infekcijai raksturīga oportūnistiska saslimšana, kā arī patoanatomiskā slimība. limfogranulomatozes diagnoze ar kaulu smadzeņu, aknu, liesas, zarnu limfmezglu bojājumiem”, iepriekš minētā apraksta autors (acīmredzot, tikai savā rakstā) viņam liek par HIV infekcijas “pēcnāves diagnozi”. Šīs "retrospektīvās" diagnozes pamatā bija pieminēšana, ka pacienta materiāls "tika pārbaudīts ar molekulāro hibridizāciju, izmantojot radioaktīvo zondi, un atklāja HIV-1 vīrusam specifisku sekvenču klātbūtni mononukleārajās šūnās". Acīmredzot, raksta autors, spēcīgā virusoloģiskās terminoloģijas iespaidā, "šajā piemērā saskatīja virusoloģiskās diagnostikas izcilo vērtību salīdzinājumā ar seroloģisko, īpaši maziem bērniem".

Kā mēs jau atzīmējām, jaunās diagnostikas metodes ir jāapstiprina ar vecajām, nevis otrādi. Tāpēc mūsu vispārējais ieteikums klīnicistiem un epidemiologiem ir skeptiski izturēties pret visām "jaunajām metodēm", kamēr nav zināmas visas to priekšrocības un trūkumi. Šobrīd tas tieši attiecas uz polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) diagnostiku un citām "gēnu diagnostikas metodēm", ar kuru palīdzību daži pētnieki jau "atklājuši AIDS Ēģiptes mūmijām" un "jau sākuši to atklāt žurkām". Jaunākie sasniegumi tikai parāda, ka būs nepieciešami vēl vairāki gadi, lai pilnībā pielāgotu šīs metodes medicīnas vajadzībām.

Vēl nesen nerimst strīdi par to, vai HIV infekciju iespējams noteikt bez laboratoriskā apstiprinājuma. Tas būtu nopietnu diskusiju objekts, ja Krievijā nebūtu plaši pieejamas metodes HIV antivielu noteikšanai. Tomēr mēs uzskatām, ka tas ir pilnīgi iespējams. Mēs novērojām daudzus gadījumus, kad HIV infekcijas diagnoze neradīja šaubas jau no anamnēzes vākšanas un pacienta pirmās apskates brīža. Mums ir grūti atcerēties gadījumu, kad tipiskā limfadenopātija Centrālāfrikas vai Austrumāfrikas pamatiedzīvotājam nav izrādījusies droša HIV infekcijas pazīme. Tikai 2 jauniem pacientiem, ar kuriem mums bija jākonsultējas, lai gan viņi iepriekš bija saņēmuši masīvu hormonālo terapiju, Kapoši sarkoma uz galvas un ķermeņa nebija HIV infekcijas izpausme.

Krievijā izveidojušās tradīcijas dēļ miljoniem cilvēku bez specifiskām indikācijām tiek izmeklētas antivielas pret HIV, un vairumā gadījumu ārsts vispirms saņem pētījuma rezultātus (pozitīva reakcija uz HIV antivielām) un tikai pēc tam ierauga pacientu. pats un var viņu intervēt.

Ātri tiek aizmirsts, ka laboratorijas dati ir tikai apstiprinājums klīniskajiem. Gadījumos, kad ārsts jau zina, ka izmeklējamajam pacientam ir antivielas pret HIV, viņš var viegli kļūdīties, nosakot diagnozi. Tātad, 1985.-1989. mums nācās izmeklēt desmitiem pacientu, kuri tika nosūtīti uz Maskavu no visas valsts viltus laboratorisko HIV infekcijas apstiprinājumu dēļ. 1987.-1995.gadā vienai patiesi pozitīvai “laboratoriskajai diagnozei”, pamatojoties tikai uz HIV antivielu noteikšanu ar enzīmu imūntestu (ELISA), bija līdz 2000-3000 nepatiesu! Visi cilvēki ar šādu reakciju agrāk ilgstoši atradās ambulatorā uzraudzībā, radot lielu darbu AIDS profilakses un kontroles centru darbiniekiem.

90-95% inficēto antivielas pret HIV parādās 3 mēnešu laikā pēc inficēšanās, 5-9% - pēc 6 mēnešiem un 0,5-1% - vēlāk. Agrākais laiks antivielu noteikšanai ir 2 nedēļas no inficēšanās brīža.

Praktiski interesanti ir gadījumi, kad pacients tiek izmeklēts HIV infekcijas inkubācijas periodā vai IIA stadijā un antivielu daudzums viņa asinīs joprojām ir pārāk mazs, lai to atklātu. Tomēr ar pietiekamu pieredzi infektologi šos gadījumus ātri atpazīst. Tā, piemēram, reiz ārsts M.A. Burčikam, kurš strādāja Maskavas 2. klīniskās infekcijas slimību slimnīcas boksu nodaļā, bija aizdomas par HIV infekciju kādam 44 gadus vecam vīrietim, kurš bija atgriezies no ceļojuma uz ASV un kurš cieta no slimības, kas klīniski ļoti izteikta. daudz līdzinājās infekciozai mononukleozei, un pirmajā pārbaudē bija seronegatīvs uz HIV. M.A. Burčiks pareizi atzīmēja, ka pacienta nobriedušais vecums ir netipisks mononukleozei, jo N.F. Filatovs savulaik to sauca par "bērnu dziedzeru drudzi", un daži autori, kas to novēroja pieaugušajiem, sauca arī par "studentu un mīļotāju slimību", t.i. jauniešiem. Negatīvus rezultātus sniedza arī atkārtots HIV antivielu tests, kas veikts pēc 1 nedēļas. Tomēr M.A. Burčiks parādīja neatlaidību, un jau trešajā pētījumā, kas tika veikts 1 mēnesi pēc klīnisko izpausmju sākuma, tika konstatētas antivielas pret atsevišķiem HIV proteīniem un pēc tam imūnblotēšanā “pilnīgi pozitīva” reakcija uz antivielām pret HIV. Veicot turpmāko epidemioloģiskās vēstures apkopošanu, atklājās, ka pacientam ceļojuma laikā uz ASV bijušas homoseksuālas attiecības, kuru rezultātā viņš inficējies ar HIV.

Viena no visvairāk pētītajām un izplatītākajām ir HIV antivielu noteikšanas metode. Tā kā HIV infekcija vairumā gadījumu ilgst visu mūžu, diagnozes noteikšanai pietiek ar antivielu noteikšanas faktu. Ar HIV infekciju, atšķirībā no citām infekcijām, vairumā gadījumu nav nepieciešams lietot pāros, t.i. pieņemts pēc noteikta laika, serums.

Antivielu noteikšana principā var atklāt vairāk nekā 99% cilvēku, kas inficēti ar HIV. Dažas grūtības ir saistītas ar faktu, ka pirmajās nedēļās pēc inficēšanās nav antivielu pret HIV, un slimības beigu stadijā to skaits var ievērojami samazināties. Ir informācija par atsevišķiem, diezgan retiem HIV infekcijas gadījumiem, kad antivielas ilgstoši netiek konstatētas vai pazūd salīdzinoši ilgu laiku.

Tā no 1995. līdz 1997. gadam ASV un Kanādā tika identificēti 8 pacienti ar HIV infekcijas klīniskajām pazīmēm, kuriem atkārtoti seruma testi antivielu klātbūtnei deva negatīvus rezultātus. Visiem pacientiem bija AIDS definīcijai atbilstošas ​​klīniskas izpausmes, CD4-limfocītu līmenis bija mazāks par 0,2 10 9 /l. P24 antigēna testi bija pozitīvi, tāpat kā HIV RNS un DNS noteikšanas rezultāti. Šo pacientu serumu izpēte vairākās antivielu noteikšanas testu sistēmās parādīja, ka daži no tiem atklāj HIV antivielu klātbūtni, bet citi to nedara. Seruma imunoblotēšana 4 no 8 pacientiem atklāja antivielu klātbūtni pret HIV proteīniem, t.i. šos serumus varētu uzskatīt par apšaubāmiem (neinterpretējams rezultāts).

Iepriekšējais novērojums uzsver nepieciešamību pēc visaptverošas izmeklējuma rezultātu izvērtēšanas HIV infekcijas diagnostikā, jo visos gadījumos aizdomas par saslimšanu bijušas, pamatojoties uz klīniskām izpausmēm. Vairākiem šīs grupas pacientiem varēja identificēt seksuālo attiecību vēsturi ar personām, kuras vēlāk saslima ar AIDS. Šādu gadījumu epidemioloģiskā nozīme kopumā ir zema, jo tie notiek reti, taču teorētiski tiem var būt nozīme atsevišķu uzliesmojumu rašanās gadījumā, kas jāņem vērā, veicot epidemioloģisko izmeklēšanu.

Jau agrāk eksperti pauda viedokli, ka antivielu trūkums pret HIV 6 mēnešus pēc inficēšanās ir ārkārtīgi reti sastopams un negatīvs HIV antivielu testa rezultāts šajā periodā, visticamāk, ir "spēcīgs arguments pret HIV infekcijas diagnozi". Aprakstīts P. Salivan et al. Klīniski izteiktas HIV infekcijas "seronegatīvie" gadījumi veidoja tikai simtdaļas no kopējā AIDS pacientu skaita, kas tika atklāti Amerikas Savienotajās Valstīs tajā pašā laika periodā. Teorētiski var pieņemt, ka, pieaugot saslimstībai ar HIV infekciju Krievijā, pieaugs absolūtais šādu gadījumu skaits un attiecīgi var pieaugt seronegatīvo avotu loma epidēmijas procesā. Tomēr, pieaugot diagnostisko testu sistēmu kvalitātei un spējai noteikt arvien zemāku antivielu koncentrāciju, šie aprēķini var nebūt nozīmīgi.

Tā kā HIV infekcijas laboratoriskajā diagnostikā lietotā terminoloģija praktiķim ne vienmēr ir skaidra, mums pie tās jāpakavējas sīkāk.

Diagnostikas testu sistēmas sauc par īpašiem reaģentu komplektiem HIV infekcijas marķieru noteikšanai. Visbiežāk, kā mēs atzīmējām iepriekš, tie ir paredzēti, lai noteiktu antivielas pret HIV. To galvenā atšķirība ir tikai metode, kā noteikt antivielu reakciju ar HIV antigēnu. Testu sistēmas papildus antigēna-antivielu reakcijas noteikšanas metodei atšķiras ar izmantoto HIV antigēnu atlasi, kurus var iegūt tieši no HIV ar rekombinantām metodēm vai sintezēt no aminoskābēm, kā arī ar saistīto reaģentu atlasi. un dizains. Praktizētājus nedrīkst mulsināt reklāmas nolūkos visbiežāk lietotie izteicieni “trešās paaudzes testa sistēmas”, “jaunās paaudzes testu sistēmas” u.c. Faktiski tas tikai slēpj jaunu sastāvdaļu izmantošanu, lai gan patiesībā “ceturtās paaudzes testēšanas sistēmas” kvalitāte var būt ievērojami zemāka nekā “pirmās paaudzes” testēšanas sistēmai. Tādējādi testēšanas sistēmas, izmantojot “vīrusu lizātu” kā antigēnu, t.i. iznīcinātā vīrusa tiek dēvēti par “pirmo paaudzi”, taču ar savu spēju identificēt visus inficētos, kuriem ir antivielas pret HIV, viņi var pārspēt “jaunās paaudzes”.

Šo testu kvalitatīvie raksturlielumi ir spēja noteikt maksimālo patiesi pozitīvo serumu skaitu, t.i. serumi, kas reāli satur antivielas pret HIV (testa sistēmas jutība), un iespēja reģistrēt minimālo viltus pozitīvu skaitu, t.i. sniedzot nepatiesu reakciju ar diagnostisko, serumu (testa sistēmas specifika). Ja testa deklarētā jutība ir 99,9%, tas nozīmē, ka tas nosaka 999 no 1000 serumiem, kas satur antivielas, un nekonstatē vienu serumu. Ja specifika ir deklarēta kā 99,9%, tad tas nozīmē, ka tests reaģēs kā pozitīvs ar kādu no 1000 pārbaudītajiem serumiem, kas noteikti nesatur antivielas pret HIV.

Parasti testēšanas sistēmu reālā jutība un specifika ir zemāka par ražotāju deklarētajām, un to vērtību var spriest galvenokārt pēc praktiskā pielietojuma rezultātiem.

Ir pilnīgi dabiski, ka vislielākais serumu skaits, kas satur antivielas pret HIV, tiek atklāts ar tiem testiem, kas satur antigēnus noteicošos faktorus, kas visbiežāk sastopami HIV-1. Bet, lai atklātu, piemēram, vēl retākus serumus ar antivielām pret HIV-2 vai HIV-1 O apakštipu, šobrīd nepieciešams antigēnu komplektā ieviest šiem variantiem specifiskus antigēnu determinantus, t.i. pastāvīgi paplašināt antigēnu noteicošo faktoru kopumu. Testa sistēmas nespēja noteikt gan pozitīvos serumus, kas satur dažas antivielas, rada kļūdaini negatīvus rezultātus, ko var izraisīt gan nepietiekama jutība, kas saistīta ar nepareizu izmantoto reaģentu izvēli, gan neatbilstoša izmantoto antigēnu determinantu atlase.

Visām zināmajām testēšanas sistēmām ir daži ierobežojumi attiecībā uz to spēju noteikt visus serumus, kas satur antivielas pret HIV (jutīguma ziņā), kaut vai tāpēc, ka šo antivielu daudzums var būt ļoti mazs, īpaši slimības sākuma un beigu periodā. Tomēr modeļu eksperimentos ar iepriekš zināmiem pozitīvajiem serumiem (“diagnostikas panelis serumu”) dažu testa sistēmu jutība var sasniegt 100%, t.i. tie atklāj visus zināmos pozitīvos serumus, kas izmantoti šajā eksperimentā. Tajā pašā laikā, protams, nevajadzētu aizmirst, ka personas, kas veic testus, var nejauši vai apzināti izvēlēties serumus ar noteiktām īpašībām, kas ietekmē testa rezultātu.

Tajā pašā laikā viltus pozitīvas reakcijas ir raksturīgas gandrīz visām testa sistēmām. Tas ir saistīts ar faktu, ka testa materiālos var būt antivielas pret antigēniem, kas ir līdzīgi HIV antigēniem, vai antigēnu piesārņotājiem. Tādējādi klasiskajā HIV antigēna iegūšanas paņēmienā no vīrusu šūnu kultūru lizāta galaproduktā tiek atrasti limfocītu fragmenti, pret kuriem antivielas var izraisīt viltus reakcijas utt. Tika atzīmēts, ka, palielinoties testa jutīgumam, ir tendence palielināt viltus pozitīvu reakciju skaitu.

Praksē tam tiek pievienoti arī viltus negatīvi un kļūdaini pozitīvi rezultāti, kas rodas cilvēku kļūdu, testēšanas sistēmu kvalitātes pasliktināšanās transportēšanas un nepareizas uzglabāšanas dēļ. Tāpēc līdz ar laboratorijā noteikto specifiskumu un jutību šie parametri dažkārt tiek noteikti tā sauktajos lauka apstākļos, t.i. praktiskās veselības aprūpes iestādēs. Parasti "lauka" apstākļos noteiktā specifika un jutība iepriekš minēto iemeslu dēļ ir zemāka nekā laboratorijas. Pat tādi faktori kā laboratorijas stikla trauku mazgāšanai izmantotā ūdens kvalitāte utt. var ietekmēt testa sistēmu lietošanas rezultātus.

Visbiežāk antivielas pret HIV tiek noteiktas ar ELISA metodēm. Daudzās cietās fāzes ELISA testēšanas sistēmās nav būtisku atšķirību, lai gan tās var ievērojami atšķirties jutības un specifiskuma ziņā. Diezgan bieži gadās, ka, izmantojot dažādas testa sistēmas, vieni un tie paši serumi dod atšķirīgus rezultātus. Šajā sakarā tiek atzīts, ka pozitīvs pētījuma rezultāts vienā testēšanas sistēmā nevar tikt uzskatīts par beznosacījumu pozitīvu rezultātu.

Ir ierosinātas un izmantotas vairākas metodes, lai pārbaudītu antivielu noteikšanas rezultātu specifiskumu. Šo metožu vidū visbiežāk izmantotā imūnblotēšanas reakcija (“immunoblots” Western Blot modifikācijā. Šajā skaistajā “zinātniskajā” nosaukumā “blots”, visticamāk, ir tulkots kā “blots”, bet “western” kā “western”, kas atspoguļo šī "traipa" izplatības virzienu uz papīra no kreisās puses uz labo, t.i., ģeogrāfiskajā kartē, tas atbilst virzienam no rietumiem uz austrumiem). Imūnblotēšanas metodes būtība ir tāda, ka ar enzīmu saistītā imūnsorbcijas reakcija tiek veikta nevis ar antigēnu maisījumu, bet gan ar HIV antigēniem, kas iepriekš ar imunoforēzi sadalīti frakcijās, kas atrodas atbilstoši molekulmasai uz nitrocelulozes membrānas virsmas. . Rezultātā galvenie HIV proteīni - antigēnu determinantu nesēji - tiek sadalīti pa virsmu atsevišķu joslu veidā, kas parādās enzīmu imūntesta laikā.

Ar HIV-1 inficēto pacientu serumi nosaka antivielas pret šādiem galvenajiem proteīniem un glikoproteīniem: pret strukturālajiem apvalka proteīniem (env) - gpl60, gpl20, gp41, kodoliem (gag) - pi7, p24, p55, kā arī vīrusu enzīmiem ( pol) - p31, p51, p66. HIV-2 antivielas pret env ir tipiskas - gpl40, gpl05, gp36, gag - pl6, p25, p56, pol - p68.

No laboratorijas metodēm, kas nepieciešamas reakcijas specifikas noteikšanai, vislielāko atzinību guvusi antivielu noteikšana pret HIV-1 (gp41, gpl20, gpl60) un HIV-2 (gp36, gpl05, gpl40) apvalka proteīniem. Tomēr pat šeit pastāv dažas atšķirības starp atsevišķu pētījumu grupu viedokļiem.

Tādējādi PVO uzskata par pozitīviem serumiem, kuros ar imūnblotēšanu tiek noteiktas antivielas pret jebkuriem diviem HIV glikoproteīniem. Saskaņā ar šiem ieteikumiem, ja notiek reakcija tikai ar vienu no apvalka proteīniem (gp 160, gp 120, gp 41) kombinācijā ar reakciju ar citiem proteīniem vai bez tā, rezultāts tiek uzskatīts par apšaubāmu un tiek veikts otrs tests, izmantojot ieteicams komplekts no citas sērijas vai cita uzņēmuma. Ja pēc tam rezultāts paliek apšaubāms, ieteicams novērot 6 mēnešus (pētījums pēc 3 mēnešiem).

Mūsuprāt, ir pieņemami rezultātus interpretēt kā pozitīvus pat tad, ja ir antivielas tikai pret vienu apvalka proteīnu, īpaši, ja runa ir par izmeklēšanu HIV infekcijas perēkļos. Ir pilnīgi skaidrs, ka, runājot par HIV infekcijas nozokomiālā fokusā esoša bērna, seropozitīva donora asins recipienta vai HIV inficētas personas seksuālā partnera serumu, pozitīva diagnostiskā nozīme ir. reakcija dramatiski palielinās. Šeit vēlreiz vēlamies vērst lasītāja uzmanību uz to, ka HIV infekcijas diagnoze tiek noteikta nevis pamatojoties uz laboratorisko izmeklējumu rezultātiem, bet gan salīdzinot tos ar klīniskajiem un epidemioloģiskajiem datiem. Tādējādi tieši Elistā nozokomiālā uzliesmojuma epidemioloģiskās izmeklēšanas laikā novērojām aptuveni 10 gadījumus, kad inficētiem bērniem imūnblotēšanas reakcijā sākotnēji tika konstatētas antivielas tikai pret vienu env glikoproteīnu.

Pozitīva reakcija ar p24 antigēnu var norādīt uz serokonversijas periodu, jo antivielas pret šo proteīnu dažreiz parādās pirmās. Šajā gadījumā, atkarībā no klīniskajiem un epidemioloģiskajiem datiem, ir ieteicams atkārtot pētījumu ar seruma paraugu, kas ņemts ne agrāk kā 2 nedēļas, un tieši tas ir gadījumā, ja HIV infekcijas gadījumā ir nepieciešami sapāroti serumi.

Pozitīvas reakcijas ar gag un pol proteīniem bez reakcijas ar env proteīniem var atspoguļot agrīnas serokonversijas stadiju, kā arī liecināt par inficēšanos ar HIV-2 vai nespecifisku reakciju. Personas ar šādiem rezultātiem pēc HIV-2 pārbaudes tiek atkārtoti pārbaudītas pēc 3 mēnešiem (6 mēnešu laikā). Ja pēc 6 mēnešiem atkal tiek iegūti nenoteikti rezultāti (nav reakcijas ar HIV-1 un HIV-2 env proteīniem), un netiek identificēti riska faktori un imūndeficīta klīniskie simptomi, tad parasti tiek secināta nespecifiska imūnblotēšanas reakcija. . Tiek uzskatīts, ka patiesas HIV infekcijas gadījumā parasti pēc vairāku mēnešu antivielu spektra monitoringa tiek noteikta pozitīva tendence, t.i. antivielu parādīšanās pret citām HIV struktūrām un uz nitrocelulozes imūnblotēšanas reakcijā tiek novērota diagnozei trūkstošo joslu parādīšanās. Gluži pretēji, viltus reakcijas gadījumā imūnblotēšanas rezultāti paliek nenoteikti vai kļūst negatīvi, t.i. "aizdomīgās" joslas pazūd.

HIV infekcijas diagnosticēšanas efektivitāti, nosakot antivielas asinīs, samazina tas, ka HIV antivielas var netikt konstatētas pirmajos inficēšanās mēnešos vai slimības beigu stadijā, bet, gluži pretēji, var tikt konstatētas pirmie dzīves mēneši neinficētiem bērniem, kas dzimuši HIV inficētām mātēm.

Tā kā bērniem ir antivielas pret HIV, šajā gadījumā reakciju nevar saukt par viltus pozitīvu. No vienas puses, bērna asins serumā 1. dzīves gadā cirkulē mātes antivielas, un līdz ar to HIV antivielu noteikšana 1. dzīves gada bērniem nav pietiekams pamats diagnozes noteikšanai. HIV infekcija. No otras puses, tā kā HIV infekcija jaundzimušā periodā var izraisīt hipo- un agammaglobulinēmiju, antivielu izzušanu nevar uzskatīt par pietiekamu iemeslu HIV infekcijas diagnozes atcelšanai. Šajā sakarā bērni, kas dzimuši ar HIV inficētām mātēm, ir klīniski jānovēro vismaz 36 mēnešus pēc dzimšanas. Līdz ar jaunu diagnostikas metožu parādīšanos vērojama tendence samazināt novērošanas periodu. HIV antigēnu vai vīrusu nukleotīdu secību noteikšana šādiem bērniem var apstiprināt HIV infekcijas diagnozi agrāk, taču šādu pētījumu negatīvie rezultāti to pilnībā nenoraida (skatīt zemāk). Pēc visa novērošanas perioda jautājums par to, vai bērnam ir HIV infekcija, tiek izlemts, pamatojoties uz klīnisko, imunoloģisko un seroloģisko datu kompleksa analīzi.

Šobrīd izplatītāko enzīmu imūntestu sistēmu trūkums ir nepieciešamība izmantot speciālu aparatūru reakcijas rezultātu izvērtēšanai: spektrofotometrus ar piederumiem, kuros var būt datori ar speciālām aprēķinu programmām u.c., kas būtiski sadārdzina pētījumus un padara pētnieks ir atkarīgs no daudziem apstākļiem, tostarp īpašām telpām, elektrības un ūdens apgādes.

Imūnblotēšanas metodes izmantošanu stipri ierobežo tās augstās izmaksas.

Pretēji izplatītajam uzskatam imūnblotēšana ir mazāk jutīga nekā cietās fāzes ELISA. Tāpēc dažās valstīs seroloģiskā diagnoze ir atļauta pēc antivielu noteikšanas pret HIV, izmantojot vairākus cietās fāzes ELISA testu komplektus, kas atšķiras ar antigēnu sastāvu. Imūnblotēšanas metodes efektivitāte samazina pietiekami liela skaita neinterpretējamu vai nenoteiktu rezultātu noteikšanu.

Teorētiski HIV antivielu noteikšanas metode siekalās vienkāršo diagnostiku, kas šobrīd pēc jutības ir tuva antivielu noteikšanas metodei asinīs, bet līdz šim ir ievērojami zemāka par to pēc specifikas, t.i. dod vairāk viltus pozitīvu rezultātu.

"Lauka" pētījumiem pašlaik tiek piedāvātas visādas vienkāršotas testu sistēmu versijas HIV antivielu noteikšanai. To jutīgums un specifika var ievērojami atšķirties.

Pašlaik Krievijā HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas standarta procedūra ir HIV antivielu noteikšana ar sekojošu to specifiskuma apstiprināšanu imūnblotēšanā.

Antivielu noteikšana pret HIV ietver 2 darbības. Pirmajā posmā kopējais antivielu spektrs pret HIV antigēniem tiek noteikts, izmantojot dažādus testus: enzīmu imūnanalīzi, aglutināciju, kombinēto, ķemmi, membrānfiltrāciju vai membrānas difūziju. Otrajā posmā imūnblotēšanas metodi izmanto, lai noteiktu antivielas pret atsevišķiem vīrusa proteīniem. Darbā ir atļauts izmantot tikai pārbaudes sistēmas, kuras lietošanai ir apstiprinājusi Krievijas Veselības ministrija. Diagnostikas procedūras jāveic tikai saskaņā ar apstiprinātām instrukcijām par attiecīgo testu lietošanu.

Asinis no kubitālās vēnas ņem tīrā, sausā mēģenē 3-5 ml apjomā. Jaundzimušie var ņemt asinis no nabas vēnas. Iegūto materiālu (vesasinis) nav ieteicams uzglabāt ilgāk par 12 stundām istabas temperatūrā un ilgāk par 1 dienu ledusskapī 4-8 °C temperatūrā, jo hemolīzes sākums var ietekmēt analīzes rezultātus. Serumu atdala, centrifugējot vai glāstot asinis gar mēģenes sieniņu ar Pastēra pipeti vai stikla stienīti. Atdalīto serumu pārnes tīrā (vēlams sterilā) mēģenē, flakonā vai plastmasas traukā, un šādā veidā to var uzglabāt līdz 7 dienām 4-8 °C temperatūrā. Strādājot, jāievēro drošības noteikumi.

Pēc pirmā pozitīvā rezultāta saņemšanas analīze tiek veikta vēl 2 reizes (ar to pašu serumu un tajā pašā testa sistēmā).

Ja tiek iegūts vēl vismaz viens pozitīvs rezultāts (2 pozitīvi rezultāti no 3 ELISA testiem), serumu pārbauda citā testa sistēmā, lai noteiktu kopējās antivielas pret HIV.

Galvenokārt pozitīvs serums, t.i. kas pirmajā testa sistēmā sniedza 2 pozitīvus rezultātus, tiek atkārtoti pārbaudīts ELISA otrajā (citā) testu sistēmā, kas izvēlēta apstiprināšanai.

Kad iegūts pozitīvs testa rezultāts un otrajā testa sistēmā, serums jāanalizē imūnblotēšanas reakcijā. Ja otrajā testa sistēmā tiek iegūts negatīvs rezultāts, serumu atkārtoti pārbauda trešajā testa sistēmā.

Ja tiek iegūts negatīvs rezultāts gan otrajā, gan trešajā testa sistēmā, tiek izdots slēdziens, ka antivielu pret HIV nav.

Ja trešajā testa sistēmā tiek iegūts pozitīvs rezultāts, serums jānosūta arī imūnblotēšanas analīzei.

Imunoblotēšanas rezultāti tiek interpretēti kā pozitīvi, nenoteikti un negatīvi.

Par pozitīviem (pozitīviem) tiek uzskatīti paraugi, kuros tiek noteiktas antivielas pret diviem vai trim HIV glikoproteīniem, negatīvi (negatīvi) - serumi, kuros netiek konstatētas antivielas pret nevienu no HIV antigēniem (olbaltumvielām). Paraugus, kas nosaka antivielas pret vienu HIV glikoproteīnu un/vai kādu no HIV proteīniem, uzskata par aizdomīgiem (nenoteiktiem vai neinterpretējamiem).

Ja imūnblotā ar HIV-1 antigēniem tiek iegūts nenoteikts rezultāts ar antivielām pret kodolproteīniem (gag), tiek veikts tests ar HIV-2 antigēniem.

Saņemot pozitīvus imūnblotēšanas rezultātus, tiek izdarīts secinājums par HIV antivielu klātbūtni testa materiālā.

Saņemot negatīvu testa rezultātu imūnblotēšanā, tiek izsniegts slēdziens, ka nav antivielu pret HIV.

Ja tiek iegūts nenoteikts rezultāts, atkārtotas HIV antivielu pārbaudes tiek veiktas pēc 3 mēnešiem un, ja paliek nenoteikti rezultāti, pēc 6 mēnešiem.

Ja pēc 6 mēnešiem atkal tiek iegūti nenoteikti rezultāti un pacientam nav infekcijas riska faktoru un HIV infekcijas klīnisko simptomu, rezultāts tiek uzskatīts par viltus pozitīvu. Epidemioloģisko un klīnisko indikāciju klātbūtnē seroloģiskie pētījumi tiek atkārtoti.

HIV infekcijas serodiagnostikas iezīme bērniem, kas dzimuši ar HIV inficētām mātēm, ir tāda, ka gan inficētiem, gan neinficētiem bērniem pirmajos 6-12 dzīves mēnešos ir mātes izcelsmes antivielas pret HIV, kas pēc tam var izzust. Kritērijs, kas norāda uz HIV infekcijas klātbūtni bērnam, ir antivielu noteikšana pret HIV 18 mēnešu vecumā un vecākiem. Antivielu trūkums pret HIV 18 mēnešus vecam bērnam, kurš dzimis HIV inficētai mātei, ir kritērijs pret HIV infekcijas klātbūtni.

Diagnostikas nolūkos tiek izmantotas arī vīrusa, tā antigēnu vai gēnu materiāla (specifiskas nukleotīdu sekvences) noteikšanas metodes.

No HIV antigēniem visbiežāk tiek mēģināts noteikt HIV-1 p24 proteīnu, taču šis paņēmiens epidemioloģiskajos pētījumos nav plaši izmantots, jo lielāko daļu antigēna nesaista antivielas tikai slimības sākumposmā un laikā. klīniski izteikta imūndeficīta attīstība. Šajā sakarā šī metode ir interesanta, lai identificētu pacientus HIV infekcijas sākuma stadijā un dažreiz novērtētu slimības progresēšanu (skatīt zemāk). Šī antigēna noteikšana bērnam, kas dzimis HIV inficētai mātei, var kalpot par kritēriju HIV infekcijas diagnozes noteikšanai viņam. Tomēr ir iespējams, ka metodes modifikācijas var izstrādāt, lai paplašinātu tās diagnostisko pielietojumu.

HIV kultūras izolēšana un identificēšana ir uzticama HIV infekcijas pazīme, tomēr šī metode ir nepieejama, prasa ilgu laiku, augsti kvalificētus izpildītājus un īpašu aprīkojumu. Tāpēc vīrusa izolēšana un identificēšana tiek veikta tikai zinātniskiem nolūkiem. Mūsdienu metodes ļauj izolēt HIV absolūtā vairumā gadījumu vai pat visos patiesas HIV infekcijas gadījumos, ja vien, protams, pētniekiem nav atbilstošas ​​prasmes, viņi ir neatlaidīgi (atkārtoti mēģina izolēt HIV) un viņiem ir lieli līdzekļi, kas. nodrošināt iespēju izmantot īpašu virusoloģisko laboratoriju, kas aprīkota ar modernām tehnoloģijām un reaģentiem. Tomēr pēdējais nosacījums ievērojami ierobežo šīs pieejas izmantošanu, un to parasti izmanto tikai ierobežotiem zinātniskiem mērķiem.

Jāatceras, ka viena HIV izolēšanas mēģinājuma negatīvajiem rezultātiem praktiski nav nozīmes, jo šādi HIV izolēšanas mēģinājumi ir veiksmīgi tikai pusē gadījumu. Laboratorijas ziņojumam, ka HIV ir izolēts, ir lielāka diagnostiskā vērtība, tomēr visas laboratorijas secina, ka tieši HIV ir izdalīts, pamatojoties uz veiktajiem skrīninga testiem, un šīs pārbaudes pareizību ārsts var novērtēt tikai viņa uzticības pakāpi šai virusoloģiskajai laboratorijai. Mēs esam vairākkārt atzīmējuši, ka daži virusologi ir spējuši izolēt HIV no materiāliem, kuriem nav nekāda sakara ar HIV inficētiem cilvēkiem, piemēram, no materiāliem, kas iegūti no pacientiem ar vējbakām vai cūciņu, vai pat no veseliem (pareizāk sakot, nav inficēti ar HIV) cilvēkiem.

Būtiska problēma ir arī tas, ka vīrusa identificēšana aizņem salīdzinoši ilgu laiku.

Visbeidzot, pēdējos gados HIV gēnu materiāla noteikšanas metode ir kļuvusi ļoti populāra, izmantojot specifisku gēnu sekvenču replikācijas (pastiprināšanas, reprodukcijas) metodes, kuras bieži tiek apvienotas ar vienu no šīs metodes variantiem - “polimerāzes ķēdes reakcija”. . Kā pārliecinoši parādīts literatūras apskatā par šīs HIV infekcijas diagnostikas metodes izstrādi, zināmo PCR modifikāciju jutīgums HIV infekcijas diagnosticēšanai ir tikai 98%, t.i. tie atklāj tikai 98% paraugu no HIV inficētām personām, kas ir ievērojami mazāk, nekā izmantojot ELISA (līdz 99,9%). Citiem vārdiem sakot, šīs modifikācijas 1998. gadā spēja atklāt tikai 980 inficētos cilvēkus no 1000, nevis 999, piemēram, ELISA. Šī iemesla dēļ tos nevar izmantot arī kā apstiprinošus testus, jo tie acīmredzami radīs vairāk viltus negatīvu rezultātu nekā imūnblotēšana. Var tikai nepiekrist A.G. Šipuļins u.c., kuri savai “iemīļotajai” reakcijai piedēvē 100% tuvu specifiku, lai gan patiesībā šī reakcija praksē uzvedas kā pārāk jutīga pret ārējām svārstībām un neveiklās rokās un nepietiekami aprīkotās laboratorijās dod ievērojamu daudzumu nespecifisku (viltus pozitīvi) rezultāti. PCR specifika ir atkarīga arī no tajā izmantoto sastāvdaļu izvēles, jo īpaši no tā sauktajiem primeriem, kuriem vajadzētu atdarināt HIV gēnu sekvences, bet ne vienmēr var precīzi saskaņot. Slikta atlase jo īpaši var novest pie tā, ka šādi testi var atklāt dažādus HIV-1 apakštipus ar dažādiem panākumiem, piemēram, noteikt B apakštipu un nenoteikt apakštipus A un G utt. Taču šo metožu izstrāde norit straujā tempā, un iespējams, ka drīzumā parādīsies kvalitatīvāki standarta reaģentu komplekti. Praksē ārstiem ir jāņem vērā viņu piedāvāto diagnostikas testu darbības īpatnības, sākotnēji pieņemot, ka to praktiskā vērtība var būt ievērojami zemāka par ražotāju deklarēto.

PCR teorētiskā priekšrocība ir tā, ka tā spēj noteikt HIV infekciju inkubācijas un agrīnā klīniskā periodā, kad antivielas vēl var nebūt. Tomēr tas ne vienmēr spēj atklāt infekciju vēlākos periodos. Tas var būt svarīgi arī nākotnē, mēģinot diagnosticēt HIV infekciju cilvēkiem, kuri saņem pretretrovīrusu terapiju, kad HIV līmenis asinīs ir ievērojami samazināts. Divu metožu – ELISA un PCR kopīga izmantošana, kas varētu būt izeja no šīs situācijas, diemžēl ievērojami sadārdzinās pētniecību, it īpaši, ja tie tiks veikti masveidā.

Pašlaik Krievijā ir apstiprinātas testu sistēmas HIV gēnu materiāla noteikšanai. Šīs testa sistēmas var dot pozitīvas reakcijas uz HIV marķieru klātbūtni HIV infekcijas agrīnā stadijā. Lai gan to lietošanas pieredzi nevar uzskatīt par pietiekami lielu, mēs iesakām ievērot tālāk norādīto to lietošanas taktiku. Ja šāda veida testu sistēmās tiek konstatēti pozitīvi HIV infekcijas testa rezultāti, jāveic antivielu pārbaude pret HIV. Ja tiek konstatētas antivielas, jāievēro standarta diagnostikas taktika. Ja testa rezultāti ir pozitīvi attiecībā uz HIV gēnu vai antigēniem marķieriem un testa rezultāti ir negatīvi attiecībā uz antivielām pret HIV, antivielu noteikšana pret HIV ir jāatkārto pēc 3 un 6 mēnešiem.

Līdz šim amplifikācijas metode salīdzinoši veiksmīgi izmantota tikai HIV infekcijas diagnosticēšanai bērniem, kas dzimuši ar HIV inficētām mātēm. Kā zināms, HIV infekcijas diagnostiku tajos apgrūtina mātes HIV antivielu klātbūtne asinīs 1.dzīves gadā gan veseliem, gan inficētiem bērniem. Taču arī šeit gēnu inženierijas metožu izmantošanai ir ierobežota vērtība. Saskaņā ar mūsdienu datiem pozitīvs HIV gēnu materiāla noteikšanas rezultāts bērnam pirmajā dzīves mēnesī patiešām norāda uz inficēšanos ar HIV ar varbūtību 50-95%, bet negatīvs rezultāts ar varbūtību 3-10% norāda uz HIV infekcijas neesamība. Tādējādi izrādās, ka bērns līdz 1 mēneša vecumam ar pozitīvu PCR, iespējams, ir inficēts, un bērns ar negatīvu reakciju, ļoti iespējams, nav inficēts. Atkārtoti bērna materiāla pētījumi, kas veikti pēc 1-2 mēnešiem, ja to rezultāts sakrīt ar pirmo, palielina diagnozes precizitāti, bet nedod absolūtu noteiktību. Pozitīvam PCR rezultātam, kas iegūts pēc 4 mēnešu vecuma (tuvāk 6 mēnešiem), ir lielāka diagnostiskā vērtība, galvenokārt tāpēc, ka šajā laikā palielinās HIV koncentrācija. Mūsuprāt, šīs reakcijas rezultātu informācijas saturu agrīnā stadijā var ietekmēt bērna inficēšanās ceļš (in utero, perinatāli vai zīdīšanas laikā), kas dabiski nosaka infekcijas ilgumu. Ir pilnīgi dabiski, ka bērniem, kuri inficējas zīdīšanas laikā, PCR rezultāti pirmajās dzīves dienās, visticamāk, būs negatīvi. Tādējādi šķiet, ka PCR izmantošana HIV infekcijas noteikšanai bērniem arī vēl nav uzticama agrīnas diagnostikas metode un nākotnē var nebūt tik liela. Mēs uzskatām, ka visiem bērniem, kas dzimuši ar HIV inficētām mātēm, ir jāveic profilaktiski pasākumi, piemēram, HIV infekcijas ķīmijprevencija, un vēl jo vairāk, ir nepieciešams atcelt zīdīšanu neatkarīgi no provizoriskiem PCR rezultātiem. Speciālisti no ASV iesaka lietot antiretrovīrusu (profilaktisku) terapiju HIV infekcijas profilaksei HIV inficētu māšu jaundzimušajiem bērniem bez īpašas atsauces uz PCR diagnostikas rezultātiem. Visticamāk, ka HIV infekcijas antiretrovīrusu ķīmijterapija var ietekmēt diagnozes efektivitāti, jo tā var dabiski samazināt HIV koncentrāciju līdz nenosakāmam līmenim. Tas nozīmē, ka cilvēkiem, kuri saņem pretretrovīrusu zāles, lai novērstu infekciju, galīgā diagnoze ar PCR jāveic tikai pēc zāļu lietošanas beigām.

Tomēr PCR tipa reakcijas jau ir atradušas savu vietu HIV infekcijas diagnostikā. Tagad tos veiksmīgi izmanto, lai prognozētu slimības gaitu un novērtētu terapijas efektivitāti, noteiktu HIV klātbūtnes kvantitatīvos rādītājus bioloģiskajos šķidrumos, par kuriem sīkāk runāsim turpmākajās nodaļās.

Ar HIV infekciju rodas tādas nespecifiskas laboratorisko parametru izmaiņas kā CD4-limfocītu līmeņa pazemināšanās, CD8-limfocītu procentuālā daudzuma palielināšanās, P2-mikroglobulīna, neopterīna līmeņa paaugstināšanās, imūnglobulīnu skaita palielināšanās. var novērot u.c.. Šo pazīmju noteikšana ir papildu pierādījums par labu HIV – infekciju diagnosticēšanai. Tomēr šīs izmaiņas var nebūt atsevišķos HIV infekcijas posmos (skatīt zemāk), tām var būt individuālas atšķirības dažādiem pacientiem un var rasties citu slimību gadījumā.

Kā jau esam uzsvēruši, HIV infekcijas diagnostika ietver 2 secīgus posmus, kuriem ir neatkarīgi mērķi:

• 1. HIV infekcijas faktiskās diagnozes noteikšana, t.i. HIV infekcijas stāvokļa noteikšana.
• 2. Klīniskās diagnozes noteikšana, t.i. HIV infekcijas stadijas un gaitas rakstura noteikšana.

Savlaicīgai HIV infekcijas stāvokļa noteikšanai ir liela nozīme pretepidēmijas pasākumos, un tā rada svarīgas juridiskas un sociālas sekas. Pat pie mazākajām aizdomām par HIV infekciju nereti ir nepieciešams veikt kādus steidzamus pasākumus, lai novērstu iespējamo HIV izplatību, piemēram, izslēgt aizdomīgu asiņu pārliešanu. Atrodot HIV inficēto, viņš tiek izņemts no ziedošanas, iziet konsultācijas, kas var samazināt HIV tālāku izplatību. Epidemioloģiskā izmeklēšana, kas tiek veikta, to atklājot, ļauj noteikt HIV pārnešanas ceļus, kas atsevišķos gadījumos (piemēram, nozokomiālos uzliesmojumos) var tikt ātri pārtraukti. Epidemioloģiskā izmeklēšana identificē citus infekcijas avotus, kā arī personas, kurām ir infekcijas risks.

Klīniskās diagnozes noteikšana tiek veikta, lai nodrošinātu pacienta stāvoklim atbilstošu medicīnisko aprūpi. Šai palīdzībai jāietver ne tikai zāļu terapija, bet arī psiholoģiskais atbalsts. Pēdējam notikumam ir arī zināma pretepidēmijas nozīme.

Neatkarīgi no mērķa HIV infekcijas diagnoze tiek veikta, visaptveroši izvērtējot klīniskās izmeklēšanas datus, epidemioloģiskās izmeklēšanas rezultātus un laboratoriskās pārbaudes.

Tajā pašā laikā pirmajā reizē pēc aizdomām par HIV infekcijas esamību gan infektologam, gan epidemiologam var vienkārši nepietikt datu galīgās diagnozes noteikšanai. Visu laboratorijas pētījumu rezultāti var būt pieejami tikai pēc dažām nedēļām, un pilnīgus epidemioloģiskos datus var iegūt vispār. Diezgan bieži pieredzējušiem speciālistiem ir šaubas par HIV infekcijas laboratoriskās diagnostikas vērtību vai ticamību. Dažreiz diagnostikas lēmums ir jāpieņem pat tad, ja nav iespējas veikt pat klīnisku izmeklēšanu, nemaz nerunājot par iespēju veikt pilnīgu klīnisko izmeklēšanu.