Ifa usuli bilan aniqlangan OIVga antikorlar. Qaysi holatlarda va qachon OIV uchun ELISA o'tkaziladi? Antikorlar nima

OIV infektsiyasi - bu uzoq vaqt asemptomatik davrga ega bo'lgan og'ir virusli kasallik bo'lib, u inson immunitetiga zarar etkazuvchi va kech tashxis qo'yilganligi sababli xavfli hisoblanadi. Ko'pincha "OIV" va "OITS" atamalari bir-birining o'rnida ishlatiladi, aslida OITS OIV infektsiyasining oxirgi (oxirgi) bosqichidir, uning davomiyligi 1-2 yil. Tadqiqot ma'lumotlariga ko'ra, infektsiyani yuqtirgan paytdan boshlab kasallikning terminal bosqichiga o'tish davolanmasa, o'rtacha 9-11 yil davom etadi. ELISA yoki OIV uchun PCR-tahlil orqali kasallikni erta tashxis qilish sizga tanada immunitet tanqisligi virusi mavjudligiga qaramay, antiretrovirus terapiyasini o'z vaqtida boshlash, kasallikning rivojlanishini to'xtatish va ko'p yillar davomida to'liq hayot kechirishga imkon beradi.

OIV yuqish yo'llari:

himoyalanmagan jinsiy aloqa;
qon va qon mahsulotlarini quyish;
tibbiy aralashuvlar paytida steril bo'lmagan vositalardan foydalanish;
tibbiy xodimlarning steril bo'lmagan asboblar bilan shikastlanishi;
perinatal infektsiya: homiladorlik va tug'ish paytida virusni yuqtirish.

OITS (OIV) testlari buyuriladi:

tasodifiy jinsiy aloqa bilan;
homiladorlikni rejalashtirishda va homiladorlik paytida;
kasalxonaga yotqizishga tayyorgarlik ko'rishda;
og'irlikning keskin pasayishi bilan;
noma'lum kelib chiqqan tana haroratining uzoq vaqt oshishi bilan.

OIV uchun tez qon tekshiruvi

OIV lentiviruslar (Lentivirus) subfamilyasi retroviruslar (Retroviridae) oilasiga tegishli. Inson tanasida bir marta u immun tizimining hujayralariga, T-yordamchilari, makrofaglar, dendritik hujayralarga ta'sir qiladi. Retrovirus o'zining RNKini mezbon hujayraning genomiga kiritilgan DNKning bir qismiga aylantiradi. Ta'sir qilingan hujayra bo'linganda, qiz virusli genom oladi. Vujudga kirgan hujayralar yuzasida virusning antijenlariga antijismlar ishlab chiqariladi, ularning aniqlashida ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlil (ELISA) usulida OIV infektsiyasi tashxisi aniqlanadi. Tahlilni taxmin qilingan infektsiyadan 1,5 - 3 oy o'tgach o'tkazish tavsiya etiladi, ilgari ELISA testi informatsion emas. Hemotest laboratoriyasida alternativ usul - Real-Time PCR (real vaqtda PCR) qo'llaniladi, bu OIVga antikorlarni emas, balki organizmdagi virusni aniqlaydi. Ushbu usul o'zining yuqori sezgirligi va ishonchliligi bilan virusning zarralarini potentsial infektsiya paytidan boshlab, 10 kundan keyin (qonda antikorlar yo'qligida) aniqlashga imkon beradi.

"seronegativ oyna" paytida virusni aniqlash;
immunoblotning shubhali natijasi bilan;
virusning genotipini - OIV-1 yoki OIV-2 ni aniqlash;
tanadagi virusli yuklarni boshqarish;
agar onasi OIV bilan kasallangan bo'lsa, yangi tug'ilgan chaqaloqlarning OIV bilan kasallanishini aniqlash;
qon quyishdan keyin.

Anonim OIV testi

Rossiya Federatsiyasining 38-FZ-sonli Federal qonunining 8-moddasi 2-bandiga ko'ra, bemor anonim ravishda OIV testini o'tkazishi va oshkor etilishi shart bo'lmagan shaxsiy buyurtma raqami yordamida natijani olishi mumkin. Hemotest laboratoriyasining bo'limlaridan birida biron bir sababga ko'ra ko'rikdan o'tolmaganlar uchun qonni olish uchun hamshiraning tashrifidan foydalanishni tavsiya etamiz, bunda namuna sifatida ro'yxatdan o'tgan namunani ro'yxatdan o'tkazish kerak.

Diqqatingizni quyidagiga qarating:oITS (OIV) uchun anonim test natijalarini kasbiy ko'rikdan o'tkazish, kasalxonaga yotqizish yoki poliklinikadagi davolovchi shifokorga ko'rsatish uchun foydalanib bo'lmaydi.

OIV testining natijalari, ularning natijalaridan qat'i nazar, bemorning laboratoriya bo'limiga shaxsiy tashrifi bilan beriladi. Voyaga etmaganlar (14 yoshgacha) bolalarni tekshirishda - buyruqda ko'rsatilgan qonuniy vakil.

Natijalar shartnoma, smeta va bemorning shaxsini yoki ushbu buyruqda ko'rsatilgan bemor vakilining shaxsini tasdiqlovchi hujjat taqdim etilgandan so'ng chiqariladi.

Tadqiqot natijalari telefon yoki elektron pochta orqali xabar qilinmaydi.

Mabodo OIV infektsiyasi tahlili HOSPITALIZATSIYA TAYYORLASH MAQSADIDA yoki Sog'liqni saqlash tizimiga yozilish uchun tayinlangan bo'lsa, o'z holatlarida tashish uchun arizalarni ro'yxatdan o'tkazish bemor tomonidan quyidagi ma'lumotlarni taqdim etilishi bilan amalga oshiriladi:

1) Moskva va Moskva viloyati aholisi uchun

Familiyasi ismi otasini ismi
Tug'ilgan kun, oy va yil
Ro'yxatdan o'tish ma'lumotlari
Pasport
Sug'urta polisi (sug'urta polisining seriyasi va raqami, sug'urta kompaniyasining nomi).

2) Rossiya Federatsiyasining boshqa hududlari aholisi va chet el fuqarolari uchun qo'shimcha ravishda - pasportning fotokopisi (skaneri).

Familiyasi ismi otasini ismi
Tug'ilgan kun, oy va yil
Ro'yxatdan o'tish ma'lumotlari
Sug'urta polisi (sug'urta polisining seriyasi va raqami, sug'urta kompaniyasining nomi)
Pasport nusxasi (skanerlash)

Qancha OIV testi o'tkaziladi?

ELISA testining natijalarini 1 ish kunida olish mumkin, ammo taxmin qilingan infektsiya paydo bo'lgan kundan boshlab 1,5-3 oydan oldin emas, PCR diagnostikasi natijasini taxmin qilingan infektsiya paytidan boshlab 10 kun ichida topish mumkin. Real-Time PCR usuli bilan sinovni bajarish muddati 3 ish kunini tashkil qiladi.

Ayni paytda odamlarda OIV (immunitet tanqisligi virusi) tashxisiga alohida e'tibor qaratilmoqda. Kasallikni erta bosqichda aniqlash davolanish kursini erta boshlashga yordam beradi va bu bemorning hayotini kuchaytirishga sezilarli ta'sir qiladi.

OIV testini o'tkazgandan so'ng, natijalarning dekodlanishi, qoida tariqasida, ijobiy yoki salbiy hisoblanadi. Shu bilan birga, birlamchi tashxis va ikkilamchi tashxis mavjud. Boshlang'ich bilan - odam ELISA yordamida tekshiriladi. Agar kerak bo'lsa, OIV uchun ikkinchi qon tekshiruvi o'tkaziladi. Ijobiy va salbiy natija nimani anglatadi? OIV testining stsenariysi qanday tayyorlanadi? Giyohvand va alkogolli bo'lmagan odam nima uchun immunitet tanqisligi virusi uchun tahlilni shifrlash ijobiy, ammo shubhali natijani beradi?

OIV haqida

Kasallikning qo'zg'atuvchilari 1 va 2-tipga kiradi. Uzoq vaqt davomida odamlarda ularning mavjudligi e'tiborga olinmaydi, keyin immunitet birinchi navbatda, keyin boshqa inson tizimlariga ta'sir qiladi.

Immunitet tanqisligi virusini laboratoriya diagnostikasining asosiy usuli bilan OIVga qarshi antikorlar aniqlanadi. Ushbu usulning asosi fermentga bog'liq immunosorbent tahlil (ELISA) bo'lib, u sezgir (99,5% va undan yuqori) va o'ziga xos (99,8% va undan yuqori). Bundan tashqari, ELISA yordamida OIVni tashxislashda p24 antijeni aniqlanadi.

Har bir sinov tizimida turli xil ko'rsatkichlar mavjud, shu sababli ular virusli konvertlarning turli xil protein tuzilmalarini aniqlaydilar. OIV infektsiyasining qo'zg'atuvchilari ikkita pastki turga bo'linadi: 1-chi yoki 2-chi yoki OIV-1 va OIV-2. Virusli zarralar tashqi fosfolipid membranasi bilan sharsimon shaklga o'xshaydi. Birinchi kichik tip uchun u quyidagi molekulyar og'irlikka ega: gp120, gp41, gp160. Ikkinchi kichik tip gp105, gp36, gp140 ni o'z ichiga oladi. Virusning ichki zarfi uchun molekulyar og'irlik ham ma'lum. Birinchi kichik tiplar uchun ular p55, p17, p24. 2-chi uchun - p16, p25, p55.

Virusni aniqlash uchun har bir sinov tizimida uchta asosiy oqsil to'plami mavjud.

Umuman olganda, ELISA natijasi quyidagicha bo'lishi mumkin:

salbiy;
noto'g'ri ijobiy;
noto'g'ri salbiy;
shubhali yoki noaniq.

Diagnostika usulida antijenler, antikorlar aniqlanadi.

Oddiy natija haqida

Norm - bu nimani anglatadi? OIV testi salbiy bo'lsa, bu normal hisoblanadi.

1. ELISA sinov tizimlarining so'nggi avlodi OIV va oqsil zarralariga antikorlarning mavjudligini aniqlashi mumkin. Agar tahlil normal bo'lsa, unda qonda antijismlar va patogenning oqsil zarralari topilmaydi. Ammo agar odam tug'ilgunga qadar 3 oy davomida infektsiya xavfi bo'lmagan bo'lsa, buning asosida odamning sog'lom ekanligiga ishonch bilan aytish mumkin. Aks holda, bir muncha vaqt o'tgach, yana bir bor, testlarni takrorlash kerak.

OITV faqat 6 oydan keyin aniqlangan holatlar mavjud. Shuning uchun, agar natija salbiy bo'lsa va OIV bilan kasallangan bemor bilan aloqa bo'lsa, ishonchliligi uchun uch, to'rt va olti oydan keyin testlarni takrorlash kerak. Shunday bo'ladiki, ELISA salbiy natijani berdi va odam OIV alomatlari borligiga shubha tug'dirsa, yana testdan o'tish tavsiya etiladi. Noto'g'ri natija, tahlilni erta boshlashi yoki inson omillari tufayli mumkin.

2. Agar salbiy natija immunoblot tomonidan olingan bo'lsa, hozirgi paytda bu eng ishonchli tahlildir.

Agar odamda immunitet tanqisligi virusi bo'lsa va natijasi salbiy bo'lsa, ehtimol bu testning har qanday bosqichida yuzaga kelishi mumkin bo'lgan tibbiy xatodir. Agar uch-olti oydan keyin immunoblotni takrorlaganingizda, natija salbiy bo'lsa, unda tashvishlanadigan hech narsa yo'q, bu normani anglatadi. Va faqat immunoblotning salbiy reaktsiyasidan so'ng, OIV testi salbiy ekanligi to'g'risida sertifikat beriladi.

3. Immunitet tanqisligi virusini tashxislashda kattalardagi PCR tadqiqotlari juda kamdan-kam hollarda qo'llaniladi va bu usul yangi tug'ilgan bolalar uchun qo'llaniladi.

Salbiy natija ham bu erda norma hisoblanadi.

4. Sotsiologik tadqiqotlar natijalariga ko'ra, ko'p odamlar tezkor OIV testidan foydalanadilar. Salbiy chiziqni ko'rgan odamlar tinchlanadilar va tibbiy muassasaga borishdan bosh tortadilar, hatto OIV infektsiyasining barcha belgilari bo'lsa ham. Ammo shuni bilishingiz kerakki, ekspress testning aniqligi sakson besh foiz. Bundan tashqari, uyda siz noto'g'ri yo'l tutishingiz mumkin, aks holda uni saqlash shartlari buziladi. Natija noto'g'ri ekanligi ehtimoli ko'proq. Ishqoriy mineral suvni sinovdan 8 soat oldin ham ichish sinov natijasiga ta'sir qiladi. Shu sababli, immunitet tanqisligi virusi odamlarda ekspress test asosida yo'qligi, hatto u salbiy bo'lsa ham, har doim ham haqiqiy tasdiqdan uzoqdir.

Kodni tahlil qilish

Odamlarda sinov o'tkazilgandan so'ng, ko'pincha tadqiqot natijasini qanday topish kerakligi, agar OIV uchun ijobiy natija olinsa nima qilish kerakligi haqida savol tug'iladi.

1. Agar ELISA ushbu test tizimiga muvofiq antijismlarga qarshi deyarli barcha antikorlarning mavjudligini ko'rsatgan bo'lsa, bu OIV uchun ijobiy test degan ma'noni anglatadi. Agar ikkinchi serologik fermentga bog'liq immunosorbent tahlilidan keyin javob ijobiy bo'lsa, unda immunoblot o'tkazish kerak. Uning natijalarini shifrlash yanada to'g'ri bo'ladi. Agar immunitetni pasaytiradigan ferment ijobiy natija bergan bo'lsa, keyingi immunoblot tahlilida ham OIV borligi aniqlandi, keyin yakuniy natija qo'yiladi. Sinovlar shifrlangandan so'ng, siz ijobiy OIV testini quyidagilar bilan aniqlashini bilishingiz kerak.

infektsiyadan 28 kun o'tgach 60% dan 65% gacha;
80% - 42 kundan keyin;
90% da - 56 kundan keyin;
95% - 84 kundan keyin.

Agar OIVga ijobiy javob bo'lsa, demak, bu virusga antikorlar aniqlangan. Noto'g'ri ijobiy javob bermaslik uchun testlarni yana, yaxshisi ikki marta topshirish kerak. Agar ikkita sinovdan ikkitasida yoki ikkitasida 3 ta testni o'tkazishda immunitet tanqisligiga antikorlar aniqlansa, natija ijobiy deb hisoblanadi.

P24 antijeni qonda infektsiyadan 14 kun oldin aniqlanishi mumkin. Immunoassay ferment usuli yordamida ushbu antijen 14 dan 56 kungacha aniqlanadi. 60 kundan keyin u endi qonda bo'lmaydi. Organizmda OITS paydo bo'lganda, bu p24 oqsil yana qonda ko'payadi. Shuning uchun ferment immunoassay test tizimlari infektsiyaning dastlabki kunlarida OIVni aniqlash yoki kasallikning qanday rivojlanishini aniqlash va davolash jarayonini kuzatish uchun ishlatiladi. Ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlilining yuqori analitik sezgirligi biologik materialda p24 antijeni birinchi kichik tipdagi OIV bilan 5 dan 10 pkg / ml konsentratsiyada, ikkinchi turdagi OIV bilan 0,5 ng / ml dan past bo'lganida aniqlanadi.

2. Ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlilining shubhali natijasi shuni anglatadiki, tashxis biron bir joyda o'tkazilgan, demak, tibbiyot xodimlari biror narsani chalkashtirib yuborishgan yoki odamda infektsiya belgilari bor va natijasi salbiy, bu shubhani keltirib chiqaradi, odam ikkinchi tekshiruvga yuboriladi.

3. Noto'g'ri musbat natija qonni topshirish bemorning quyidagi sharoitida amalga oshirilganida tushuniladi:

homiladorlik;
agar odamda gormonal buzuqlik bo'lsa;
uzoq muddatli immunosupressiya bilan.

Bunday holda tahlilni qanday hal qilish kerak? Kamida bitta protein aniqlangan bo'lsa, soxta ijobiy natija beriladi.

Ushbu usul yordamida p24 antijeni individual o'zgarishlarga juda bog'liq bo'lganligi sababli, infektsiyaning birinchi davrida bemorlarning 20% \u200b\u200bdan 30% gacha aniqlanadi.

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi usuli bo'yicha tadqiqotdan keyin ko'rsatkichlar haqida

Ushbu usul yordamida OIV RNK va DNK infektsiyadan deyarli darhol aniqlanadi. Ammo yakuniy tashxis qo'yilmaydi, u boshqa usullar bilan majburiy tasdiqlashni talab qiladi. "PCR natijasini aniqlashga yordam bering." - bunday so'rovni ko'pincha eshitishingiz mumkin. Agar immunitet tanqisligi virusi aniqlansa, bu holda nima yoziladi? PCR yordamida o'tkazilgan tahlil natijalariga javob berganda, millilitr qonda RNK nusxalari soni ko'rsatiladi. Quyidagi jadval qonda miqdoriy xususiyatlarga qarab natijani ko'rsatadi.

OITSga test o'tkazishda yuqoridagi jadvaldan foydalanish yaxshidir, chunki bu kasallikning bosqichini osongina aniqlashi mumkin.

Turli xil sinov tizimlarini hisobga olgan holda ushbu jadvallar immunoassay va immunoblotting fermentining har bir usuli uchun laboratoriya xonalarida joylashgan.

Ko'pincha so'raladi: "CD4 indikatori bo'yicha polimeraza zanjiri reaktsiyasi usuli bilan o'rganishdan keyin javobni toping." Oddiy CD4 hujayralar soni millilitrga biologik material uchun 600 dan 1900 gacha. Bu OIVning salbiy holatiga mos keladi. Ammo bilishingiz kerakki, bu ko'rsatkichlar, hatto sog'lom odamlarda ham, bu diapazonda emas.

Zamonaviy dunyoda ko'plab laboratoriyalarda yaxshi jihozlar mavjud bo'lib, ular yordamida siz tarkibidagi OIV infektsiyasining tarkibini tekshirishingiz mumkin.

Bilan aloqada

Zamonaviy tibbiyotning rivojlanishi tufayli, shifokor tashxis qo'yishda endi kasalliklarning bilvosita namoyon bo'lishiga e'tibor bermaslik yoki ko'p bosqichli laboratoriya tekshiruvlarini o'tkazish kerak emas. Taxmin qilinadigan dastlabki tashxisni tasdiqlaydigan yoki rad etadigan bitta tahlilni o'tkazish kifoya.

Ushbu usul ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlilidir (ELISA) - ushbu tadqiqot turli patologiyalarga xos bo'lgan o'ziga xos antikorlarni va antijenlarni aniqlash imkonini beradi, bu tashxisni sezilarli darajada tezlashtiradi.

ELISA tahlili - bu virusga qarshi kurashish uchun tanada ma'lum antikorlarning mavjudligini yoki yo'qligini aniqlashga yordam beradigan bunday laboratoriya ishi (usul).

Tadqiqotning asosi tabiiy reaktsiya antijeni (tanaga zararli narsa) - antikor (zararli ob'ektlarni yo'q qiladigan protein), bu turli viruslar va bakteriyalar mavjudligini aniqlashga imkon beradi.

ELISA - bu tananing tabiiy immun reaktsiyasi - antikorning tegishli antijen bilan o'zaro ta'siri. Shunday qilib, ELISA paytida antigenlar yoki antikorlar material bilan sinov naychasiga qo'shiladi, shundan so'ng hosil bo'lgan antijism-antikor komplekslarining kontsentratsiyasi aniqlanadi.

Agar gugurtlar hosil bo'lsa, unda immunitet komplekslari paydo bo'ladi, keyin bo'yoqning birlashtirilgan molekula bilan fermentativ reaktsiyasi sodir bo'ladi. Bu fermentativ ko'rsatkich paytida rang o'zgarishi bilan, kasallik aniqlangan birikma darajasini o'rgangandan so'ng aniqlanadi.

Immunoglobulinlarning turlari

Inson immunoglobulinlari og'ir zanjirlarning (H-zanjirlar) xususiyatlari, tuzilishi va antijenik xususiyatlari bo'yicha bir-biridan farq qiluvchi bir necha sinflarga bo'linadi. Barcha sutemizuvchilarda, shu jumladan odamlarda, immunoglobulinlarning tegishli sinfga tegishli ekanligini aniqlaydigan besh H-zanjiri ajratilgan: G, M, A, D, E.

Har bir sinf bir-biridan biologik xususiyatlari va antijenlarni bog'lash qobiliyati va molekula bilan aloqaning tezligi va kuchliligi jihatidan farq qiladi.

Har bir immunoglobulinning funktsiyalari (lg) farq qiladi:

Tanadagi miqdor

Vazifalari

Yarimparchalanish davri (kun)

Qiymati

70%

Yangi tug'ilgan chaqaloqda passiv immunitetni shakllantirish;

immunitet reaktsiyasi uchun zarurdir

fagotsitozni yaxshilash;

21-24

yuqumli kasalliklarda uzoq muddatli humoral immunitetni ta'minlang

5-10%

fagotsitozni faollashtirish uchun kerak,

5 ta antigen molekulasini bog'lash qobiliyatiga ega,

Birlamchi immunitet reaktsiyasini ta'minlaydi

10-15

Toksinlar va viruslarni zararsizlantiradi

erta immunitetni shakllantirish uchun zarur

Immunoglobulinlarning paydo bo'lishi "zanjir" ning bir turi - lgM lgG bo'yicha sodir bo'ladi, bu tanadagi antijen paydo bo'lishiga reaktsiya beradi. Laboratoriya diagnostikasi vaqtida uchta asosiy immunoglobulinlarning kontsentratsiyasi baholanadi - G, M, A.

Immunoglobulinlarni tahlil qilish uchun ko'rsatmalar

ELISA tahlili har yili tobora ommalashib bormoqda.

Bunday o'rganish tashxisni tezlashtiradi va bu quyidagi patologiyalarni davolashda juda muhimdir:

virusli gepatit;
OIV infektsiyasi;
sitomegalovirus,
epstein-Barr virusi,
gerpes virusi,
qizilcha,
sil kasalligi,
salmonellyoz,
dizenteriya,
shomil bilan ensefalit,
helicobacter bakteriyalari,
borrelioz,
qoqshol
sifiliz,
difteriya,
leptospiroz,
xlamidiya,
ureaplazmoz,
mikoplazmoz,
ko'k yo'tal.

yassi qurtlar
askaris
gistologik amoeba,
jigar titroqlari,
lambliya,
toksoplazma,
trichinella,
fluke,
cestodosis.

ELISA - bu otoimmün patologiyalar va malign neoplazmalarning o'ziga xos belgisi.

Sinovga tayyorgarlik

Tadqiqotga tayyorgarlik ko'rayotganda, siz quyidagi qoidalarga amal qilishingiz kerak.

Shifokorlar, shuningdek, maxsus parhezga rioya qilishni maslahat berishadi - yog'li va qizarib pishgan ovqatni istisno qilish, agar tadqiqot gepatit uchun o'tkazilsa, apelsin sabzavotlari va ayniqsa tsitrus mevalarini iste'mol qilmaslik kerak. Ertalab bo'sh qoringa qon berish kerak.

Noto'g'ri ijobiy tahlil, bajarilmagan tavsiyalar, ayniqsa yog'li ovqatlar iste'moli tufayli, plazmadagi triglitseridlarning juda yuqori konsentratsiyasiga olib keladi, buning natijasida ELISA o'tkazuvchanligi pasayadi.

Namuna olish tartibi

Sinov materiallari sifatida butun qon, zardob yoki venoz qon plazmasi ishlatilishi mumkin. Material to'planadi, odatda kubital venadan bir martalik igna va vakuum trubkasi yordamida 5-10 ml qon talab qilinadi.

Natijaning aniqligi uchun tanlab olishning to'g'ri usuliga rioya qilish kerak - tomirning o'zi va uning atrofidagi to'qimalarni teshish bitta manipulyatsiyada bajarilishi kerak, shuning uchun katta diametrli qisqa igna ishlatiladi, shunda tomirning qarama-qarshi devori shikastlanmaydi va qizil qon tanachalari zarar ko'rmaydi.

Shuningdek, qizil qon tanachalarining yaxlitligini saqlab qolish uchun qonning mesh naychasining devorlariga tushishi kerak.

Saqlash paytida uning mumkin bo'lgan ionlanishiga yo'l qo'ymaslik kerak, bundan tashqari, material dezinfektsiyalash vositalarining qoldiqlari bilan aloqa qilmasligi kerak, shuning uchun bemorning ismi, materialni etkazib berish sanasi va vaqti ko'rsatilgan faqat bir marta ishlatiladigan plastik naycha ishlatiladi.

Agar sinov materialini qisqa muddatli saqlash talab etilsa, u holda harorat 2-4 ° C bo'lgan sovutish kamerasi ishlatiladi, agar uzoqroq saqlash talab etilsa, u holda -20 ° C haroratda muzlatiladi.

Tahlil qanday amalga oshiriladi

Sinov materialini tayyorlagandan so'ng, laboratoriya yordamchisi kerakli manipulyatsiyalarga o'tadi. Buning uchun tananing tirnash xususiyati beruvchi moddaga reaktsiyasini qo'zg'atish qobiliyatiga ega bo'lgan bir qator maxsus antijenler qo'llaniladi, bular turli infektsiyalar, gormonlar, allergenlardir.

Kutilayotgan "antijism-antikor" reaktsiyasining sxemasi quyidagicha:

Birlamchi reaktsiya aniqlanadigan Ig (Ab) va tozalangan patogen antijeni (Ag).
Olingan immun komplekslarni aniqlash uchun yangi immunologik reaktsiya paydo bo'ladi, bunda maxsus Ig antigen rolini o'ynaydi va Ig konjugati (Ab) buning uchun antikor vazifasini bajaradi.
Oxirgi bosqich - bu konjugatlangan molekula katalizatori bilan birgalikda enzimatik reaktsiya. Substrat xromogen (rangli emas) bo'lib, u reaktsiya paytida ranglanadi va rangning qizg'inligi namunadagi immunoglobulinning miqdoriy ko'rsatkichi bilan belgilanadi.

Hozirgi vaqtda ELISA-ning turli xil variantlari ishlab chiqilgan, ularning aniq tasnifi yo'q. Odatda, usullar heterojen va bir hil turlarga bo'lish asosida ko'rib chiqiladi - tahlilning barcha bosqichlari qattiq fazadan yoki faqat eritmani ishlatishdan iborat.

Zamonaviy klinik diagnostika laboratoriyalarida odatda heterojen (qattiq fazali) ELISA qo'llaniladi, bunda qattiq faza polistirol mikroplitada joylashgan maxsus quduqlarning qattiq yuzasida antijenler yoki antikorlarning so'rilishini anglatadi, usul to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita ELISA ga bo'linadi.

To'g'ridan-to'g'ri ELISA yordamida kiritiladigan antijen inkubatsiya jarayonida bo'sh quduqlar yuzasiga o'rnatiladi, buning uchun sinov namunalari toza quduqlarga 20-25 daqiqa davomida joylashtiriladi, bu antijeni ularning yuzasiga yopishtirish uchun kerak. Shundan so'ng kerakli antikor qo'shiladi. Bundan tashqari, material ma'lum vaqt davomida aloqalarni shakllantirish uchun qoladi.

Antikorlar har doim ortiqcha miqdorda qo'shilib boriladi, shuning uchun ular mavjud bo'lsa ham, namunada antijenik antijenler qoladi va agar antijismlar umuman bo'lmasa, ular bilan bog'lanish bo'lmaydi. "Qo'shimcha" antikorlarni olib tashlash uchun dekantatsiya amalga oshiriladi, shundan keyingina antigen bilan aloqani yaratgan antikorlar qoladi.

Buning ortidan fermentativ reaktsiya - quduqlarga ferment eritmasi qo'shiladi, shundan so'ng hosil bo'lgan aloqalar ranglanadi.

Bilvosita ELISA usulida ilgari fermentativ reaktsiyaning substrati bilan birlashtirilgan antikorlar qo'llaniladi; bu holda antijismlarni antijenga bog'lab qo'yish inkubatsiya jarayonida yuz beradi, shundan so'ng quduqlar yuzasidagi bog'lanishlar safarbar qilinadi va keyinchalik kiritilgan konjugat va substrat-xromogen reagent reaktsiyani ranglantiradi.

Shunday qilib, bilvosita va to'g'ridan-to'g'ri usul o'rtasidagi asosiy farq bu materialni toza quduqlar yuzasiga yopishtirish emas, balki plastinkada immobilizatsiya qilingan antijen bilan bog'lashdir.

Reaktsiya jarayoni ixtisoslashgan asboblardan foydalangan holda to'xtatiladi, so'ng har bir quduq fotometrik jarayonga duchor bo'ladi, undan keyin ilgari o'tkazilgan nazorat namunalari bilan olingan natijaning qiyosiy tavsifi keltiriladi.

Agar namunada optik zichlikning ko'payishi aniqlansa, u holda test natijasidagi aniq antikorlarning kontsentratsiyasi ham ortiqcha baholanadi.

Tahlil tayyor bo'lganda

Tadqiqot ko'p vaqt talab qilmaydi, diagnostika choralariga qarab qonni olishdan tortib natijaga qadar 1 dan 10 kungacha.

Sinov natijalari va ularni talqin qilish

Bemor tomonidan qabul qilingan diagnostik shaklda immunoglobulinlarning ayrim sinflari uchun salbiy yoki ijobiy natija ko'rsatiladi, shuningdek turli xil antijismlarning miqdoriy ko'rsatkichi ko'rsatiladi.

Natijalarni har xil talqin qilish mumkin:

IgM (+) (IgA, IgG aniqlanmadi) - tiklanish jarayoni;
IgM (-); IgG (+), IgA (+) - surunkali yuqumli patologiya;
IgM, IgG, IgA (barchasi qiymati bilan) - infektsiyalarga qarshi himoya mexanizmlarining etishmasligi;
IgG (+/-) va IgA (+/-), IgM (+) - o'tkir jarayon;
IgM (-), IgA (-), IgG (+) - infektsiyadan keyingi immunitet;
IgM, IgG, IgA (+) - o'tkir bosqichda surunkali patologiya.

Masalan, agar IgG va IgM aniqlangan bo'lsa, bemorda quyidagi kasalliklardan biri bo'lishi mumkin:

virusli gepatit;
sitomegalovirus;
gerpes;
suvchechak;
xlamidiya;
stafilokok yoki streptokok infektsiyasi.

Ko'pincha gormonal tadqiqotlar uchun immunoassay fermenti buyuriladi, normalar jadvalda keltirilgan:

	Gormon nomi	Qavat	Norm
1	tiroglobulin	m / f	70 IU / ml gacha
2	tiroksin	m / f	64-146 nmol / l
3	triiodothyronine	m / f	1,8-2,8 nmol / l
4	Bepul tiroksin	m / f	11-25 pmol / l
5	Bepul triiodritonin	m / f	4.49-9.3 pmol / l
6	Testosteron, dehidrotestosteron	F	0,5-10 mU / l

ELISA tahlili - bu onkologik patologiyalarning paydo bo'lish ehtimolini baholashga imkon beradigan diagnostik tadqiqot. Biroq, natijalarni sharhlash faqat tashrif buyuradigan shifokor tomonidan amalga oshiriladi.

Sinov natijalarining ma'nosi

ELISA turli xil genital infektsiyalarni, shu jumladan sifilisni aniqlash uchun javob beradi va ko'pincha homilador ayollarni skrining uchun ishlatiladi.

Ushbu tadqiqot tufayli siz infektsiyaning qancha vaqt oldin paydo bo'lganligini va o'rganish paytida kasallikning bosqichini bilib olishingiz mumkin:

immunoglobulinlar M kasallikning davomiyligini ko'rsatadi;
IgA - bemor 30 kun oldin yuqtirgan;
IgG kasallikning "cho'qqisida" yoki terapiya yaqinda tugagan paytda topiladi.

Tadqiqot davomida, salbiy ko'rsatkichi bo'lgan plastinkadagi quduqlar rangsiz bo'lib qoladi va ijobiylari yorqin sariq rangga aylanadi. Agar ijobiy quduqlarning rangi boshqaruv rangiga mos kelmasa, natija shubhali deb hisoblanadi va qayta sinash kerak.

Immunoassayment fermenti OIV tashxisini qo'yishda birinchi qadamdir. Tahlil taxmin qilingan infektsiyadan so'ng darhol amalga oshirilmaydi, inkubatsiya davrining oxirigacha (14 kundan 6 oygacha) kutish kerak.

Tahlil jarayonida OIV-1 va OIV-2 ga qarshi antijismlar aniqlanadi, odatda G-sinfida antijismlar topiladi va A va M sinfidagi antikorlarni ularni erta bosqichlarda (inkubatsiya davrida) aniqlash mumkin.

agar birinchi sinov ijobiy bo'lsa, unda qon boshqa laboratoriya yordamchisi tomonidan qayta tekshiriladi;
takroriy ijobiy natija materialni qaytarib olishni anglatadi,
natija takrorlanganda bemorga immunoblotting buyuriladi.

OIV infektsiyasining mavjudligi to'g'risida yakuniy xulosa immunoblotning natijasidan keyin chiqariladi.

ELISA shuningdek sil kasalligini diagnostika qilish uchun ishlatiladi, ammo bemorda ushbu patologiyaga qarshi antikorlar aniqlangan bo'lsa ham, bu har doim ham sil kasalligi borligini tasdiqlayvermaydi, shuning uchun ELISA ko'pincha aniqlovchi yoki yashirin ekstrapulmoner shaklni aniqlash uchun ishlatiladi.

IgG - bosqinchilikning surunkali bosqichi

IgA - infektsiya 30 kun oldin paydo bo'lgan

IgG - bostirish o'tkir davrda

IgG - tashxisni tasdiqlaydi va terapiya samaradorligini ko'rsatadi

Tahlilning ijobiy va salbiy tomonlari

ELISA ko'plab afzalliklarga ega, bu uning shifokorlar va bemorlar orasida mashhurligini tushuntiradi:

natijaning yuqori aniqligi,
arzon narx,
tez natija,
kasallikning bosqichini aniqlash,
vaqt o'tishi bilan kasalliklarni boshqarish.

Biroq, afzalliklar bilan bir qatorda, bir noqulaylik ham mavjud - kamdan-kam hollarda tahlil noto'g'ri-ijobiy yoki noto'g'ri-salbiy.

Nima uchun natija ishonchsiz bo'lishi mumkin

Natijada yuzaga keladigan xatolar texnik buzilishlar tufayli yuzaga kelishi mumkin, chunki tahlil ma'lum antikorlarni ishlab chiqarish bilan tavsiflanadigan ma'lum surunkali kasalliklarga (romatoid omil) ega bo'lgan odamlarda ishonchsizdir.

Shuningdek, natijaga bemorlarning dori-darmonlarni qabul qilishi va metabolik kasalliklar ta'sir qiladi. Shu sabablarga ko'ra OIV va onkopatologiya uchun ijobiy natija takroriy namuna olishni talab qiladi.

Tadqiqot narxi

ELISA narxi diagnostika yo'nalishiga qarab o'zgaradi (rubl):

gepatit 250 -900;
viruslar - 250-1000;
OIV - 250-350;
gelmintik invaziyalar - 280 - 900;
sifiliz -150-250;
qo'ziqorin infektsiyalari 400-500.

Maqolaning dizayni: Lozinskiy Oleg

ELISA videosi

ELISA tahlili qanday amalga oshiriladi:

Odamning immunitet tanqisligi virusi infektsiyasi jiddiy tashxis hisoblanadi. Diagnostik xatolar halokatli oqibatlarga olib kelishi mumkin. OIV uchun ELISA testi tadqiqotning eng qulay usulidir, ammo har qanday holatda ham bu informatsion emas.

ELISA - ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili. ELISA usulining maqsadi biologik materialda immunitet tanqisligi virusiga antikorlarni aniqlashdir. Ushbu usul yordamida suyuqlik tarkibidagi viruslarni emas, balki ularning mavjudligiga javoban ishlab chiqarilgan antikorlarni kuzatish mumkin. Immunoassayment fermenti STD tashxisini qo'yishda keng qo'llaniladi. Bu jinsiy yo'l bilan yuqadigan infektsiyalarni aniqlashga yordam beradi.

ELISA ning bir nechta turlari mavjud: to'g'ridan-to'g'ri versiya, bilvosita versiya, "sendvich" usuli. Qanday bo'lmasin, usul chet el agentining kirib borishi indikatori bo'lib xizmat qiladigan antikorlarning mavjudligini aniqlashga asoslangan. Ushbu "belgilar" ni aniqlash uchun biologik tarkibiy qism fermentlar bilan ishlov beriladi.

Immunoassayment fermenti 96 - 98% aniqlikdagi antikorlarni aniqlaydi, xato ahamiyatsiz. Bu 2 - 4%.

ELISA - OIVni tashxislash usuli

OIV uchun ELISA testi tashxisning birinchi bosqichidir. Immunitet tanqisligi virusining antijenlari p24, p15, p17, p31 va glikoproteinlar gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Virusli oqsilni aniqlash uchun tomirdan qon namunasi olinadi. ELISA tomonidan qon tekshiruviga yuborilgan namuna immunoassay fermenti reaktivlari bilan davolanadi. Zardob qondan ajratilgan. Agar o'rganish paytida ular topilgan bo'lsa, unda virus allaqachon qonda mavjud.

Qon qat'iy ravishda bo'sh qoringa beriladi. Tahlil qilishdan 2 kun oldin yog'li ovqatlar va spirtli ichimliklarni iste'mol qilish tavsiya etilmaydi. Antiviral preparatlarni qabul qilishni 14 kundan keyin to'xtatishingiz kerak.

Usulning afzalliklari:

nisbatan arzon narx;
reaktivlarning yuqori barqarorligi;
yuqori sezuvchanlik;
qisqa muddat;
inson omilining minimal ta'siri.

Zamonaviy ELISA sinov tizimlari jahon standartlariga muvofiq ishlab chiqariladi. Bu usulning aniqligini yaxshilaydi.

Immunitetni oshiradigan ferment har doim ham ishonchli natijalarni bermaydi. Virus qon oqimiga kirgandan keyin rivojlanishning yashirin (latent) bosqichi boshlanadi. Viruslar ko'payib, antijismlar hali shakllanmagan davr "seronegativ oynaning vaqti" deb nomlanadi. Ushbu bosqichda ELISA qilish befoyda. Agar infektsiya bo'lsa, natija bo'ladi. Virus o'zini qanchalik tez aniqlayotgani tanaga qancha xavfli hujayralar kirganiga bog'liq. Himoyalanmagan jinsiy aloqa yoki kontaminatsiyalangan qon quyish bilan bu davr minimal bo'ladi.

OIV uchun ELISA ning yuqori ishonchliligi uchun o'rganish uch marta o'tkaziladi. Odamning immunitet tanqisligi virusi uchun ELISA shartlari:

mumkin bo'lgan aloqadan 6 hafta o'tgach,
3 oy ichida
olti oydan keyin.

OIV uchun 4-avlod ELISA - bu infektsiyaning dastlabki bosqichlarida eng informatsion usul. U infektsiyadan keyin 1 oy o'tgach amalga oshirilishi mumkin. Sinov 3-avlod analogiga nisbatan qimmatga tushadi. Shuning uchun davlat tibbiy muassasalarida qo'shimcha diagnostika usuli sifatida foydalaniladi. 3-test bepul o'tkaziladi, agar uning natijalariga ko'ra aniq javob berishning iloji bo'lmasa, bemor 4-avlod ELISAga yuboriladi.

Muhim!Bir marta yuqtirgan odam yuqumli kasallikka aylanadi. U boshqalar uchun xavfli, hatto uning tashxisi haqida hali bilmasa ham!

Agar ELISA OIV antijenlariga antikorlarni aniqlasa, qo'shimcha tadqiqotlar talab etiladi. Bularga quyidagilar kiradi. Ushbu usulning ishonchliligi 80% ni tashkil qiladi. PCR yordamida qon, sperma va vaginal oqindi tekshiriladi. Biologik suyuqlik tibbiy reaktorda parchalanadi, keyin fermentlar bilan davolanadi. Natijada suyuq muhitda OIV hujayralarining kontsentratsiyasi qanday ekanligi to'g'risida ma'lumotlar olinadi. Katta xato (20%) ijobiy natija tufayli qo'shimcha immunitet hosil bo'ladi.

Tashxisning keyingi bosqichi Combo testi (yoki immunitetning pasayishi). Bu juda sezgir tadqiqot (98% aniqlik), agar ELISA natijalari 6 oydan keyin noaniq bo'lsa.

ELISA natijalarini sharhlash

Shifrni ochish vaqti 24 dan 48 soatgacha. Agar zudlik bilan ma'lumot olishingiz kerak bo'lsa (jarrohlik aralashuvi talab etiladi), shifrni ochish 2 soat ichida amalga oshiriladi. Viloyat tibbiy markazlarida har doim kerakli reaktivlar mavjud emas. Namuna davolanish joyida olinadi, keyin u viloyat markaziga yuboriladi. Bunday sharoitda natijani 1-2 hafta ichida topish mumkin.

Immunoassayning fermenti natijasi ijobiy yoki salbiy bo'lishi mumkin; boshqa variantlar yo'q.

Agar birlamchi va takroriy ELISA natijasi ijobiy bo'lsa ham, bemor OITV bilan kasallangan deb tan olinmaydi. Noma'lum bo'lishi mumkin. Noto'g'ri ijobiy natija uchun sabablar:

surunkali kasalliklar;
uzoq muddatli yuqumli kasalliklar;
homiladorlik.

Shuning uchun tahlil natijasini qo'shimcha tadqiqotlar bilan aniqlashtirish kerak.

Agar OITVga qarshi reaktiv (reaktiv) immunitetni o'tkazishda odam OIV bilan kasallangan deb hisoblanadi, bu uning sog'lom ekanligini anglatadi.

Virusning hujayralari vaqt o'tishi bilan belgilangan dorilarga moslashadi. Tekshirish uchun, ELISA testi vaqti-vaqti bilan takrorlanadi.

Ba'zan G'arbiy nuqta noto'g'ri salbiy natijani ko'rsatadi. Immunitet tanqisligi virusi 6 oy (yoki undan ko'p) davomida juda kam uchraydi. Agar oz miqdordagi virus hujayralari qon oqimiga kirsa, bu mumkin. Umumiy holatlarning 0,5 foizida infektsiyani faqat bir yildan keyin tashxislash mumkin. 99,5% hollarda, infektsiyadan keyin olti oy ichida, ELISA paytida ishonchli natijaga erishiladi.

Hatto juda aniq tadqiqotlar bo'lsa ham, 2% xato darajasi hali ham mavjud. Biz inson omilini unutmasligimiz kerak. Xatolik ehtimolini yo'q qilish uchun sinov 2 xil muassasada o'tkazilishi mumkin.