İfa yöntemi ile kan testi. ELISA: Ne tür bir araştırma, ne zaman ve nasıl yapılıyor ve neyi gösteriyor? Analiz için hazırlık

Bir analiz reçete edildiğinde, sifiliz için bir ELISA testi yapın. Laboratuvar teşhis yöntemleri. Analiz sonuçları - oran ve sapmaların nasıl belirleneceği. Enzim immunoassay maliyeti.

Kural olarak, sürekli olarak kliniğe başvururken, doktorlara çeşitli testler yaptırmaları önerilir. Bu, bir kişinin muzdarip olduğu enfeksiyonları ve hastalıkları belirlemelerine olanak tanır. ELISA veya enzime bağlı immünosorbent deneyi, vücudun bağışıklık sistemini değerlendirmek ve antikorların varlığı ile enfeksiyonu ve hastalığın evresini belirlemek için mükemmel bir yoldur.

Öyleyse, bu testi yapmak için kim görevlendirilir ve enzim immün testi nedir? Bir kişinin aşağıdaki hastalıkları varsa, doktorlar bu testi reçete eder:

• Vücutta döküntü - alerjik reaksiyonlar.
• Virüsler - herpes, sitomegalavirüs.
• Cinsel yolla bulaşan hastalıklar - sifiliz, Trichomonas.
• Kanserle ilişkili patoloji.
• Nörosifilis.

Listelenen hastalıklara ek olarak, kandaki hormon seviyesini belirlemek için analiz reçete edilir. Sonuçlara göre tedavi kalitesi değerlendirilir. Muhtemelen her insan sifilizin ne olduğunu bilir, ancak ölçeğini temsil etmez ve yanımızda kaç tane enfekte insan yürür.

Frengi şu anda en yaygın hastalıktır. Bu, insan vücudunu etkileyen bir treponomadır. Ve sonuç olarak, hastanın tüm iç organları etkilenir.

Bu çok tehlikeli bir enfeksiyondur ve çoğu zaman uzun süre kendini göstermeyebilir. Bu nedenle kişi hasta olduğunu bilmeden uzun süre taşıyıcı ve distribütör olabilir.

Laboratuvar teşhis yöntemi

Tıp hala ayakta durmuyor, modern analizler vücudu incelemenin eski yöntemlerinden önemli ölçüde farklı olmaya başladı. Rollerini mükemmel bir şekilde yerine getirmelerine rağmen, bazen sonuçları haftalarca veya aylarca beklemeniz gerekiyordu. Bu, doğal olarak enfekte kişi için faydalı değildi. Sonucun beklentisi nedir, hasta kişi kendisine geçti.

Klasik analizler - sifilizin Wasserman yöntemiyle tespiti, Kahn'ın yöntemi pozisyonlarından vazgeçmeye başladı ve ELISA gibi testler yerini aldı.

Bu, insanlarda enfeksiyonu tespit etmenin en modern yöntemidir. Sonuç bir bilgisayar kullanılarak çözülür. Bu, pozitif veya negatif bir testi daha doğru bir şekilde belirlemenizi sağlar.

Konuyu da okuyun

CYBE nedir? Belirtiler, tedavi

Şifre çözme sırasında, belirli hastalıklara karşı antikorlar için bir araştırma yapılır. Ve analizin bir sonucu olarak, sonuç pozitif olduğunda enfeksiyonu tanımlamak mümkün oldu. Sifilizi tespit etmek için ELISA kullanmak, üç dereceli immünoglobulin kullanımı anlamına gelir:

• G, M, A - teşhis için en önemli olanlardır.
• Kesin olarak tanımlanmış bir sırayla enfekte bir kişide üretilirler.
• Enfeksiyon aşaması hızla belirlenir.

ELISA sonuçları - normal ve pozitif

Sifiliz için bir ELISA testinden bahsediyorsa, o zaman bu durumda bir norm veya sapma olduğunu söylemek zordur. Sonuç genellikle ya negatif ya da pozitiftir. Ek olarak, kandaki antikor miktarını belirleyen titreler vardır.

Analizin kodunun çözülmesinde pek çok incelik vardır, eğer pozitif bir sonuç gösterdiyse, yanlış bir pozitif reaksiyon yöntemini dışlamak için analizin yine de birkaç kez tekrarlanması gerekecektir.

Zaten yazıldığı gibi, analizin kodunu çözerken birçok incelik vardır ve sonucu yalnızca ilgili hekim belirleyebilir. Enzim immunoassay için hangi sonuçların gösterilebileceğini tabloda örnekler verelim:

Test pozitif bir sonuç gösterirse umutsuzluğa kapılmayın. Kural olarak, daha doğru bir teşhis için çeşitli şekillerde ek analizler ve testler yapılır.

Enzim immunoassay maliyeti

Kural olarak, bu analizin maliyeti doğrudan analizin kendisine ve belirli bir enfeksiyonun tanımlanmasına bağlıdır. Çeşitli tiplerdeki enfeksiyon belirteçlerinin belirlenmesi 200 ila 350 ruble arasındadır. Ve böyle bir analiz iki gün içinde yapılır.

ELISA, bir organizmayı teşhis etmek için en popüler ve modern yöntemdir. Yöntem, enfeksiyonu tespit etmede ve enfeksiyonun tam zamanını belirlemede etkinliğini göstermiştir.

Fiyatlandırma politikası göz önüne alındığında, analizin her bütçeye sahip herkesin kullanımına açık olduğunu söyleyebiliriz. Tedavi eden hekimin, bir kişinin enfeksiyonunun tam bir resmini elde etmesini sağlar. Kendini eylemde gösterdi ve doktorları hayal kırıklığına uğratmadı. Aynı zamanda, analizi aldıktan sonra, katılan doktor hızlı bir şekilde tepki vererek zamanında tedavi önerebilir.

Teşhis dünyasında modern tıbbın gelişimi, başarılarıyla şaşırtmayı asla bırakmaz ve şimdi doktorun, yalnızca dolaylı işaretlere dayanarak olası tanı hakkında varsayımlarda bulunmasına gerek yoktur. Enzime bağlı immünosorbent testinin (ELISA) laboratuvar araştırması dünyasına oluşturulması ve tanıtılması, yalnızca patojenin varlığını değil, aynı zamanda hastalığın diğer birçok özelliğini de hızlı ve doğru bir şekilde belirlemenizi sağlar.

IFA'nın yaratılış ve gelişim tarihi

Bu kan testi yöntemi, geçen yüzyılın ortalarında - 60'ların bir yerinde, pratik tıpta kullanılmaya başlandı. Başlangıçta amacı, biyolojik türlerin hücresel antijenik yapısının araştırılması ve incelenmesi ile sınırlı olan histoloji alanında bilimsel araştırmaydı. ELISA yöntemi ile kan testi, ilgili antijenlerin (AG) ve spesifik antikorların (AT) enzim tarafından belirlenen bir "antijen-antikor" kompleksi oluşumu ile etkileşimine dayanır.

Bu fenomen, bilim insanlarını, yöntemin, patojen vücuda girdiğinde kan serumunda oluşan çeşitli sınıflardaki protein bileşiklerini tanımak için kullanılabileceğine karar vermeye teşvik etti. Bağışıklık sisteminin işleyişine doğrudan katılımları nedeniyle, bu bileşiklere immünoglobülinler (Ig, Ig) adı verilir ve keşif, laboratuar teşhislerinde en büyük buluştu.

Aynı zamanda, bu oldukça hassas yöntem sadece 80'lerde aktif olarak kullanılmaya başlandı ve yalnızca çok uzmanlaşmış tıbbi kurumlarda mevcuttu. İstasyonlar ve kan transfüzyon merkezleri, zührevi ve bulaşıcı tedavi kurumları, enzim immunoassay analizörlerini kullanma fırsatına ilk sahip olanlar oldu. Bu, "20. yüzyılın vebası" - AIDS'in hızla yayılmasından kaynaklanıyordu ve acil teşhis ve tedavi önlemleri gerekiyordu.

Tekniğin olanakları

ELISA için kan testinin uygulama alanı oldukça geniştir - şu anda birçok hastalığın nedenini araştırmanın ne kadar karmaşık olacağını hayal etmek imkansızdır. Bu tür araştırmalar artık onkolojide bile hemen hemen tüm tıbbi alanlarda kullanılmaktadır. Bilgisizlerin anlaması zor olsa da, bazı durumlarda bunu gerçekleştirdikten sonra, erken aşamalarda bir tümör keşfeden hastaların hayatlarını kurtarmak mümkün oldu.

Önemli! ELISA, bazı kötü huylu süreçlerin belirteçlerini gösteren bir kan testidir ve bu, hastalığı diğer herhangi bir yöntemin kontrolü dışında olduğunda o zaman aşamasında tespit etmeyi mümkün kılar.

Modern tanı merkezlerinde, laboratuvar incelemeleri yalnızca tümör belirteçleri tarafından sunulmaz - bu teşhisi gerçekleştirmek için etkileyici bir panel cephaneliği ile donatılmıştır. Onların yardımıyla hormonal anormallikler ve çeşitli kökenlerden bulaşıcı süreçler gibi birçok patolojik durumu belirlemek mümkündür.

Ek olarak, bir ELISA kan testinin yapılması ve kodunun çözülmesi, ilaçların hasta bir kişinin ve hatta bir hayvanın vücudu üzerindeki etkisini izlemeyi mümkün kılacaktır. Sonuncusu, veteriner kliniklerinde yaygın olarak kullanılmaktadır, evcil hayvanlarımızın veya geçimini sağlayanların sağlığını korumaya yardımcı olur ve diyette yeri doldurulamayacak istikrarlı bir et, süt ürünleri ve yumurta tedariki sağlar.

Bu nedenle, sadece birkaç mililitre venöz kan almanın ve ELISA yöntemini kullanarak teşhisinin bir sonucu olarak, araştırma materyallerini tanımlayan doktor şunları belirleyebilecektir:

• gonadların ve tiroid bezlerinin biyolojik olarak aktif maddeleri ve böbrek üstü bezleri dahil hormonal durum;
• bakteriyel ve viral enfeksiyonların (hepatit B ve C, sifiliz, herpes, klamidya, tüberküloz, miko ve üreaplazmoz, HIV, TORCH) ve bu tür diğer hastalıkların varlığı;
• iyileşme ile sonuçlanan ve antikor oluşumu aşamasına geçen (bağışıklık tepkisi) patolojik sürecin patojenlerinin hayati aktivitesinin belirtileri.

Bu tür komplekslerin bağışıklık hücreleri tarafından tanınması ve ortadan kaldırılması çok daha kolaydır. Birden fazla vakada antikor şeklindeki kalıntı etkiler ömür boyu kanda bulunur ve bu da pratik olarak yeniden enfeksiyon riskini sıfıra indirir.

İmmünoglobulin çeşitleri

Birkaç antikor türü vardır ve bunların her biri, belirli bir aşamada bağışıklık tepkisi sürecine dahil olur. Örneğin, M sınıfı (IgM) immünoglobulinler, hipertansiyonun vücuda girmesine yanıt olarak ilk oluşanlardır. En yüksek oranları hastalığın ilk günlerinde görülmektedir.

ELISA'da kullanılan immünoglobulin türleri

Daha sonra bağışıklık sistemi, antijenlerin tamamen yok edilmesinden ve hastanın iyileşmesinden sorumlu olan sınıf G Ig'yi (IgG) plazmaya gönderir. Daha sonra, kanda olmaya devam ederler, böylece aynı patojenin tekrarlanan vuruşuna karşı bağışıklık hazırlarlar. Aşı böyle işler. Zayıflamış patolojik mikroorganizma antijenlerinin eklenmesiyle, birçok immünoglobulin ortaya çıkar ve plazmada dolaşımda kalır.

Laboratuvar teşhisi için ilgi duyulan ana nesneler Ig sınıfları M, G ve A'dır. Konsantrasyon düzeylerine göre, hastalığın evresini belirleyebilir ve bir kişinin hayatında hangi bulaşıcı hastalıkları olduğunu öğrenebilirsiniz. Örneğin, geçmişte suçiçeği veya kızamıkçık olup olmadığını kontrol edebilirsiniz. Doktor, hastanın vücudunda belirli bir AT veya AH türü olup olmadığını veya herhangi bir hormon konsantrasyonunun olup olmadığını öğrenmek için birden fazla laboratuvar muayenesi yapmaya gerek yoktur - ELISA için bir sevk reçete etmek yeterlidir.

Tekniğin özü

Araştırma metodolojisi, her biri belirli amaçlara yönelik olarak belirlenmiş görevlerin yerine getirilmesi için çeşitli seçeneklere (doğrudan ve dolaylı - rekabetçi ve rekabetçi olmayan) dayanmaktadır. Bu yaklaşım, hedeflenmiş bir aramaya ve mümkün olan en kısa sürede belirli bir patolojinin nedenini belirlemeye izin verir. Farklı sınıf kategorilerindeki Ig'nin saptanması için, 96 oyuklu bir plaka (polistiren panel) kullanılır ve oyuklarına emdirilmiş rekombinant proteinler yerleştirilir. Antijenlerin rolünü oynarlar ve ilk aşamada katı fazdadırlar.

Kuyuya kan plazması ile girdiğinde, antijenler veya antikorlar nesneyi oryantasyonları ile bağlantılı olarak tanımlar ve bir kompleks (AG - AT) oluşturur. Bu oluşum bir enzim bileşiği (konjugat) ile sabitlenir ve bu daha sonra kuyunun değiştirilmiş bir boyanması ile kendini gösterir. ELISA, özel laboratuvarlarda üretilen ve tam bir reaktif setiyle donatılmış özel test sistemlerinde üretilir.

Bu analiz rondelalar, rondelalar ve spektrofotometre okumaları üzerinde gerçekleştirilebilir, ancak bunlar el emeği gerektirir. Elbette, bir laboratuvar asistanının tüm manipülasyonları tam otomatik cihazlarda gerçekleştirmesi birkaç kat daha rahat ve hızlıdır. Bunları kullanırken, laboratuvar personeli yıkama, aşılama ve rutinin geri kalanı gibi büyük miktarda monoton faaliyetten kurtulur, ancak tüm tıbbi kurumlar bu kadar pahalı ekipmanı karşılayamaz.

Bu nedenle, birçok hastane ve teşhis kurumu, yarı otomatik cihazlarda eski moda yöntemlerle ELISA yapmaya devam etmektedir.

Araştırma materyallerinin yorumlanması, yalnızca bir laboratuar teşhis uzmanının yeterliliğidir - sadece hastalığın seyrinin özellikleri ve incelikleri hakkındaki sonuçlar kendisine söylenebilir. Bu durumda, doktorun yanlış negatif veya yanlış pozitif yanıt alma olasılığını dikkate alması gerekir.

Malzemelerin kodunun çözülmesi

Yüksek kaliteli bir enzim immünolojik testinin sonucu, bu kan örneğinde istenen mikroorganizmanın bulunup bulunmadığına dair kesin bir sonuç olmalıdır. Kantitatif analiz, konsantrasyon seviyesini gösterecek ve iki şekilde ifade edilebilir - sayılarla değer veya "+" işaretlerinin sayısı ile.

Analiz edilen göstergeler

Araştırma sırasında, bağışıklık tepkisine dahil olan ana immünoglobulinlerin dikkatli bir çalışması, örneğin:

• IgM - bu sınıfın tespiti, bulaşıcı bir hastalığın akut bir formunun gelişimi anlamına gelir. IgM araştırmasında olumsuz bir sonuç, hem istenen patojenin yokluğunun kanıtı hem de hastalığın kronik bir seyre geçişi olabilir.
• IgA - çoğu durumda IgM yokluğunda bu sınıfın tanımı, bulaşıcı bir hastalığın kronik veya gizli bir gelişim formunun bir işaretidir.
• IgM ve IgA (eşzamanlı mevcudiyet) - her iki tür için pozitif sonuçlar, akut patoloji formunun en yüksek noktasını gösterir.
• IgG - varlığı, hastalığın kronik bir forma veya iyileşmeye dönüşümünü ve belirlenen maddeye karşı bağışıklık oluşumunu gösterir.

Belirli bir IS sınıfının ortaya çıkışı ve birikimi farklı zaman aşamalarında gerçekleşir. Bu nedenle, örneğin, IgM ilk olarak, patojen isabetinden yaklaşık 5 gün sonra ortaya çıkar. IG'ler kanda yaklaşık 5-6 hafta kalır ve sonra yavaş yavaş kaybolur. Şu anda ELISA tarafından belirlenmeye hazırlar. Hastalığın başlamasından yaklaşık 3-4 hafta sonra IgG ortaya çıkar ve daha sonra birkaç ay kalabilir. Ancak her zaman analizde bulunmazlar.

IgA, 2-4 haftalık bir sürede kanda oluşurken, bunların% 20'si serumda ve% 80'i - mukoza zarının salgılanmasında bulunur. Kural olarak, bu immünoglobulinler 2-9 hafta içinde kaybolur, bu da patojenin yok olduğunu ve hastanın iyileşmesini gösterir. ELISA yine de IgA varlığını gösteriyorsa, bu sürecin kronik bir forma geçişini işaret eder.

Analiz sonuçları seçenekleri

Elde edilen verilere bağlı olarak, ELISA cevapları, tüm AT ve AG'nin tam bir listesini ve pozitif veya negatif bir reaksiyonun bir göstergesini içeren bir tablo şeklinde bir formda verilebilir. Bazı durumlarda, nicel bir değer gösterilecektir - keskin bir şekilde pozitif, pozitif, zayıf pozitif veya negatif bir sonuç. İkinci seçenek, incelenen kan örneğinde bulunan antikor miktarını gösterir.

ELISA materyalleri yorumlama seçenekleri

Yukarıdaki değerlere ek olarak, ELISA sürecinde başka bir nicel parametre araştırılır - yüzde olarak hesaplanan AT avidite indeksi. Hastalığın ne kadar sürdüğünü gösterir - yani gösterge ne kadar yüksekse, patoloji o kadar uzun sürer.

Alternatif ELISA yöntemi

Enzime bağlı bir immünosorbent testi, oldukça iyi bilinen ve yaygın bir tanıdır. Belki bazıları bunu hiç duymamışlardır, ancak bu çalışmanın, çok sayıda insan tarafından daha az bilinen ve kan içermeyen bir numunenin alındığı başka bir versiyonu vardır. Bu tekniğe gizli kan için dışkı analizi denir ve çoğu durumda hoş olmayan hislerin eşlik ettiği ek yorucu prosedürlerden kaçınmanıza izin verir.

Gizli kan (hemoglobin molekülleri) için bir ELISA testi, sindirim sistemi kanamasını, hastanın dışkısında dedikleri gibi çıplak gözle bulunamayan hafif bir kanamayı bile tespit etmeyi mümkün kılar. Kısa sürede insan dışkısında enzime bağlı bir immünosorbent tahlili, erken evrelerde belirli semptomların eşlik etmediği peptik ülser hastalığı, polipozis, divertiküloz, tümörleri gösterebilir.

Bugüne kadar, çok sayıda patolojinin AT ve AG'lerini bulma fırsatı sağlayan binlerce çeşit enzim immunoassay test sistemi oluşturulmuştur. Bu nedenle, bu analiz her yaş kategorisi için hemen hemen tüm tıp dallarında kullanılmaktadır. Ve mutlak zararsızlık, hem hamilelik sırasında hem de zayıflamış hastaların teşhisi için ona başvurmanıza izin verir.

Mevcut teşhis tekniklerinin listesi son yıllarda hızla genişlemektedir, teşhis uzmanları önceki tüm analizlerin avantajlarını yeni yöntemlerde birleştirmeye ve önceki dezavantajlarından kurtulmaya çalışıyorlar.

Son zamanlarda, teşhis prosedürleri listesinde gittikçe daha sık, enzim immunoassay ortaya çıkıyor - tıpla ilgisi olmayan sıradan bir kişinin çok az şey bildiği modern ve oldukça yeni bir test. Bununla birlikte, bu teknik, kalifiye tıbbi personel arasında yandaşlarının saflarına hızla katılıyor. Ne olduğu ve hangi durumlarda kullanılması gerektiği, özelliklerini ve temel özelliklerini öğrenerek anlamaya çalışabilirsiniz.

Enzim immunoassay, biyolojik materyallerde (araştırma için numuneler) spesifik proteinlerin tespitine izin veren moleküler reaksiyona dayanan "antijen-antikor" a dayanan enstrümantal bir laboratuar tekniğidir. Bu proteinler enzimler, çeşitli mikroorganizmalar (virüsler, bakteriler, mantarlar), protozoa vb. Olabilir.

Yöntemin keşfinden sonra, keşfedenlerin adıyla hiçbir ilgisi olmayan, ancak İngilizce versiyondaki tam ismin kısaltması olan ELISA testi adı verildi - enzime bağlı immünosorbent testi. Dünyanın her yerindeki doktorlar bu adı kullanıyor, Rusça konuşan ülkelerdeki bazı doktorlar da bu tür araştırmalara böyle diyorlar.

Yöntemin ana prensibi, "antijen-antikor" moleküler reaksiyonudur.

Bir antijen, patojenik mikropun bir parçası olarak insan vücuduna giren herhangi bir yabancı moleküldür. Antijenler genellikle protein molekülleridir. Mikroorganizmalara ek olarak, böyle bir "yabancı", gruba veya Rh faktörüne uymayan başka birinin kanındaki hücreler olabilir.

Vücuda böyle bir antijenin girmesine yanıt olarak, herhangi bir yabancı moleküle karşı korumayı amaçlayan bir bağışıklık tepkisi tetiklenir. Bu, bağışıklık sisteminin özel ajanlarının - antikorların (immünoglobulinler) sentezinden kaynaklanmaktadır. Her antikor, yalnızca spesifik bir antijen için uygundur ve patojenik "yabancıyı" onunla tek bir kompleks halinde bağlanarak nötralize eder. "Antijen-antikor" reaksiyonu adı verilen bu bağlanma sürecidir.

Antikor türleri

Tüm antikorlar (immünoglobulinler), immün yanıtın hangi aşamasında göründüklerine bağlı olarak 5 türe ayrılır:

ELISA teşhisi için, immünoglobulin IgG, IgM ve IgA seviyeleri çoğunlukla önemlidir. Kredileriyle, bir kişinin hastalığı daha önce geçirip geçirmediğini veya yakın zamanda enfekte olup olmadığını, bağışıklık geliştirip geliştirmediğini veya vücudunun patolojiye karşı savunmasız olup olmadığını öğrenebilirsiniz.

Enzim immunoassay'in avantajları ve dezavantajları

Şu anda ELISA en doğru ve hassas yöntemlerden biridir. Tıbbın çeşitli alanlarında uzmanlar tarafından benimsenmiş ve uygulamalarını genişletmeye devam etmektedir.

Yöntem avantajları

• Alınan verilerin yüksek doğruluğu.
• Duyarlılık (örnekte minimum patojen varlığında bile gerekli maddeyi tespit etmenize izin verir).
• Hastalığın ilk günlerinde veya kuluçka döneminde teşhis imkanı.
• Benzer doğruluktaki diğer tekniklerle karşılaştırıldığında veri toplama hızı.
• İşlemin yüksek otomasyonu ve minimum insan katılımı, bu da performansçının hatasını azaltır.
• Patolojik sürecin aşaması ve seçilen tedavinin etkinliği hakkında veri elde etmek.
• Malzeme seçiminde ağrısızlık ve düşük invazivlik.

Yöntemin dezavantajları

• Çoğu durumda, vücudun patojenin kendisine değil, patojenik maddeye tepkisini belirlemenize olanak tanır.
• Test oldukça spesifik olduğu için çalışmadan önce şüpheli hastalık kesin olarak bilinmelidir.
• Teknik sorunlardan, ilaç almaktan, hastanın vücudunda birkaç kronik hastalık veya metabolik bozukluğun eşzamanlı olarak bulunmasından kaynaklanan yanlış göstergelerin olasılığı.
• Sonuçların yorumlanması yalnızca yüksek nitelikli bir uzman tarafından yapılmalıdır, çünkü elde edilen verileri yorumlamak için özel bir eğitim ve belirli bir alanda büyük bir tıbbi bilgi birikimine sahip olmak gerekir.
• ELISA oldukça nadir bir analizdir, bu nedenle tüm teşhis laboratuvarlarında yapılmamaktadır.
• Yöntem oldukça pahalıdır, çünkü reaktiflere ek olarak, laboratuarın çok sayıda pahalı ekipmana ve özel enstitülerde üretilmiş antijen örneklerine sahip olması gerekir.

Enzim immunoassay hangi durumlarda kullanılır?

Bir enzim immünolojik testinin atanması için endikasyonların tam listesi çok geniştir, neredeyse tüm tıp dallarını içerir.

Çoğu zaman, ELISA aşağıdaki amaçlar için kullanılır:

• bulaşıcı hastalıkların belirlenmesi;
• cinsel yolla bulaşan hastalıkların teşhisi;
• bağışıklık durumunun veya bireysel otoimmün hastalıkların belirlenmesi;
• tümör belirteçlerinin belirlenmesi;
• hormonların belirlenmesi.

Bulaşıcı ve viral hastalıklar söz konusu olduğunda, teknik aşağıdaki patolojileri tanımlamanıza izin verir:

Ek olarak, ELISA, enfarktüs durumunu hızlı ve etkili bir şekilde belirlemenize, vücudun üreme potansiyelini değerlendirmenize, alerjileri, kaynağını vb.

Enzim immunoassay, yeni ilaçların geliştirilmesinde ve bunların insan vücudu üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesinde klinik araştırmalar için kullanılır.

Araştırma için örnek türleri ve seçim yöntemleri

Çoğu zaman, hastanın ulnar damarından alınan kan, enzim immunoassay için test materyalidir. Numune alma, çoğunlukla sabahları aç karnına yapılır. Kandan numune alındıktan sonra, çalışmaya müdahale eden tek tip hücreler ayrılır ve çıkarılır, geriye sadece serum kalır.

Genitoüriner enfeksiyonları teşhis ederken, genital organların mukoza dokularından, üretra veya serviksten mukus, rektumdan alınan numuneler, kasık bölgesindeki erozyon veya ülser kazıntıları ve vücudun diğer bölümlerinden bulaşmalar sıklıkla önemli hale gelir. Swablar ağız boşluğunun yanı sıra nazofarinksten de alınabilir.

Bazen amniyotik sıvının durumunu belirlemek için gebelik sırasında obstetrik ve jinekolojik uygulamalarda enzim immunoassay kullanılır. Bu durumda amniyon sıvısı örnek olur. Bunun için uzun bir iğne ile fetal mesaneye delik açılarak az miktarda sıvı alınır. Olası riskleri en aza indirmek için tüm manipülasyonlar steril bir aletle gerçekleştirilir.

Genellikle materyal beyin omurilik sıvısı veya seröz sıvı haline gelir. Bu, enjeksiyonla verilen lokal anestezi ile olur.

Enzim immunoassay için ne tür materyallerin gerekli olduğunu açıklığa kavuşturmak için çalışmaya gönderen uzmanın yapması gerekir. Örnekler genellikle birkaç türden aynı anda veya farklı konumlardan alınır. Bu tür bir muayene için sevk veren doktor, hastaya biyomateryalin verilmesi için yapılan hazırlık hakkında da bilgi vermelidir.

Enzim immunoassay için hazırlık

Enzim immünolojik testinden sonra elde edilen verilerin doğruluğunu artırmak için, malzeme seçimi için hazırlık aşağıdaki gibi olmalıdır:

• çalışmadan 10 gün önce antibiyotik, antiviral ve antimikotik ilaçları hariç tutun;
• günde alkol, sigara ve uyuşturucu almayı dışlamak gerekir;
• aynı dönemde, fiziksel aşırı zorlamalardan kaçınılmalıdır;
• reçete yazan uzmanını hastanın aldığı tüm ilaçlar hakkında uyarın;
• hamilelik veya şüpheli hamilelik durumunda doktora haber verin.

Test materyallerinin sabah aç karnına toplanması en iyisidir.

Teşhis, hormonal arka planın durumunu belirlemeyi amaçlıyorsa, o zaman kendinize bir gün önce sakin bir durum sağlamak ve gerginlikten kaçınmak önemlidir. Kadınlar için hormonlar için kan bağışı, randevu sırasında doktor tarafından söylenecek olan aylık döngünün süresi ile açıkça tanımlanır.

Malzemenin seçiminden 2-3 gün önce kızartma ve yağlı menüden çıkarılmalı ve hepatit analizinden önce turunçgiller ve diğer turuncu ve sarı meyve ve sebzeleri yemeyin.

Enzim immunoassay sonuçlarının deşifre edilmesi

Niteliksel bir çalışmanın sonucu genellikle “+” (bulunan) veya “-” (bulunamadı) ile gösterilir.

Bazı immünoglobulin gruplarının varlığına veya yokluğuna bağlı olarak, aşağıdaki sonuçlar çıkarılabilir:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) - hastalığa karşı bağışıklık tamamen yoktur (vücut daha önce bu tip antijenle karşılaşmamıştır);
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) - daha önce bu antijen veya bir aşı ile bir çarpışma vardı;
• JgM (+), JgG (- / +), JgA (- / +) - akut patolojik süreç (büyük olasılıkla birincil);
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - kronik seyir süreci;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) - nüks;
• JgM (-) - iyileşme aşaması.

Niceliksel değerler büyük bir bilgi yükü taşır, ancak yalnızca ilgili hekim bunları önceki endikasyonlara, hastanın yaşına ve her bir spesifik hastalığın normlarına göre yorumlayabilir. Bu nedenle sonuçları kendiniz değerlendiremezsiniz.

Sonuçları beklemek ne kadar sürer

Bu teknik, eldeki veri toplama süresinin belirlenmesine bağlı olarak birçok çeşide sahiptir. ELISA teşhisinin ortalama süresi 4-6 saattir, bu da ertesi gün sonuç vermenizi sağlar.

En uzun yöntemler örneğin HIV enfeksiyonu durumunda 10 güne kadar sürer.

Acil ihtiyaç durumunda 1-2 saat içerisinde cevabın alındığı ekspres yöntemlerin kullanılması mümkündür.

ELISA testini nereden alabilirim?

Bu tür teşhis için ekipman oldukça pahalı olduğundan, tüm laboratuvarlar satın alamaz. Ek olarak, belirli antijenleri içeren testlerin raf ömrü sınırlıdır (genellikle yaklaşık 1 yıl) ve bu nedenle sürekli güncellenmesi gerekir.

Bu nedenlerle, devlet tıbbı kurumlarında her zaman ELISA laboratuvarları bulunmaz. Çoğu zaman, büyük özel tıp veya büyük teşhis merkezlerine gitmeniz gerekir.

ELISA çalışması yürütmek için laboratuvarın özel bir lisansı olması ve personel ile laboratuvar teknisyenlerinin özel eğitim alması gerekir.

Çoğu zaman, hastayı muayeneye gönderen doktor tarafından belirli bir teşhis merkezi veya laboratuvar önerilir.

Enzim immünoanalizinin maliyeti

Bu çalışmanın fiyatı, ülkenin bölgesine ve hizmeti veren kliniğin seviyesine bağlıdır. Moskova'da, bir antijeni belirlemek için minimum fiyat 700 ruble'den başlıyor. Bir kerede birkaç immünoglobulin tanımlamak gerekirse, fiyat toplanacaktır.

Acil analiz durumunda, maliyet 150-200 ruble artar. her antijen için.

Oldukça yüksek maliyete rağmen, enzime bağlı immünosorban testi, hastanın muayenesini mümkün olduğunca bilgilendirici ve hızlı yapmanıza izin verir, bu da tedaviye başlamadan önce süreyi azaltır ve kişinin durumunu hızlı bir şekilde stabilize etmenizi sağlar.

Bu videoda "Enzim immünoanalizinin temelleri" filmi gösterilmektedir.

Şimdi, kural olarak, hastalara sadece bir test - enzim immünoassayinden geçmesi önerilir.

ELISA kan testi uygulaması

Bağlı immünosorbent testi - Bir laboratuvarda gerçekleştirilen son derece uzmanlaşmış bir analiz türü. Analiz, genellikle "antijen-antikor" olarak adlandırılan vücudun tepkisine dayanmaktadır.

Bu göstergeye dayanan analiz yöntemi% 99 doğruluk sağlar. Bu, bugün bilinen en doğru yöntemdir. Uygulamada, böyle bir analizin yanlış sonuç verdiği neredeyse hiç vaka olmamıştır.

Enzim immünodeney, çok çeşitli hastalıkların teşhisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Ana değeri, asemptomatik hastalıkların yüksek doğrulukla tespit edilmesine izin vermesidir.

Bildiğiniz gibi, bu tür hastalıkları erken aşamada tespit etmek genellikle sorunludur ve buna bağlı olarak zamanında iyileşmeye başlar.

Enzim immünoassay kullanılarak hangi hastalıklar teşhis edilir:

• onkolojik hastalıklar;
• cinsel yolla bulaşan enfeksiyonlar (HIV, klamidya, sifiliz, ureaplasmosis, herpes ve diğer hastalıklar);
• tüberküloz, kızamık, toksoplazmoz, hepatit ve benzeri;
• tiroid hormonları;
• seks hormonları;
• çeşitli otoimmün bozukluklar;
• alerjik reaksiyonlar ve bazı gıdalara karşı toleranssızlık.

Bu prosedür şunları tanımlamaya yardımcı olur:

• vücudun bakteri ve virüslerle enfeksiyonu;
• protein bazı;
• helmintik istilalar;
• yabancı vücutlar.

Aslında, ELISA prosedürü iki bölümden oluşur:

1. bağışıklık yanıtı;
2. enzimatik reaksiyon.

"Antijen-antikor" ilkesinin özü, hastalığın veya yabancı bir cismin etken maddesinin, yani antijenin, enfeksiyon kaynağı ile birlikte vücuda kademeli olarak girmesidir. Bu süreç, vücudu yabancı elementlerden korumak için tasarlanmış sözde bağışıklık tepkisini tetikler.

Böyle bir korumanın tezahürü, antijenin kendisine ve neden olduğu hastalığın semptomlarına bağlıdır. Bu şemaya "antijen-antikor" denir.

Tanının daha fazla güvenilirliği için, enzim immünoanalizinin tüm prosedürü sadece laboratuvarlarda ve tıp merkezlerinde gerçekleştirilir. Çeşitli antijenler ve antikorlar kan örneği ile etkileşime girer.

Böyle bir analiz ortaya koymalıdır:

Bağışıklık yanıtı nedir ve antijen tanıma nasıl belirlenir?

Bağışıklık tepkisi, analizin yapıldığı mikrobiyal hücrelerin moleküllerindeki biyolojik bağlantıları gösterir. Bağışıklık tepkisi, kapsamlı bir ELISA programının bileşenlerinden yalnızca biridir, ikinci bileşen ise enzimatik bir reaksiyondur.

Antijen tanıma, bağışıklık sistemi hücresinin (immünosit) bir yabancı hücre ile teması sırasında meydana gelir. Antijenlerin bireysel özellikleri, bağışıklık sistemi için "arkadaş veya düşman" ı tanımanın bir aracıdır.

Bir antijen zararlı olarak kabul edildiğinde, vücut zararlıyı ortadan kaldırmak için bir bağışıklık tepkisi ile cevap verecektir.

Hangi antikorlar var?

Aslında, antikor:

• Basitçe bir immünositin yüzeyinde bulunan bir moleküldür.
• Bu molekül yabancı hücreleri tanımak için kullanılır.

Antijen hakkında alınan bilgilerin iletimi hücresel düzeyde gerçekleşir. Hücre bağışıksa bağlantı yok edilir, ancak değilse, vücut doğal bir savunma reaksiyonu başlatır.

Modern bilim, aksi takdirde immünoglobülinler veya protein yapıları olarak adlandırılan 5 antikor sınıfını bilir.

Antikorlar için Latin harfleri kullanılır: A, D, E, G ve M.

Analiz sonuçlarında bu gösterimler şuna benzer:

ELISA prosedürü

Her şeyden önce, 96 kuyu içeren özel polistiren plakalar hazırlamak gerekir. Analizden önce, her oyuğun duvarları adsorban antijen ile muamele edilir.

Kan serumu tedavi edilen hücrelere damlatılır. Homolog antikorlar ve antijenler, güçlü bağlar oluşturmak için birbirleriyle reaksiyona girerler. Serbest gövdeler yıkanır. Daha sonra oyuklara özel olarak etiketlenmiş enzim elementleri ile birlikte immünoglobulin antikorları eklenir.

Reaktifler, analiz edilen serumdaki antikorların tanımlanmasını kolaylaştırmak için etiketlenir. Durulamadan sonra reaksiyonu hızlandıran ve oyukları renklendiren bir kromojenik eleman eklenir. İncelenen enzimle karşılaştırıldığında renk yoğunluğu, kan örneğindeki yaklaşık antijen yüzdesini gösterir.

Teknisyen daha sonra optik sıvıyı şunları yapmak için kullanır:

• kuyulardaki antikor konsantrasyonunu ölçmek;
• elde edilen sonucu bir kontrol numunesi, yani bir standart ile karşılaştırın;
• Özel bir ölçek kullanarak antikor konsantrasyonunu hesaplar.

Helmintik istilaların analizi için, kendi norm göstergeleri ve ondan sapma göstergeleri ile test sisteminin özel bir versiyonu kullanılır.

Analiz için hazırlık

Enzim immunoassay için kan serumunun örneklenmesi sadece bir laboratuvarda yapılır. Damardan kan alırlar, analiz sürecini ve sonuçlarının doğruluğunu etkileyebilecek elemanları oradan çıkarırlar. Sabahları aç karnına analiz yapın.

Enzim immunoassay sonuçlarının deşifre edilmesi

Antikorların kalitesi ve miktarı, hastanın vücudunda patojenler dahil yabancı elementlerin varlığını gösterir. Aynı işaretler vücutta enflamatuar bir sürecin başladığını gösterir.

ELISA sonuçlarının kodunun çözülmesine bir örnek:

Hastalığın evresi	IgA	IgM	IgG
Birincil (enfeksiyon anından itibaren 2 hafta)	+	—	—
Birincil (enfeksiyon anından itibaren 2,5-3 hafta)	+	+	—
Birincil (enfeksiyon anından itibaren 3-4 hafta)	+	+	+
Kronik fazın alevlenmesi (alevlenmenin başlangıcından 2 hafta sonra)	+	—	+
Kronik	+/-	—	+
Geçmiş (enfeksiyon iyileşti)	—	—	+
Kurtarma	Başarılı tedaviden sonra titre 2-4 kat azaldı	—	Başarılı tedaviden 1-1.5 ay sonra titre 4-8 kat azaldı
Sonuç negatif	—	—	—

Tek başına, bu yöntemle yapılan kantitatif analiz, hastalığı doğru bir şekilde teşhis etmeyi, bir tedavi sürecini reçete etmeyi ve ilaçların dozajını belirlemeyi henüz mümkün kılmamaktadır.

ELISA'nın artıları ve eksileri

Ne yazık ki, avantajlarından başka, tüm test yöntemlerinin, en gelişmiş ve son derece doğru olanların bile dezavantajları vardır.

Enzim immünoanalizinin faydaları:

• Teşhis yönteminin uzmanlığı;
• Bu yöntemin artan duyarlılığı;
• En son teknolojilerin uygulanması.

Teşhis yönteminin duyarlılığı, test materyali içindeki konsantrasyonu çok düşük olsa bile, arzu edileni bulma olasılığının yüksek olmasıdır.

Bu analiz yönteminin olası dezavantajları:

1. Hastalığın doğasının belirlenmesini varsayar, yani bu durumda sezgisel olarak doğru teşhisi “tahmin etmek” imkansızdır;
2. Yüksek analiz maliyeti.

Duodenal ve direkt enzim immünoanalizinin karşılaştırılması

ELISA prosedürü, doğrudan etiketlerle bağ oluşturarak antikorların antijen bulma yeteneğini kullanır. Bu analiz yöntemi endüstriyel olarak kabul edilir; sonucun bekleme süresi bir saatten fazla değildir.

Fermantasyondan sonra özel bir alt tabaka etiketi görünür. Antikorların seviyesi, incelenen biyomateryaldeki antijenlerin oranına karşılık gelir.

Duodenal (dolaylı) enzim immünoanaliz 2 aşamada gerçekleştirilir:

1. İlk olarak, etiketlenmiş antikorlar, istenen antijenler ile karşılaştırılır;
2. Önceki aşamada bulunan etiketlenmemiş antikorlara etiketli antikorları uygulayın.

Böylece, antijenlerin ve antikorların çifte kontrolü sağlanır ve analizin güvenilirliği artar.

Laboratuvardaki dolaylı ELISA ile antijen, kuyunun yüzeyine sabitlenir, antikorların etiketlenmemiş kısmı ile bağlar oluşturur.

Duodenal yöntemin avantajları:

• Doğruluğu önemli ölçüde artıran, çalışılan biyomateryalin çift kontrolü;
• Analiz yönteminin kendisinin artan doğruluğu ve özgüllüğü.

Bununla birlikte, bu yöntem çok zaman alır ve bir dizi ek adım içerir. Bununla birlikte, çalışmanın doğruluğu o kadar yüksektir ki bu dezavantajı haklı çıkarır. Bu nedenle çoğu doktor duodenal analiz yöntemini önermektedir.

Nereye gitmek, ne kadar beklemek ve ne kadar ödeme?

Gerekli tüm araçlara ve sarf malzemelerine sahipseniz, sonucu doğumdan sonraki 2 gün içinde alabilirsiniz. Laboratuvarın ekspres analiz hizmeti varsa, numune sadece 3-5 saat içinde işlenebilir.

ELISA'yı nereden alabilirim:

• devlet kliniğinde;
• özel kliniklerde.

Enzim immunoassay fiyatları doğrudan belirli bir klinikteki fiyat seviyesine bağlıdır, ortalama olarak fiyatı en az 4000 ruble.

Bu çalışmadan elde edilen bilgiler tıp bilimine yararlı bir katkı olabilir, ancak hasta, bir enzim immünolojik testinin maliyeti çok yüksek olduğundan, bu prosedürü güvenilir, zaman içinde test edilmiş bir kliniğe emanet etmenin daha akıllıca olacağını hatırlamalıdır.

Ne yazık ki, devlet sağlık kurumları her zaman en son bilim ile donatılmış değildir. Biyomateryalin yüksek kalitede örneklenmesi ve bölge kliniğinde işlenmesi için gerekli cihazlar mevcut olmayabilir.

ELISA için bir klinik seçerken, bu kurumun evrensel olarak tanınan uluslararası sertifikalara sahip olup olmadığını kontrol etmelisiniz.

Peki, enzim immünolojik testi hasta için nasıl yararlıdır:

• helmint istilasını erken bir aşamada tespit etmenizi sağlar;
• bunun bir sonucu olarak, tedaviye zamanında başlamanızı sağlar;
• yöntemlerin kararlılığı, analizin çocuklarda ve yetişkinlerde eşit doğrulukta yapılmasını mümkün kılar.

Enzime bağlı immünosorban testi sadece kalitatif değil, aynı zamanda kantitatif bir faktör de gösterir, yani sadece hastanın vücudunda helmintlerin varlığının gerçekliğini göstermekle kalmaz, aynı zamanda sayılarını tahmin etmeyi mümkün kılar.